药物的杂质检查

1、第三章第三章 药物的杂质检查药物的杂质检查 一）药物的纯度要求一）药物的纯度要求 1.1.药物的纯度药物的纯度 药物纯净的程度药物纯净的程度 药品质量的重要指标药品质量的重要指标一、概述一、概述一、概述一、概述 一）药物的纯度要求一）药物的纯度要求 药物纯度与试剂纯度药物纯度与试剂纯度 共同点：共同点： 杂质杂质 右旋体右旋体 =12=12倍倍一、概述一、概述 二）杂质来源与种类二）杂质来源与种类b b 立体异构立体异构 如：如：V VA A全反式生物活性为最高全反式生物活性为最高一、概述一、概述 二）杂质来源与种类二）杂质来源与种类 c c 晶型晶型 如：甲苯咪唑如：甲苯咪唑A A、B B、

2、C C晶型晶型 驱虫率驱虫率: : C C晶型晶型90%90% B B晶型晶型4040 60%60% A A晶型晶型20%0.1mol/L0.1mol/L，灵敏度，灵敏度 50ml 50ml中含稀盐酸中含稀盐酸2ml2ml（pHpH为为1 1） 二、一般杂质的检查二、一般杂质的检查五五硫硫酸酸盐盐检检查查法法（2）最适检测浓度）最适检测浓度 标准硫酸钾溶液：标准硫酸钾溶液：0.1mg/ml SO42- 0.10.5mg SO42-/50ml 二、一般杂质的检查二、一般杂质的检查五五硫硫酸酸盐盐检检查查法法（3）供试溶液不澄清）供试溶液不澄清 含盐酸水洗涤滤纸硫酸盐后过滤含盐酸水洗涤滤纸硫酸盐后

3、过滤（4）供试液有色）供试液有色 处理方法通同氯化物处理方法通同氯化物 二、一般杂质的检查二、一般杂质的检查六六炽炽灼灼残残渣渣检检查查法法 有机药物或挥发性的无机药物有机药物或挥发性的无机药物 H2SO4处理处理 700-800炽灼至完全灰化炽灼至完全灰化 残留物质残留物质 限量一般为限量一般为0.1%0.2% 二、一般杂质的检查二、一般杂质的检查六六炽炽灼灼残残渣渣检检查查法法 方法：方法： 坩埚中炭化坩埚中炭化 加硫酸低温继续炭化加硫酸低温继续炭化 700800灰化至恒重灰化至恒重 二、一般杂质的检查二、一般杂质的检查六六炽炽灼灼残残渣渣检检查查法法供试品重重残渣及坩锅重空坩锅炽灼残渣1

4、00 二、一般杂质的检查二、一般杂质的检查六六炽炽灼灼残残渣渣检检查查法法注意事项：注意事项： 坩埚：斜置、缓缓加热坩埚：斜置、缓缓加热 含氟药物：铂坩埚或硬质玻璃（玛瑙）含氟药物：铂坩埚或硬质玻璃（玛瑙） 温度：温度：700-800;500-600 恒重：恒重：0，为放热峰，为放热峰 T0，为吸热峰，为吸热峰E0，为放热峰，为放热峰E=0，无热效应，无热效应E 二、一般杂质的检查二、一般杂质的检查七七干干燥燥失失重重检检查查法法热分析在药学中的应用日益增多热分析在药学中的应用日益增多 干燥失重干燥失重 熔点测定熔点测定 纯度检查纯度检查 稳定性研究稳定性研究 辅料优选等辅料优选等 二、一般杂

5、质的检查二、一般杂质的检查八八酸酸碱碱度度检检查查法法 酸碱性杂质酸碱性杂质 用酸度、碱度用酸度、碱度 酸碱度酸碱度 pH值等表示值等表示 二、一般杂质的检查二、一般杂质的检查八八酸酸碱碱度度检检查查法法 检查时：检查时： 新沸过冷水溶解新沸过冷水溶解 中性乙醇溶解中性乙醇溶解 与水混摇与水混摇 使酸碱杂质溶于水使酸碱杂质溶于水 滤过滤过 取滤液检查取滤液检查 二、一般杂质的检查二、一般杂质的检查八八酸酸碱碱度度检检查查法法检查方法：检查方法： 酸碱滴定法酸碱滴定法 指示剂法指示剂法 pH值测定法值测定法 二、一般杂质的检查二、一般杂质的检查八八酸酸碱碱度度检检查查法法 1、酸碱滴定法、酸碱滴

6、定法 用酸或碱滴定用酸或碱滴定 供试品中碱性或酸性杂质供试品中碱性或酸性杂质 以消耗滴定液的以消耗滴定液的ml数数 作限度指标作限度指标 二、一般杂质的检查二、一般杂质的检查八八酸酸碱碱度度检检查查法法 例：例：NaCl的酸碱度的酸碱度 样品样品5.0g 水水50ml溶解溶解 溴麝香草酚蓝指示液溴麝香草酚蓝指示液2滴滴 (pH6.0-7.6,黄黄-蓝蓝) 二、一般杂质的检查二、一般杂质的检查八八酸酸碱碱度度检检查查法法若显黄色：若显黄色： 0.02mol/L NaOH滴定液滴定液0.1ml 应变蓝色应变蓝色若显蓝色或绿色：若显蓝色或绿色： 0.02mol/L HCl滴定液滴定液0.1ml 应变

7、黄色应变黄色 二、一般杂质的检查二、一般杂质的检查八八酸酸碱碱度度检检查查法法2、指示液法、指示液法 一定量指示液一定量指示液 根据颜色变化根据颜色变化 控制酸碱性杂质控制酸碱性杂质 二、一般杂质的检查二、一般杂质的检查八八酸酸碱碱度度检检查查法法例：蒸馏水的酸碱度例：蒸馏水的酸碱度 样品样品10ml （1）甲基红指示液）甲基红指示液2滴滴 不得显红色不得显红色 (pH4.2-6.3,红红-黄黄) （2）溴麝香草酚蓝指示液）溴麝香草酚蓝指示液5滴滴 不得显蓝色不得显蓝色 (pH6.0-7.6,黄黄-蓝蓝) 蒸馏水蒸馏水pH：4.2-7.6 二、一般杂质的检查二、一般杂质的检查八八酸酸碱碱度度检

8、检查查法法 3、pH值测定法值测定法 电位法测定供试液电位法测定供试液pH值值 衡量酸碱杂质限量衡量酸碱杂质限量 准确度高准确度高例：注射用水例：注射用水pH值应为值应为5.0-7.0 三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查特殊杂质检查法特殊杂质检查法 物理性质的差异物理性质的差异 化学性质的差异化学性质的差异 三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查 臭味和挥发性的差异臭味和挥发性的差异 颜色差异颜色差异 溶解行为差异溶解行为差异 旋光性差异旋光性差异 对光吸收差异对光吸收差异 色谱差异色谱差异（一）（一）物物理理性性质质差差异异 三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查 1、臭味和挥发性的差异、臭味

9、和挥发性的差异 （1） 杂质有特殊气味杂质有特殊气味 乙醇中的杂醇油（异臭）乙醇中的杂醇油（异臭） （2）杂质无挥发性）杂质无挥发性 过氧化氢中不挥发物的检查过氧化氢中不挥发物的检查（一）（一）物物理理性性质质差差异异 三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查 2、颜色差异、颜色差异 药物无色，杂质有色药物无色，杂质有色 例：盐酸胺碘酮中检查游离碘例：盐酸胺碘酮中检查游离碘（一）（一）物物理理性性质质差差异异 三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查 3、溶解行为差异、溶解行为差异 葡萄糖中糊精的检查葡萄糖中糊精的检查 葡萄糖乙醇中加热溶解葡萄糖乙醇中加热溶解 糊精不溶糊精不溶 规定应澄明规定应澄明（

10、一）（一）物物理理性性质质差差异异 三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查 4、旋光性差异、旋光性差异 （1）药物有而杂质无）药物有而杂质无 黄体酮在乙醇中黄体酮在乙醇中 比旋度为比旋度为+186+198（一）（一）物物理理性性质质差差异异 三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查 （2）杂质有而药物无）杂质有而药物无 硫酸阿托品硫酸阿托品(50mg/ml) 莨菪碱的检查莨菪碱的检查 旋光度旋光度 -0.4（一）（一）物物理理性性质质差差异异 三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查 5、对光的吸收差异、对光的吸收差异 Vis、UV、IR、原子吸收不同、原子吸收不同 进行检查进行检查 优点：灵敏度高优点

11、：灵敏度高 微量物质的检查微量物质的检查（一）（一）物物理理性性质质差差异异 三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查 UV法：法： 例例1、肾上腺素中肾上腺酮检查、肾上腺素中肾上腺酮检查（一）（一）物物理理性性质质差差异异H OH OCC H2N H C H3OH OH OC HC H2N H C H3O H肾上腺素肾上腺酮 三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查 肾上腺酮：肾上腺酮：310nm有吸收有吸收 肾上腺素：无吸收肾上腺素：无吸收 规定规定2mg/ml样品溶液样品溶液 310nm处测定吸收度处测定吸收度A 0.05（肾上腺酮（肾上腺酮 =453） （一）（一）物物理理性性质质差差异异%1

12、1cmE 三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查 肾上腺素中肾上腺酮杂质限量：肾上腺素中肾上腺酮杂质限量：（一）（一）物物理理性性质质差差异异0.055% 100%1001000214530.05 100%L供试品量杂质量 三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查 例例2、地蒽酚中二羟基蒽醌的检查、地蒽酚中二羟基蒽醌的检查 二羟基蒽醌：二羟基蒽醌：432nm有吸收有吸收 地蒽酚：没有吸收地蒽酚：没有吸收（一）（一）物物理理性性质质差差异异 三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查 规定：规定：A 0.05（一）（一）物物理理性性质质差差异异432nm3A0.01%CHCl测样品 三、特殊杂质的检查三、特

13、殊杂质的检查IR： 无效或低效晶型的检查无效或低效晶型的检查 例：甲苯咪唑例：甲苯咪唑 无效晶型无效晶型A的检查的检查（一）（一）物物理理性性质质差差异异 三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查AAS： 金属杂质的检查金属杂质的检查 采用标准加入法采用标准加入法 控制金属杂质的限量控制金属杂质的限量 例：维生素例：维生素C 铁盐和铜盐的检查铁盐和铜盐的检查（一）（一）物物理理性性质质差差异异 三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查6、色谱差异、色谱差异 （1）TLC 灵敏、简便、快速灵敏、简便、快速 不需要特殊设备、费用低不需要特殊设备、费用低 分离和鉴定双重作用分离和鉴定双重作用（一）（一）物物

14、理理性性质质差差异异 三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查 一定供试品及检查条件下不允许一定供试品及检查条件下不允许有杂质斑点存在（反应灵敏度）有杂质斑点存在（反应灵敏度） 试验条件下试验条件下 显色剂对杂质的最小检出量显色剂对杂质的最小检出量 控制杂质限量控制杂质限量（一）（一）物物理理性性质质差差异异 三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查 杂质对照品法杂质对照品法（一）（一）物物理理性性质质差差异异药物药物杂质杂质点样点样 三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查 优点：反应颜色和灵敏度一致优点：反应颜色和灵敏度一致 色谱条件变化影响小色谱条件变化影响小 缺点：需有待检杂质对照品缺点：需有待检

15、杂质对照品（一）（一）物物理理性性质质差差异异 三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查 例：枸橼酸乙胺嗪中检查例：枸橼酸乙胺嗪中检查N-甲基哌嗪甲基哌嗪 供试液：供试液：50mg/ml 对照液：对照液：N-甲基哌嗪甲基哌嗪50g/ml 点板、展开剂、斑点定位点板、展开剂、斑点定位（一）（一）物物理理性性质质差差异异 三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查（一）（一）物物理理性性质质差差异异%1 . 0%100/50/50mlmgmlgL 三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查（一）（一）物物理理性性质质差差异异可能存在某种物质作对照可能存在某种物质作对照 杂质没有确认杂质没有确认 或杂质不止一种或杂

16、质不止一种 推断可能存在的杂质推断可能存在的杂质 并获得其对照品并获得其对照品 三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查（一）（一）物物理理性性质质差差异异供试液自身稀释对照法供试液自身稀释对照法药物药物杂质杂质点样点样 三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查（一）（一）物物理理性性质质差差异异优点：不需对照品优点：不需对照品 可配不同限量的对照液可配不同限量的对照液 简便易行简便易行注意：注意： 显色灵敏度应相同或相近显色灵敏度应相同或相近 斑点颜色相同斑点颜色相同 三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查（一）（一）物物理理性性质质差差异异例：吡罗西康中有关物质的检查例：吡罗西康中有关物质的检查 供

17、试液：供试液：20mg/ml 对照液：对照液：0.2mg/ml 点板、展开剂、检视点板、展开剂、检视 判断判断: 供试液如显杂质斑点供试液如显杂质斑点 其颜色其颜色 对照液主斑点颜色对照液主斑点颜色 三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查（一）（一）物物理理性性质质差差异异对照药物法对照药物法 供试品的对照品供试品的对照品 要求：对照品要求：对照品 待检杂质符合规定待检杂质符合规定 稳定性好稳定性好 三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查（一）（一）物物理理性性质质差差异异例、马来酸麦角新碱中有关物质检查例、马来酸麦角新碱中有关物质检查配样：配样： 样品液样品液(1)：5mg/ml 样品液样品液(

18、2)：0.2mg/ml 马来酸新碱对照品液马来酸新碱对照品液(3)：5mg/ml点板、展开、定位点板、展开、定位判断：主斑点判断：主斑点(1)和和(3)一致一致 杂斑点杂斑点(1)不能超出不能超出(3) (2)只有主斑点只有主斑点 三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查（一）（一）物物理理性性质质差差异异杂质对照法、供试液自身稀释法并用杂质对照法、供试液自身稀释法并用 存在多个杂质存在多个杂质 有杂质对照品：杂质对照品有杂质对照品：杂质对照品 无杂质对照品：自身稀释对照无杂质对照品：自身稀释对照 三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查（一）（一）物物理理性性质质差差异异TLC系统适用性试验系统适用

19、性试验 检测灵敏度检测灵敏度 比移值比移值 分离效能分离效能 三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查（一）（一）物物理理性性质质差差异异（2）HPLC 内标法加校正因子法内标法加校正因子法 外标法外标法 加校正因子的主成分自身对照法加校正因子的主成分自身对照法 不加校正因子的主成分自身对照不加校正因子的主成分自身对照法法 峰面积归一化法峰面积归一化法 三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查（一）（一）物物理理性性质质差差异异（3）GC 挥发性杂质的检查挥发性杂质的检查 如残留溶剂如残留溶剂 农药残留农药残留 三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查（一）（一）物物理理性性质质差差异异检查方法：检查方法

20、： 内标法加校正因子法内标法加校正因子法 外标法外标法 峰面积归一化法峰面积归一化法 标准溶液加入法标准溶液加入法 三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查（二）（二）化化学学性性质质差差异异1、酸碱性的差异、酸碱性的差异2、氧化还原性的差异、氧化还原性的差异3、与一定试剂反应差异、与一定试剂反应差异 沉淀沉淀 颜色颜色 气体气体 三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查（二）（二）化化学学性性质质差差异异1、酸碱性的差异、酸碱性的差异 杂质具有酸性、碱性杂质具有酸性、碱性 可采用：可采用： 规定消耗滴定液体积规定消耗滴定液体积 pH值法值法 指示剂法指示剂法 三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查（二

21、）（二）化化学学性性质质差差异异2、氧化还原性的差异、氧化还原性的差异 氯化物中检查氯化物中检查 碘化物、溴化物碘化物、溴化物 三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查（二）（二）化化学学性性质质差差异异3、与试剂反应的差异、与试剂反应的差异 例例1、氯硝柳胺中、氯硝柳胺中5-氯水杨酸的检查氯水杨酸的检查 检查原理：检查原理： 氯硝柳胺氯硝柳胺+ Fe3+（无酚羟基）（无酚羟基） 5-氯水杨酸氯水杨酸+ Fe3+紫堇色紫堇色 三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查（二）（二）化化学学性性质质差差异异例例2、乳酸钠溶液中还原糖的检查、乳酸钠溶液中还原糖的检查 原理原理: 还原糖与碱性酒石酸铜反应还原糖与碱性酒石酸铜反应 产生红色沉淀产生红色沉淀 三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查（二）（二）化化学学性性质质差差异异例例3、对氨基水杨酸钠中间氨基酚的检查、对氨基水杨酸钠中间氨基酚的检查 杂质来源杂质来源 生产中引入：生产中引入：NH2OHOHCOONaNH2NaHCO3CO21204atm, 三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查（二）（二）化化学学性性质质差差异异贮存中样品脱羧贮存中样品脱羧O HCO O N aN H2C O2NH2OH 三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查（二）（二）化化学学性性质质差差异异 检查原理与方法检查原理与方法 对氨基水杨酸钠对氨基