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文档简介
1、透射反射偏光显微镜一、实验目的1.熟悉透射反射偏光显微镜的使用方法和工作原理。2.通过亲自使用透射反射偏光显微镜对样品拍照,进一步加深对透射反射偏光显微镜了解。3.学会分析对由透射反射显微镜产生的图像进行分析。二、实验原理 偏光显微是鉴定物质细微结构光学性质的一种显微镜。凡具有双折射性的物质,在偏光显微镜下就能分辨的清楚,当然这些物质也可用染色法来进行观察,但有些则不可能,而必须利用偏光显微镜。 偏光显微镜的特点,就是将普通光改变为偏振光进行镜检的方法,以鉴别某一物质是单折射性(各向同性)或双折射性(各向异性)。 双折射性是晶体的基本特征。因此,偏光显微镜被广泛地应用在矿物、化学等领域。在生物
2、学中,很多结构也具有双折射性,这就需要利用偏光显微镜加以区分。在植物学方面,如鉴别纤维、染色体、纺锤丝、淀粉粒、细胞壁以及细胞质与组织中是否含有晶体等。在植物病理上,病菌的入侵,常引起组织内化学性质的改变,可以偏光显微术进行鉴别。在人体及动物学方面,常利用偏光显微术来鉴别骨骷、牙齿、胆固醇、神经纤维、肿瘤细胞、横纹肌和毛发等。 热台显微镜的工作原理是将普通光改变为偏振光进行镜检,以鉴别某一物质是单折射(各向同行)或双折射性(各向异性)。其中,双折射性是晶体的基本特性。偏光显微镜是根据有关物质所具有的偏光性,可以进行定性观察和定量测定,因此偏光显微镜可用作物质鉴定。其广泛地应用于矿物、晶体等各种
3、具有双折射性偏光物质的观察、研究和鉴别。热台显微镜是研究物质的结构最常用的物理方法之一,适用于岩石薄片、玻璃、陶瓷、塑料、高分子材料等多种样品的偏光特性高级观察分析。 偏光原理是偏光显微镜的核心部分:光可以看作是由一些微小的波构成的,这些波可以在任何一个平面上振动。在一个特定的光束中,波的振动方向分上下振动,左右振动和对角方向振动,振动方向可能均匀地分布在所有各个方向上,没有一个振动平面占优势或者在光波中比其他平面占有更大的份额。 晶体是由排成规整的行列和平面的原子或原子团构成的。当光波的振动平面恰巧能塞进两个原子平面之间时,它就很容易通过这块晶体;要是它的振动平面与原子的平面成一个角度,它就
4、会撞在原子上,光波就要消耗很多能量方能继续振动下去,这样的光会局部或全部被吸收掉。 有些晶体能够强迫光波把所有能量分成两束分离的光线,这时。动平面就不再均匀分布了。在其中的一个光束中,所有的波都在一个特定的平面上振动;而在另一个光束中,所有的波都在与第一束光的平面成直角的平面上振动,不可能出现任何对角方向的振动。 当光波被迫在某一特定的平面上振动时,称“面偏振光”或“偏振光”。朝着所有各个方向振动的普通光是“非偏振光”,西方国家把偏振光称为“极化光”。 偏振眼镜片(它是在塑料中嵌入许多细小的这类晶体)就是以上述方式吸收掉许多光,由于这种镜片着色,吸收掉的光就更多了,这种镜片就是这样消除眩目的强
5、光的。 当偏振光通过含有某种不对称分子的溶液时,它的振动平面会被扭转一个角度。化学家根据这种扭转的方向和角度的大小,就能够对这种分子的真实结构作出许多推断,特别是对于有机化合物的分子更是如此。正因为这样,偏振光对于化学理论来说,一直是极其重要的。3、 仪器设备设备名称:透射反射偏光显微镜及计算机控制检验台规格、型号:DM2500P 透射反射偏光显微镜;THMS600/CI94 计算机控制检验台生产厂家:投射反射偏光显微镜为德国徕卡公司产品;计算机控制检验台为英国Linkam 公司产品。该显微镜由镜座、镜柱、镜臂、镜筒、物镜转换器(旋转器)、镜台(载物台)、细准焦螺旋、粗准焦螺旋、目镜、物镜等组
6、成。该仪器可以进行数字化的操作,不需要观察目镜,产生的图形能直接通过仪器转换到计算机上并形成图形。主要技术指标:1)透射反射偏光显微镜(1)2 档调焦,180 检偏镜;(2)适用于反射偏光和反射DIC(Pol&ICR)的Smith 镜;(3)LH 107/2 12V 100W 灯箱,单投射;(4)UCA/P 带6 位转盘,用于厚片或热台;(5)安装于物镜转换盘上方的全波长镜;(6)安装于物镜转换盘上方的1/4 波长镜;(7)360 度偏光镜,带热保护膜;(8)R/P 起偏镜,到0、45、90 度定位;(9)N PLAN(5×、10×),HI PLAN(40×
7、;)物镜系列,10×/22M+目镜;(10)标准滤镜组合(日光、绿色、中灰)2)计算机控制检验台(1)温度范围:室温到600;(2)温度设定:100 段温度程序;(3)温度精度/稳定性:0.1/小于0.01;(4)光孔直径:2.4mm;(5)样品X、Y 轴向移动:16mm;(6)加热/冷却速率:0.1-130/min;(7)超薄热台窗口:0.17 mm;(8)最小物镜/聚光镜工作距离:4.5/12.5 mm;(9)气密样品腔室,可充入保护性气体。四、实验步骤1、打开电源;2、在载物台上放置样品;3、将倍率调到低倍率;4、将载物台其上升,调节粗螺纹在低倍镜下寻找目标点;5、找到目标后,可以细调将图像调节清晰;在调节的过程中,可以根据需要,自己调节光源的强度,得到处于最清晰的状态的图像。6、保存图像;7、图像分析。5、 图
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