实验实训指导-原种、栽培种培育

1、实训五 原种、栽培种的培育一、实训目的能制作适宜培养料，独立完成接种前的准备工作，用无菌操作法准确进行原种、栽培种的接种。并通过培养观察，分析自己的接种结果。二、实训材料与用具1. 材料 棉籽壳、麸皮、蔗糖、石灰粉、过磷酸钙、母种、原种等。2器具 菌种瓶、棉塞、打孔棒、菌种袋、接种耙、大镊子、酒精灯、火柴、酒精棉球、标签、高压灭菌锅、接种箱、消毒药品等。三、实训内容1、培养料的配制2、菌种瓶及菌种袋的分装3、原种的接种4、栽培种的接种 四、方法步骤两菌种的生产过程基本相同，主要区别在于接种时取接的菌种不一样。1. 培养基的配制（1）配方与配制 颗粒培养基（麦粒、玉米粒等） 配方：粮食粒98.5

2、%，石膏粉1%，碳酸钙0.5%。 配制：将洗净的粮食粒洗净，用1%石灰水泡胀，文火煮沸1520min(熟而不烂，勿破皮)，捞出晾至无明水后拌入余料。原种多使用颗粒培养基。棉籽壳麦麸培养基 配方：棉籽壳87%，麦麸10%，白糖1%，石灰1%，过磷酸钙1%。配制：将棉籽壳、麦麸、石灰混合为主料，余料溶解于少量水后浇入主料中。边加清水边翻拌至含水量达60%65%（紧握料的指缝中有水泌出而不下滴）。 （2）分装 原种培养基装入菌种瓶（或其他大口瓶），装量约占瓶高的1/2（非颗粒培养基可装至瓶肩，用锥形棒打一料孔），瓶口擦净，堵棉塞后外包牛皮纸或双层报纸。栽培种培养基一般装入聚丙烯菌种袋，上端套颈圈后如

3、同瓶口包扎法。两端开口的菌种袋可将两端扎活结。要求装地外紧内松，培养料需紧贴瓶壁或袋壁。松散的培养料会导致菌丝断裂及影响对养分、水分的吸收。2. 培养基的灭菌原种栽培种培养基的容器大、装量多，应增加灭菌压力及灭菌时间。高压蒸汽灭菌，一般在152kpa压力（1.5kg/cm2）、温度约128.1条件下，保持灭菌时间12h。若采用常压灭菌，需保持最高温度10h左右，再闷1天或1晚。3. 接种灭菌后的原种及栽培种培养基及时运送至无菌环境中，待料温降至约30，进行抢温接种。（1）接原种 用接种耙取蚕豆大母种（连同培养基），放于瓶中培养料的孔口处（1支母种约接58瓶原种）。斜面尖端及原来的母种块勿接入。

4、（2）接栽培种 用大镊子、接种铲或接种匙取枣大原种，放于瓶或袋中料面上（若两端扎活结的菌种袋，每端都要接入原种）。1瓶原种约接60瓶或25袋栽培种。去弃表面老化菌丝及老种块。堵棉塞或用线绳扎袋口。贴标签，注明菌种名称和接种日期。4.培养 接种后，将种瓶（袋）置于适温下培养。菌种瓶初放时，应直立于床架上，当菌丝吃料后，再将其横放。菌种袋根据气温可单层或多层叠放。隔45天转动或调换位置，以利于受温一致，并避免培养料水分的沉积。常检查：及时去除出现杂色、粘液及菌种死亡的瓶或袋。逐渐降温：当菌丝长至料深的1/2时，降温23，以免料温升高，并有壮丝作用。注意菌龄： 原种约3040天、栽培种约2030天菌丝长满，再继续培养710天是使用的最好菌龄。五、作业1.记录实验结果，并对出现的异常现象进行原因分析？2.比较原种与栽培种生产过程的异同点3.颗粒为何要进行泡和煮？4.菌种的表面有一块残留的琼脂块，证明该菌种是哪级菌