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文档简介

1、选修实验训练(一)1、多环芳烃菲在染料、杀虫剂等生产过程中被广泛使用,是土壤、河水中常见的污染物之一。下图表示科研人员从被石油污染的土壤中分离获得能降解多环芳烃菲的菌株Q的主要步骤。请回答:(1)步骤的培养过程中,需将锥形瓶放在摇床上振荡,一方面使菌株与培养液充分接触,提高营养物质的利用率;另一方面能                         

2、;          。(2)步骤用平板划线法纯化菌株Q过程中,在做第二次以及其后的划线操作时,总是从上一次划线的末端开始划线,原因是                            。采用固体平板培养细菌时要倒置

3、培养的目的是           (3)接种环通过灼烧来灭菌,完成步骤中划线操作,共需灼烧接种环      次(4)为了获得分解多环芳烃菲能力更强的菌株,研究人员又对菌种Q进行了诱变处理,得到突变株K。为了进一步鉴定菌株K并比较两种菌株降解多环芳烃菲的能力,设计了下列实验,请补全实验步骤:取9只锥形瓶均分成三组,编号A、B、C向A、B、C三组锥形瓶中加入       

4、               的培养液。向A、B、C三组培养液中分别加入                        。28恒温培养3天后,测定     &#

5、160;                     。2、高温淀粉酶在大规模工业生产中是极为重要的酶制剂。研究者从热泉中筛选出了能高效产生高温淀粉酶的嗜热菌。其筛选过程如下图所示。(1)进行过程的目的是     ;过程所使用的接种方法是         

6、; 。(2)I、II号培养基配制和灭菌时,灭菌与调节pH的先后顺序是     ;对培养基常用       方法进行灭菌。对于空气中的细菌可用 法进行消毒。如果要检测灭菌是否彻底,可以采用的方法是:           。(3)部分嗜热菌在I号培养基上生长时可释放      分解培养基中的淀粉,在不同

7、菌落周围形成大小不同的透明圈,应挑出      的菌落,接种到II号培养基。(4)根据培养基上出现的菌落数目和稀释倍数计算得出细菌数目往往比实际的数目低,原因是           。3、下面是某同学自己制作果酒、果醋的实验流程示意图。发酵罐1和发酵罐2中的微生物在结构上的主要区别是前者            

8、;         ,要保证酒精发酵和醋酸发酵的正常进行,除了满足适宜的温度、pH等条件外,还必须            。根据发酵罐1中微生物形态、数量可以判断哪种类型是优势菌种,最简单的方法是       ,此种方法获得的优势菌种的数量       

9、60;       (大于、等于、小于)发酵罐1优势菌种活菌的数量。下图表示纯化菌种的操作过程,过程一是            方法,过程二是            方法,欲从发酵罐2分离出优势菌种应选用过程     ,原因是   

10、;                  。4、图表示血红蛋白提取和分离的部分实验装置,请回答下列问题:(1)血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分,其在红细胞中的作用体现了蛋白质具有 功能。我们通常选用猪、牛、羊等动物的血液进行实验,实验前取新鲜的血液,要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠,取血回来,马上进行离心,收集血红蛋白溶液。加入柠檬酸钠的目的是 。(2)甲装置中,B是血红蛋白溶液,则A是 乙装置中,C溶液的作用是

11、。(3)甲装置用于 ,目的是 。用乙装置分离蛋白质的方法叫 ,是根据 分离蛋白质的有效方法。在操作中加样(右图)的正确顺序是 _。(4)最后经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳进行 。选修实验训练(二)1、烧伤病人容易感染绿脓杆菌,引起化脓性感染,比阿培南、美罗培南、头抱菌素和碳青霉烯类抗生素都是非常经典的抗绿脓杆菌的药物。临床使用抗生素前,有时需要做细菌耐药实验。实验时,从病人身上获取少量样本,按照一定的实验步骤操作,以确定该病人体内的绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性。(1)获取绿脓杆菌单菌落:配制适于绿脓杆菌生长的培养基,培养基中的营养成分一般含有 、 、水和无机盐,调节pH至7,灭菌处理,待培养基冷却

12、至50时,在 附近倒平板。经过选择培养、鉴别等步骤获得单菌落。 (2)检测绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性:取该单菌落适当稀释,用 法接种于固体培养基表面,使其均匀生长,布满平板。将分别含等剂量的比阿培南、美罗培南、头抱菌素和碳青霉烯类抗生素的同大小的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置,适宜条件培养一段时间,结果是含不同抗生素的滤纸片周围均出现透明圈,这说明绿脓杆菌对上述抗生素 ;含头抱菌素的滤纸片周围的透明圈比含美罗培南的小,这说明 ;含比阿培南、碳青霉烯类的滤纸片周围的透明圈也比含美罗培南的小,且比阿培南透明圈中出现了一个菌落,请推测此菌落产生的可能原因:一是 ,二是 。(3)根据上述实验结果,

13、为达到抗绿脓杆菌的目的,对于该患者来说最好应选用抗生素 。2、回答下列关于微生物和酶的问题。高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如图所示。(1)过程称为_,过程是为了_。(2)号培养基称为_(按功能分);该培养基中除了加入淀粉外,还需加入另一种重要的营养成分_。A琼脂  B葡萄糖  C硝酸铵  D碳酸氢钠(3)一般对配制的培养基采用高压灭菌,其中“高压”是为了_。在高温淀粉酶运用到工业生产前,需对该酶的最佳温度范围进行测定。图中的曲线表示酶在各种温度下酶活性相对最高酶活性的百分比。将酶在不同温度下保

14、温足够长的时间,再在酶活性最高的温度下测其残余酶活性,由此得到的数据为酶的热稳定性数据,即图中的曲线。(4)根据图中的数据,判断该酶使用的最佳温度范围是_。A4050                   B5060C6070               

15、60;   D7080(5)据图判断下列叙述错误的是_。A该酶只能在最佳温度范围内测出活性B曲线35数据点是在80时测得的C曲线表明80是该酶活性最高的温度D曲线表明该酶的热稳定性在70之后急剧下降3、下图是苹果醋的制作简图,据图回答:(1)果汁中的果胶不仅影响_率,还使果汁浑浊,制备时常加入来自_等微生物的果胶酶。(2)果胶是植物 和 的主要组成成分之一,它是由 聚合而成的一种高分子化合物不溶于水。(3)果胶酶是一类酶的总称,包括 、 、 等。(4)过程中使用到的微生物是_,若培养液中乙醇浓度超过_往往使其死亡,发酵装置中往往放置一装有水的弯曲玻璃管,除了防止氧

16、气进入、防止杂菌污染外,还有的作用是_。(5)过程中使用到的微生物是醋杆菌,代谢类型是_型。该微生物培养方法是:第一步:配置培养基。第二步:对培养基用_方法进行灭菌。第三步:接种。微生物常用的接种方法有:_。第四步:培养。第五步:挑选符合要求的菌落。选修实验训练(二)答案1、(1)碳源   氮源   酒精灯火焰(2)涂布法   敏感   绿脓杆菌对头孢菌素的敏感性比对美罗培南弱     杂菌污染  

17、0; 抗比阿培南的绿脓杆菌(或绿脓杆菌产生耐药性突变)形成的菌落(3)美罗培南2、(1)稀释 单个菌落的筛选(或筛选)(2)选择培养基  C(3)杀死培养基中包括细菌芽孢在内的所有生物(4)C(5)A3、(1)出汁,黑曲霉(或苹果青霉),(2)酵母菌,16%   排出发酵过程中产生的CO2,减小瓶中压力。(3)异养需氧,高压蒸汽,平板划线法(或 稀释涂布平板法)选修实验训练(三)1、某化工厂的污水池中含有一种有害的、难以降解的有机化合物A,研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基成功筛选到能高效降解化合物A的

18、细菌。实验的主要步骤如下图所示,请分析回答:(1)培养基中加入化合物A的目的是筛选              ,这种培养基从用途上分属于            培养基。培养基灭菌的常用方法是利用高温可以使微生物的_等物质发生变性。(2)化合物A为“目的菌”生长提供      &#

19、160; 。培养过程中震荡的目的是                  。(3)转为固体培养时,常采用          的方法接种,以便于分离和计数。(4)若研究“目的菌”的群体生长规律,将单个菌落进行液体培养,可采用     的方法进行计数。若以一个大方格(体积为0.

20、1 mm3)有25个中方格的计数板为例进行计算,设五个中方格中总菌数为B,菌液稀释倍数为C,那么原菌液的菌群密度为       个/mL。(5)实验结束时,使用过的培养基应该进行               处理后,才能倒掉。(6)为研究化合物A初始浓度对菌株降解能力的影响,做了有关实验并得到如下图结果由图可知,若要得到较好的降解效果,化合物A的初始浓度应该为 

21、60;   。(A、小于1600/L  B、小于1200/LC、1200/L与1600/L之间)化合物A浓度(mg/L)2、胡萝卜素是一种常用的食用色素,可分别从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体中提取获得,流程如下:(1)筛选产胡萝卜素的酵母菌R时,可选用稀释涂布平板法或   。采用后一种方法接种时需先灼烧接种环,其目的是。(2)培养酵母菌R时,培养基中的蔗糖和硝酸盐可分别为酵母菌R的生长提供  。欲纯化此工程菌,可以采用_法将菌种接种在_培养基上,以获得_菌落;进行扩大培养时,应选用_培养基。 

22、(3)从胡萝卜中提取胡萝卜素时,干燥过程应控制好和时间以防止胡萝卜素分解;萃取过程中宜采用水浴方式加热以防止;萃取液浓缩前需进行,其目的是去掉不溶物。 (4)纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素,鉴定过程中需用 作为(实验)对照。4、 红细胞含有大量血红蛋白,常用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行提取和分离血红蛋白。血红蛋白的提取和分离一般可分四步:样品处理、      、      和纯度鉴定。实验前取新鲜的血液取血后一般要在采血容器中预先加入柠檬酸钠,加

23、入柠檬酸钠的目的是              。通过凝胶色谱法将样品进一步纯化,该方法的原理是相对分子质量较小的蛋白质扩散进入凝胶内部的通道,通过凝胶柱的路程     ,移动速度       ;相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道,只能在凝胶外移动,路程和移动速度刚好相反,相对分子质量不同的蛋白质分子因而得以分离。最后经

24、0;       电泳进行纯度鉴定。选修实验训练(三)答案1、(1)目的菌(能降解有机化合物A的细菌)选择      蛋白质和核酸(2)碳源、氮源(能源)        提供氧气、使营养物质与细菌充分接触(3)稀释涂布平板法 (4)定期取样50000BC (5)灭菌  (6)B2、(1)平板划线法接种灭菌   

25、0; (2)碳源、氮源  划线(或稀释涂布)   固体   单个  液体 (3)温度温度过高)  过滤  (4) 胡萝卜素标准品4、适当浓度的氯化钠  酒精  白色丝状物  二苯胺 TapDNA聚合酶(或耐高温的DNA聚合酶) 粗分离  纯化  防止血液的凝固 较长  较慢   SDS聚丙烯酰胺凝胶

26、选修实验训练(四)1、胡萝卜素通常是橘黄色结晶,化学性质比较稳定,不溶于水,微溶于乙醇,易溶于石油醚等有机褡剂,其中一胡萝卜素具有非常重要的功用,因此胡萝卜素的提取及鉴定引起人们很大的兴趣。胡萝卜素的萃取实验流程为:(1)工业提取天然胡萝卜素除了可以从植物中提取天然胡萝卜素外,还可以从养殖的岩藻中获得或者利用        生产。(2)干燥注意控制温度和时间,这是因为        。(3)萃取的效率主要取决于  &

27、#160;     。(4)萃取过程用到的有机溶剂应该具有很高的        ,能够充分溶解萝卜素,并且不与水混溶。(5)左图为胡萝卜素粗品鉴定装置示意图,右图为鉴定结果示意图,请据图回答下列问题。胡萝卜素粗品鉴定的方法名称是        。a的作用是           &

28、#160;      .A、B、C、D四点中,属于标样的样点是         .乙代表的物质是       。2、微生物强化采油(MEOR)是利用某些微生物能降解石油,增大石油的乳化度,降低石油粘度的原理,通过向油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术。以下是人们筛选、纯化和扩大培养该类微生物的实验操作。请回答下列问题:(1)土壤是微生物的大本营,该类微生物应取自_的土壤。(2)为筛选和纯化该

29、类微生物,从功能上分,应选用_培养基,此培养基中添加_作为微生物生长的唯一碳源。培养基灭菌采用的最适方法是_ _法。常用的接种方法是_ _和_。(3)接种后需密封培养,由此推测该类微生物的代谢类型是_ _,培养一段时间后在培养基上形成降油圈,此时选取_就可获得高效菌株。3、乐果是一种广泛使用且含有机磷的农药,其残毒会对土壤造成严重污染。研究表明,阴沟肠杆菌、枯草芽孢杆菌等都对乐果有降解作用,可以用于修复由乐果造成的农田土壤污染。请分析回答下列问题:(1)能分解乐果的阴沟肠杆菌、枯草芽孢杆菌等基本都分布在土壤的表层,它们的代谢类型应是     &

30、#160;      ,在生态系统的成分中属于           。(2)为比较阴沟肠杆菌、枯草芽孢杆菌对乐果的降解效率,课外小组的同学作了如下实验:配制液体培养基。配制培养基时,除加入必要的营养物质,还必须加入     。将配好的培养基均分为甲、乙两组,进行          

31、;  。各取阴沟肠杆菌、枯草芽孢杆菌的新鲜菌液lml,分别接种到上述甲、乙培养基中,适宜条件下培养48h。48h后通过检测                 ,可以比较阴沟肠杆菌、枯草芽孢杆菌对乐果的降解效率。(3)农田中长期施用乐果会使动物的种类和数量减少。若要调查某农田中华大蟾蜍的种群密度,应采用            法。因污染太严重而废弃的农田在污染停止后将发生的群落演替,其类型属于             

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