生物技术制药考试题复习

1、一：选择题1、酶的主要来源是（C）A、生物体中分离纯化R化学合成C、微生物生产D动/植物细胞与组织培养2、所谓“第三代生物技术”是指（A）A、海洋生物技术B、细胞融合技术C、单克隆技术D干细胞技术3、菌体生长所需能量与菌体有氧代谢所能提供的能量在什么情况下，菌体往往会产生代谢副产物乙酸：（A）A、大于B、等于C、小于D无关4、促红细胞生长素（EPO基因能在大肠杆菌中表达，但却不能用大肠杆菌的基因工程菌生产人的促红细胞生长素，这是因为：（E）A、人的促红细胞生长素对大肠杆菌有毒性作用B、人促红细胞生长素基因在大肠杆菌中极不稳定G大肠杆菌内毒素与人的促红细胞生长素特异性结合并使其灭活D人的促红细胞

2、生长素对大肠杆菌蛋白水解酶极为敏感E、大肠杆菌不能使人的促红细胞生长素糖基化5、目前基因治疗最常用的载体是:（B）A、腺病毒B、反转录病毒G腺相关病毒D痘苗病毒E、疱疹病毒6、cDNAS一链合成所需的引物是：（D）A、PolyABPolyCGPolyGDPolyTE、发夹结构7、为了减轻工程菌的代谢负荷，提高外源基因的表达水平，可以采取的措施有：（A）A将宿主细胞生长和外源基因的表达分成两个阶段B、在宿主细胞快速生长的同时诱导基因表达C、当宿主细胞快速生长时抑制重组质粒的表达D当宿主细胞快速生长时诱导重组质粒的复制8、基因工程制药在选择基因表达系统时,首先应考虑的是：（A）A、表达产物的功能B

3、、表达产物的产量C.表达产物的稳定性D.表达产物分离纯化的难易9、疫苗出产前需进行理化鉴定、效力鉴定和|（朱全性鉴定）。10、基因工程药物的化学本质属于：（C）A.糖类B.脂类C.蛋白质和多肽类D.氨基酸类11、用聚二乙醇（PEG诱导细胞融合时，下列错误的是：（C）A、PEG勺相对分子量大，促进融合率高B、PEG勺浓度高，促进融合率高C、PEG勺相对分子量小，促进融合率高1DPEG勺最佳相对分子量为400012、以大肠杆菌为目的基因的表达体系，下列正确的是：（C）A、表达产物为糖基化蛋白质R表达产物存在的部位是在菌体内C、容易培养，产物提纯简单|D、表达产物为天然产物13、人类第一个基因工程药

4、物是：（A）A、人胰岛素B、重组链激酶C、促红细胞生成素D乙型肝炎疫苗14、下列不属于加工改造后的抗体是：（C）A、人-鼠嵌合抗体R单链抗体C、鼠源性单克隆抗体D单域抗体15、动物细胞培养的条件中，不正确的区（D）A.最适pH为7.2-7.4B.最适温度为37±0.5CC.最理想的渗透压为290-300mOsm/kgD.氧浓度为100%16、第三代抗体是指：（D）A、B淋巴细胞合成和分泌的球蛋白B、多发性骨髓瘤细胞产生的免疫球蛋白G融合细胞产生的单克隆抗体D-利用基因工程技术制备的基因工程抗17、现代生物技术的标志是：（C）A、DNAS补双螺旋结构模型的提出B、DNAW序技术的诞生C

5、、第一只克隆羊“多莉”的诞生D人类基因组草图的完成18、获得目的基因最常用的方法是：（B）A、化学合成法BPCRfc术C、逆转录法DDNAK针技术19、疫苗组成是由抗原和（佐剂）|组成20、鸟枪法克隆目的基因的战略适用于（A）A、原核细菌B、酵母菌C、丝状真菌D、植物E、人类21、cDNA法获得目的基因的优点是：（B）A.成功率高B.不含内含子C.操作简便D.表达产物可以分泌E.能纠正密码子的偏爱性22、有机相酶反应的优点：1.有利于疏水性底物的反应；2.可提高酶的热稳定性；3.从低沸点的溶剂中易分离纯化产物；4.热力学平衡向产物方向移动如脂合成和肽合成；5.减少由水引起的副反应，如水解反应；

6、6.酶易于实现固定化；7.酶和产物易于回收；8.可避免微生物污染：23、抗体发展阶段：抗血清、单克隆抗体、基因工程抗体。24、25、凝胶过滤层析进行分离的依据是：分大小26、质粒载体必备三要素：复制子、选择标记、多克隆位点。27、体外培养动物细胞三类型:贴壁依赖性细胞、非贴壁依赖性细胞、兼性贴壁细胞。28、下列关于细胞冻存及复苏过程的描述不确的是（B）。A.冻存的细胞提前一天更换全部培养液B.细胞冻存的原则为快速冻存C.每只冻存管中以冻存（11.5）X106个细胞为官D.冻存液中含有8%二甲基亚碉E.复苏时将冻存细胞从液氮中取出迅速投入42c温水中速溶29、能将IgG水解成两个抗原片段和一个可

7、结晶片段的是:（卜瓜蛋白酶）。30、单克隆技术抗体是B细胞和（杂交瘤细胞）的结合。31、所谓“第二代基因工程”是指（A）A、蛋白质工程R细胞工程G酶工程D抗体工程32、酶和细胞固定化最常用、最有效的方法是：（A）A、载体结合法R交联法G包埋法D选择性热变性法33、真核基因在大肠杆菌中以融合蛋白形式表达，下列错误的是：（D）A、基因操彳简便B、只能作抗原用G容易实现高效表达D易被细菌酶类水解34、目前应用最广泛的产酶菌是：（A）A.大肠杆菌B.枯草杆菌C.青霉菌D.链霉菌35、大肠杆菌的基因表达系统为（A）A、pBV220/pETBYEp/YRpCpUC/入gt11DpBR322/人gt1036

8、、用于生产a-干扰素的动物细胞是（A）A、NamalumNamalwaBVeroGWI-38DMIRC-537、外源基因在动物细胞与大肠杆菌中表达产物的主要区别是（A）A.糖基化B.产量高C.性质稳定D.疗效可靠38、基因表达最常用的宿主菌是（A）A.大肠杆菌B.枯草芽抱杆菌C.链霉菌D.酵母39、筛选杂交瘤细胞（脾-瘤融合细胞）选用的培养基是（B）AHTB、HATGRMP1640DBME40、采用凝胶过滤法分离单克隆抗体，最高峰属于（A）AIgGB、IgMC、IgADIgE41、改造鼠源性单克隆抗体的首要目的是（C）A、降低相对分子量B、增加组织通透性"降低免疫源性D延长半衰期42

9、、鼠源性单克隆抗体改造后得到小分子抗体，常用的是（B）A、单域抗体B、单链抗体GFab片段抗体D最小识别单位43、最具有抗原活性的蛋白是：（丙，球蛋白）。44、基因工程的单元操作顺序是（A）A.酶切，连接，转化，筛选，验证|B.酶切，转化，连接，筛选，验证C.连接，转化，筛选，验证，酶切D.验证，酶切，连接，筛选，转化E.酶切，连接，筛选，转化，验证45、CHO-K1细胞来源于：答案：中国仓鼠卵巢。46、下列五个DNAt段含有回文结构的是（D）A.GAAACTGCTTTGACB.GAAACTGGAAACTGC.GAAACTGGTCAAAGd|.GAAACTGCAgTtTCE.GAAACTGCA

10、GAAAG47、48、T4-DNA连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段DNAt段连接在一起，其底物的关键基团是（DA.2'-OH和5'-PB.2'-OH和3'-PC.3'-OH和2'-PD.3'-OH和5'-PE.5'-OH和3'-P49、目前工业上生产酶的方法大多数是（微物发酵）。50、若某质粒带有lacZ标记基因，那么与之相匹配的筛选方法是在筛选培养基中加入（DA、半乳糖B、葡萄糖C、蔗糖D5-澳-4-氯-3-呷咪基-b-D-半乳糖甘（X-gal|）E、异丙基琉基-b-半乳糖昔（IPTG51、对酶活性有影响的物理化

11、学方法是（温度，pH值，酶的浓度，底物浓度，激活剂，抑制剂）52、分子杂交的化学原理是形成（E）A.共价键B.离子键C.疏水键D.配位键El氢键二、填空题1、人工化学合成DNA形成的核甘酸的合成方向是（3'-5'）,合成的DNA5末端是（-P）,3'末端是（-OH）。2、理想载体应具备的条件：（至少有一个复制起点，ft多克隆位点，具备转化的功能，遗传/记基因，|具有较高的载装能力）:3、进行PCRH曾DNA寸，反映体系应加入（DNA真板，DNAIK合酶，引物，dNTP的缓冲液）4、细胞培养基三大类：（中培养基，合成培养基，无血清培养基）。5、质粒DNAE种构型：（J价闭

12、合环状DNA（cccDNA）,开环DNA（ocDNA）,线状DNA（1DNA）06、微生物转化中常用的微生物有：（细H，真菌，放线菌）。7、生物技术的核心与关键是（基因工程）,生物技术的基础是小化工程|）,生物技术的条件是伴田胞工程），生物技术获得最终产物的手段是（发酵工程限8、PCR全称是不合酶专S反应），以（mRNA）；引物，基本反应步骤是性，退火，延伸）。9、在翻译过程中mRNAf核糖体的结合位点：（SD序列SD序列与起始密码子AUR间的距离）。10、克隆真核基因常用的方法：（逆专录法，化学合成法）。11、将抗体转变为酶的四种途径：（诱，,拷贝，引入，化学修饰）。12、酶固定法中包埋法有

13、（网格型和微型）两种。13、噬菌体表达载体有（穿梭，插入，置换）卜种。14、鼠源性单克隆抗体改造后的小分子抗体类型（人-鼠联合抗体，改形抗体，Fab抗体，单链抗体，单域抗体，分子识别单位）。15、抗体药物的特点：（多样性，定向性，特异性）。16、质粒载体结构包括：（复制子，选择标记，多克隆位点）。17、蛋白质药物按分子大小提取方法：（透析，层析，离心，超滤）。18、核酸类药物分为：（反义核酸，核酶，脱氢核酶，抗基因寡核甘酸，裸DNAS苗，基因药物）。19、动物细胞的培养条件：（培养温度，pH值，通氧量，防止污染，基本营养物质，渗透压）。20、根据动物细胞对生长基质的依赖性可分为:（1占壁依赖性

14、细胞，非贴壁依赖性细胞，兼性贴壁细胞）|。21、答案：感受态细胞。22、三、简答题五、问答题1、简述生物药物与生物技术药物的内涵。答：生物药物是指运用生物学、医学、生物化学等的研究成果，综合利用物理学、化学、生物化学、生物技术和药学等学科的原理和方法，利用生物体、生物组织、细胞、体液等制造的一类用于预防、治疗和诊断的制品。生物药物，包括生物技术药物和原生物制药。生物技术药物：是指采用DNA®组技术或其他创新生物技术生产的治疗药物。细胞因子类药物、激素类药物、酶与辅酶类药物、疫苗、单克隆抗体药物、反义核酸药物、RNArF扰（RNAi）药物、基因治疗药物。2、简述生物技术药物和生物技术制

15、药的概念。答：生物技术药物是指采用DNAt组技术或其他生物技术生产的用于预防、治疗和诊断疾病的药物；生物技术制药是指利用基因工程、细胞工程、发酵工程、酶工程、蛋白质工程等生物技术，来研究、开发和生产用于预防、治疗和诊断疾病的药物。3、比较基因工程疫苗与传统疫苗？答：传统疫苗是用人工变异或从自然界筛选获得的减毒或无毒的活的病原微生物制成的制剂或用理化方法将病原微生物杀死制备的生物制剂。传统疫苗受制作工艺的限制，其保存、使用和接种副反应等方面都容易出现一些问题。基因工程疫苗指使用重组DN徽术克隆并表达保护性抗原基因，利用表达的抗原产物，或重组体本身制成的疫苗。基因工程亚单位疫苗优点：纯度高；产量高

16、。易制备。安全性好。这种疫苗稳定性好，免疫期长，便于保存和运输。4、如何控制基因工程药物的质量？答：原材料：主要检查目的基因、表达载体及宿主细胞（如细菌、酵母、人和动物的细胞），防止其产生我们不想要的遗传变异。培养过程：无论是发酵还是细胞生产，关键是保证基因的稳定性和不被污染。主要控制生产用的细胞库、有限代次的生产、连续培养过程。纯化工艺过程：要求能保证去除微量DNA糖类、残余宿主蛋白质、纯化过程带入的有害化学物质、致热原，或者将这类杂质减少至允许量。最终产品：主要表现在生物学效价测定、蛋白质纯度检查、蛋白质的比活性、蛋白质的性质鉴定几个方面。杂质检测：蛋白类，由于降解、聚合或者错误折叠而造成

17、的目的蛋白变构体在体内往往会导致抗体的产生；非蛋白类，主要有细菌、病毒、热原质和DNA几种类型，往往在极低的水平就可产生严重的危害作用。安全性试验：其中的无菌试验、热原试验、安全性和毒性试验按我国新颁布的中国生物制品规程进行。5、简述单克隆抗体的制备。答：（1）对动物注射特定的抗原蛋白，使其产生免疫反应；提取合成专一性抗体的单个B淋巴细胞，但这种B淋巴细胞不能在体外生长。（2）.应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，得到杂交瘤细胞。这种细胞既具有B淋巴细胞合成专一抗体的特性，也有骨髓瘤细胞能在体外培养增殖永存的特性。（3）对杂交瘤细胞进行细胞培养，用特定的选择培养基选出所需要的细胞群，

18、体外或体内培养，从培养液或动物腹水中提取单克隆抗体。6、简述基因工程操作流程。答：1目的基因的获取2构建表达载体3将重组DNAt入受体细胞4重组DNAffi选与鉴定4目的基因的检测与表达7、动物大规模培养有哪些方式？答：（1）悬浮培养法、（2）微载体培养法、（3）多孔载体培养法、（4）微囊化培养法、（5）中空纤维培养法。8、生产用动物细胞的种类有哪些？各有什么特点？答：（1）原代细胞,特点：不能直接获得，需临时制备，生长不旺盛；（2）传代细胞系，特点：接触抑制和贴壁依赖性，增值能力有限，无致瘤性；（3）转化细胞系，特点：无限增殖，倍增时间短，较低的营养条件要求，适用于大规模生产；（4）工程细胞系（包括融合细胞系和基因工程细胞系），特点：稳定遗传9、获得部分或全部人员化的质量抗体采用何种方法？10、何为治疗性疫苗？比较治疗性疫苗和预防性疫苗的主要区别。（p129）.答：治疗性疫苗：指在已感染病原生物或患某些疾病的机体中，通过诱生机体的特异性或非特异性免疫应答，以达到治疗或防止疾病恶化的天然、人工修饰合成或用基因重组技术表达的产品或生物制品。区别：a.使用对象不同：治疗性疫苗的使用对象为已病者，而预防性疫苗的使用