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文档简介
1、口腔颌面外科学专业毕业论文 精品论文 CXCL12/CXCR4在涎腺腺样囊性癌嗜神经侵袭中的作用关键词:腺样囊性癌 嗜神经侵袭 雪旺细胞 免疫印迹 酶联免疫吸附实验摘要:目的:检测趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在人雪旺细胞(HSC)和涎腺腺样囊性癌细胞(ACC-3)的表达情况,观察HSC培养上清液对ACC-3细胞的趋化作用及CXCR4受体激活拮抗剂的趋化抑制效应。探讨趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在涎腺腺样囊性癌嗜神经侵袭中的作用。 方法:本实验共分两部分: 第一部分:应用实时定量PCR法检测HSC和ACC-3细胞中趋化因子CXCL12及其受体CXCR4的表达;应用免疫荧光试验
2、检测HSC趋化因子CXCL12的表达和ACC-3细胞趋化因子受体CXCR4的表达;应用流式细胞术检测HSC和ACC-3细胞膜的趋化因子受体CXCR4的表达;应用免疫印迹法检测在HSC和ACC-3细胞培养上清液中趋化因子CXCL12蛋白的表达;应用酶联免疫吸附试验检测免疫抑制剂作用后HSC培养上清液中趋化因子CXCL12的表达。 第二部分:应用趋化实验观察HSC培养上清液对ACC-3细胞的趋化作用及CXCR4受体激活拮抗剂的趋化抑制效应。 实验数据采用SPSS10.0统计软件,t检验进行分析 结果: 第一部分:HSC中趋化因子CXCL12基因有较高的表达,而ACC-3细胞中表达量极少;HSC和A
3、CC-3细胞中趋化因子受体CXCR4基因均有表达,而ACC-3细胞表达量明显较多(p0.05);HSC有趋化因子CXCL12蛋白明显阳性表达,ACC-3细胞有趋化因子受体CXCR4蛋白明显阳性表达;HSC细胞膜上的趋化因子受体CXCR4阳性表达率为67.10,ACC-3细胞膜上趋化因子受体CXCR4的阳性表达率为74.15;HSC培养上清液中可检测到趋化因子CXCL12,而在ACC-3细胞培养上清液中未检测到;免疫抑制剂作用后HSC培养上清液中趋化因子CXCL12的表达量明显减少(p0.05): 第二部分:HSC培养上清液能够对ACC-3细胞产生趋化作用,应用CXCR4受体激活拮抗剂AMD31
4、00能明显的抑制这种趋化效应。 结论: 第一部分:人雪旺细胞表达趋化因子CXCL12并能分泌到细胞外,并且人雪旺细胞细胞膜上有趋化因子受体CXCR4表达;涎腺腺样囊性癌ACC-3细胞表达趋化因子受体CXCR4,而趋化因子CXCL12的表达量极少;免疫抑制剂甲氨喋呤作用后可明显抑制人雪旺细胞趋化因子CXCL12的分泌。 第二部分:人雪旺细胞培养上清液对涎腺腺样囊性癌ACC-3细胞的趋化迁移作用可能是通过人雪旺细胞分泌的趋化因子CXCL12和涎腺腺样囊性癌ACC-3细胞所表达的趋化因子受体CXCR4介导的,CXCR4受体激活拮抗剂AMD3100可以抑制这种作用。正文内容 目的:检测趋化因子CXCL
5、12及其受体CXCR4在人雪旺细胞(HSC)和涎腺腺样囊性癌细胞(ACC-3)的表达情况,观察HSC培养上清液对ACC-3细胞的趋化作用及CXCR4受体激活拮抗剂的趋化抑制效应。探讨趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在涎腺腺样囊性癌嗜神经侵袭中的作用。 方法:本实验共分两部分: 第一部分:应用实时定量PCR法检测HSC和ACC-3细胞中趋化因子CXCL12及其受体CXCR4的表达;应用免疫荧光试验检测HSC趋化因子CXCL12的表达和ACC-3细胞趋化因子受体CXCR4的表达;应用流式细胞术检测HSC和ACC-3细胞膜的趋化因子受体CXCR4的表达;应用免疫印迹法检测在HSC和ACC-3细
6、胞培养上清液中趋化因子CXCL12蛋白的表达;应用酶联免疫吸附试验检测免疫抑制剂作用后HSC培养上清液中趋化因子CXCL12的表达。 第二部分:应用趋化实验观察HSC培养上清液对ACC-3细胞的趋化作用及CXCR4受体激活拮抗剂的趋化抑制效应。 实验数据采用SPSS10.0统计软件,t检验进行分析 结果: 第一部分:HSC中趋化因子CXCL12基因有较高的表达,而ACC-3细胞中表达量极少;HSC和ACC-3细胞中趋化因子受体CXCR4基因均有表达,而ACC-3细胞表达量明显较多(p0.05);HSC有趋化因子CXCL12蛋白明显阳性表达,ACC-3细胞有趋化因子受体CXCR4蛋白明显阳性表达
7、;HSC细胞膜上的趋化因子受体CXCR4阳性表达率为67.10,ACC-3细胞膜上趋化因子受体CXCR4的阳性表达率为74.15;HSC培养上清液中可检测到趋化因子CXCL12,而在ACC-3细胞培养上清液中未检测到;免疫抑制剂作用后HSC培养上清液中趋化因子CXCL12的表达量明显减少(p0.05): 第二部分:HSC培养上清液能够对ACC-3细胞产生趋化作用,应用CXCR4受体激活拮抗剂AMD3100能明显的抑制这种趋化效应。 结论: 第一部分:人雪旺细胞表达趋化因子CXCL12并能分泌到细胞外,并且人雪旺细胞细胞膜上有趋化因子受体CXCR4表达;涎腺腺样囊性癌ACC-3细胞表达趋化因子受
8、体CXCR4,而趋化因子CXCL12的表达量极少;免疫抑制剂甲氨喋呤作用后可明显抑制人雪旺细胞趋化因子CXCL12的分泌。 第二部分:人雪旺细胞培养上清液对涎腺腺样囊性癌ACC-3细胞的趋化迁移作用可能是通过人雪旺细胞分泌的趋化因子CXCL12和涎腺腺样囊性癌ACC-3细胞所表达的趋化因子受体CXCR4介导的,CXCR4受体激活拮抗剂AMD3100可以抑制这种作用。目的:检测趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在人雪旺细胞(HSC)和涎腺腺样囊性癌细胞(ACC-3)的表达情况,观察HSC培养上清液对ACC-3细胞的趋化作用及CXCR4受体激活拮抗剂的趋化抑制效应。探讨趋化因子CXCL12及其
9、受体CXCR4在涎腺腺样囊性癌嗜神经侵袭中的作用。 方法:本实验共分两部分: 第一部分:应用实时定量PCR法检测HSC和ACC-3细胞中趋化因子CXCL12及其受体CXCR4的表达;应用免疫荧光试验检测HSC趋化因子CXCL12的表达和ACC-3细胞趋化因子受体CXCR4的表达;应用流式细胞术检测HSC和ACC-3细胞膜的趋化因子受体CXCR4的表达;应用免疫印迹法检测在HSC和ACC-3细胞培养上清液中趋化因子CXCL12蛋白的表达;应用酶联免疫吸附试验检测免疫抑制剂作用后HSC培养上清液中趋化因子CXCL12的表达。 第二部分:应用趋化实验观察HSC培养上清液对ACC-3细胞的趋化作用及C
10、XCR4受体激活拮抗剂的趋化抑制效应。 实验数据采用SPSS10.0统计软件,t检验进行分析 结果: 第一部分:HSC中趋化因子CXCL12基因有较高的表达,而ACC-3细胞中表达量极少;HSC和ACC-3细胞中趋化因子受体CXCR4基因均有表达,而ACC-3细胞表达量明显较多(p0.05);HSC有趋化因子CXCL12蛋白明显阳性表达,ACC-3细胞有趋化因子受体CXCR4蛋白明显阳性表达;HSC细胞膜上的趋化因子受体CXCR4阳性表达率为67.10,ACC-3细胞膜上趋化因子受体CXCR4的阳性表达率为74.15;HSC培养上清液中可检测到趋化因子CXCL12,而在ACC-3细胞培养上清液
11、中未检测到;免疫抑制剂作用后HSC培养上清液中趋化因子CXCL12的表达量明显减少(p0.05): 第二部分:HSC培养上清液能够对ACC-3细胞产生趋化作用,应用CXCR4受体激活拮抗剂AMD3100能明显的抑制这种趋化效应。 结论: 第一部分:人雪旺细胞表达趋化因子CXCL12并能分泌到细胞外,并且人雪旺细胞细胞膜上有趋化因子受体CXCR4表达;涎腺腺样囊性癌ACC-3细胞表达趋化因子受体CXCR4,而趋化因子CXCL12的表达量极少;免疫抑制剂甲氨喋呤作用后可明显抑制人雪旺细胞趋化因子CXCL12的分泌。 第二部分:人雪旺细胞培养上清液对涎腺腺样囊性癌ACC-3细胞的趋化迁移作用可能是通
12、过人雪旺细胞分泌的趋化因子CXCL12和涎腺腺样囊性癌ACC-3细胞所表达的趋化因子受体CXCR4介导的,CXCR4受体激活拮抗剂AMD3100可以抑制这种作用。目的:检测趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在人雪旺细胞(HSC)和涎腺腺样囊性癌细胞(ACC-3)的表达情况,观察HSC培养上清液对ACC-3细胞的趋化作用及CXCR4受体激活拮抗剂的趋化抑制效应。探讨趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在涎腺腺样囊性癌嗜神经侵袭中的作用。 方法:本实验共分两部分: 第一部分:应用实时定量PCR法检测HSC和ACC-3细胞中趋化因子CXCL12及其受体CXCR4的表达;应用免疫荧光试验检测HS
13、C趋化因子CXCL12的表达和ACC-3细胞趋化因子受体CXCR4的表达;应用流式细胞术检测HSC和ACC-3细胞膜的趋化因子受体CXCR4的表达;应用免疫印迹法检测在HSC和ACC-3细胞培养上清液中趋化因子CXCL12蛋白的表达;应用酶联免疫吸附试验检测免疫抑制剂作用后HSC培养上清液中趋化因子CXCL12的表达。 第二部分:应用趋化实验观察HSC培养上清液对ACC-3细胞的趋化作用及CXCR4受体激活拮抗剂的趋化抑制效应。 实验数据采用SPSS10.0统计软件,t检验进行分析 结果: 第一部分:HSC中趋化因子CXCL12基因有较高的表达,而ACC-3细胞中表达量极少;HSC和ACC-3
14、细胞中趋化因子受体CXCR4基因均有表达,而ACC-3细胞表达量明显较多(p0.05);HSC有趋化因子CXCL12蛋白明显阳性表达,ACC-3细胞有趋化因子受体CXCR4蛋白明显阳性表达;HSC细胞膜上的趋化因子受体CXCR4阳性表达率为67.10,ACC-3细胞膜上趋化因子受体CXCR4的阳性表达率为74.15;HSC培养上清液中可检测到趋化因子CXCL12,而在ACC-3细胞培养上清液中未检测到;免疫抑制剂作用后HSC培养上清液中趋化因子CXCL12的表达量明显减少(p0.05): 第二部分:HSC培养上清液能够对ACC-3细胞产生趋化作用,应用CXCR4受体激活拮抗剂AMD3100能明
15、显的抑制这种趋化效应。 结论: 第一部分:人雪旺细胞表达趋化因子CXCL12并能分泌到细胞外,并且人雪旺细胞细胞膜上有趋化因子受体CXCR4表达;涎腺腺样囊性癌ACC-3细胞表达趋化因子受体CXCR4,而趋化因子CXCL12的表达量极少;免疫抑制剂甲氨喋呤作用后可明显抑制人雪旺细胞趋化因子CXCL12的分泌。 第二部分:人雪旺细胞培养上清液对涎腺腺样囊性癌ACC-3细胞的趋化迁移作用可能是通过人雪旺细胞分泌的趋化因子CXCL12和涎腺腺样囊性癌ACC-3细胞所表达的趋化因子受体CXCR4介导的,CXCR4受体激活拮抗剂AMD3100可以抑制这种作用。目的:检测趋化因子CXCL12及其受体CXC
16、R4在人雪旺细胞(HSC)和涎腺腺样囊性癌细胞(ACC-3)的表达情况,观察HSC培养上清液对ACC-3细胞的趋化作用及CXCR4受体激活拮抗剂的趋化抑制效应。探讨趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在涎腺腺样囊性癌嗜神经侵袭中的作用。 方法:本实验共分两部分: 第一部分:应用实时定量PCR法检测HSC和ACC-3细胞中趋化因子CXCL12及其受体CXCR4的表达;应用免疫荧光试验检测HSC趋化因子CXCL12的表达和ACC-3细胞趋化因子受体CXCR4的表达;应用流式细胞术检测HSC和ACC-3细胞膜的趋化因子受体CXCR4的表达;应用免疫印迹法检测在HSC和ACC-3细胞培养上清液中趋化
17、因子CXCL12蛋白的表达;应用酶联免疫吸附试验检测免疫抑制剂作用后HSC培养上清液中趋化因子CXCL12的表达。 第二部分:应用趋化实验观察HSC培养上清液对ACC-3细胞的趋化作用及CXCR4受体激活拮抗剂的趋化抑制效应。 实验数据采用SPSS10.0统计软件,t检验进行分析 结果: 第一部分:HSC中趋化因子CXCL12基因有较高的表达,而ACC-3细胞中表达量极少;HSC和ACC-3细胞中趋化因子受体CXCR4基因均有表达,而ACC-3细胞表达量明显较多(p0.05);HSC有趋化因子CXCL12蛋白明显阳性表达,ACC-3细胞有趋化因子受体CXCR4蛋白明显阳性表达;HSC细胞膜上的
18、趋化因子受体CXCR4阳性表达率为67.10,ACC-3细胞膜上趋化因子受体CXCR4的阳性表达率为74.15;HSC培养上清液中可检测到趋化因子CXCL12,而在ACC-3细胞培养上清液中未检测到;免疫抑制剂作用后HSC培养上清液中趋化因子CXCL12的表达量明显减少(p0.05): 第二部分:HSC培养上清液能够对ACC-3细胞产生趋化作用,应用CXCR4受体激活拮抗剂AMD3100能明显的抑制这种趋化效应。 结论: 第一部分:人雪旺细胞表达趋化因子CXCL12并能分泌到细胞外,并且人雪旺细胞细胞膜上有趋化因子受体CXCR4表达;涎腺腺样囊性癌ACC-3细胞表达趋化因子受体CXCR4,而趋
19、化因子CXCL12的表达量极少;免疫抑制剂甲氨喋呤作用后可明显抑制人雪旺细胞趋化因子CXCL12的分泌。 第二部分:人雪旺细胞培养上清液对涎腺腺样囊性癌ACC-3细胞的趋化迁移作用可能是通过人雪旺细胞分泌的趋化因子CXCL12和涎腺腺样囊性癌ACC-3细胞所表达的趋化因子受体CXCR4介导的,CXCR4受体激活拮抗剂AMD3100可以抑制这种作用。目的:检测趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在人雪旺细胞(HSC)和涎腺腺样囊性癌细胞(ACC-3)的表达情况,观察HSC培养上清液对ACC-3细胞的趋化作用及CXCR4受体激活拮抗剂的趋化抑制效应。探讨趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在涎
20、腺腺样囊性癌嗜神经侵袭中的作用。 方法:本实验共分两部分: 第一部分:应用实时定量PCR法检测HSC和ACC-3细胞中趋化因子CXCL12及其受体CXCR4的表达;应用免疫荧光试验检测HSC趋化因子CXCL12的表达和ACC-3细胞趋化因子受体CXCR4的表达;应用流式细胞术检测HSC和ACC-3细胞膜的趋化因子受体CXCR4的表达;应用免疫印迹法检测在HSC和ACC-3细胞培养上清液中趋化因子CXCL12蛋白的表达;应用酶联免疫吸附试验检测免疫抑制剂作用后HSC培养上清液中趋化因子CXCL12的表达。 第二部分:应用趋化实验观察HSC培养上清液对ACC-3细胞的趋化作用及CXCR4受体激活拮
21、抗剂的趋化抑制效应。 实验数据采用SPSS10.0统计软件,t检验进行分析 结果: 第一部分:HSC中趋化因子CXCL12基因有较高的表达,而ACC-3细胞中表达量极少;HSC和ACC-3细胞中趋化因子受体CXCR4基因均有表达,而ACC-3细胞表达量明显较多(p0.05);HSC有趋化因子CXCL12蛋白明显阳性表达,ACC-3细胞有趋化因子受体CXCR4蛋白明显阳性表达;HSC细胞膜上的趋化因子受体CXCR4阳性表达率为67.10,ACC-3细胞膜上趋化因子受体CXCR4的阳性表达率为74.15;HSC培养上清液中可检测到趋化因子CXCL12,而在ACC-3细胞培养上清液中未检测到;免疫抑
22、制剂作用后HSC培养上清液中趋化因子CXCL12的表达量明显减少(p0.05): 第二部分:HSC培养上清液能够对ACC-3细胞产生趋化作用,应用CXCR4受体激活拮抗剂AMD3100能明显的抑制这种趋化效应。 结论: 第一部分:人雪旺细胞表达趋化因子CXCL12并能分泌到细胞外,并且人雪旺细胞细胞膜上有趋化因子受体CXCR4表达;涎腺腺样囊性癌ACC-3细胞表达趋化因子受体CXCR4,而趋化因子CXCL12的表达量极少;免疫抑制剂甲氨喋呤作用后可明显抑制人雪旺细胞趋化因子CXCL12的分泌。 第二部分:人雪旺细胞培养上清液对涎腺腺样囊性癌ACC-3细胞的趋化迁移作用可能是通过人雪旺细胞分泌的
23、趋化因子CXCL12和涎腺腺样囊性癌ACC-3细胞所表达的趋化因子受体CXCR4介导的,CXCR4受体激活拮抗剂AMD3100可以抑制这种作用。目的:检测趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在人雪旺细胞(HSC)和涎腺腺样囊性癌细胞(ACC-3)的表达情况,观察HSC培养上清液对ACC-3细胞的趋化作用及CXCR4受体激活拮抗剂的趋化抑制效应。探讨趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在涎腺腺样囊性癌嗜神经侵袭中的作用。 方法:本实验共分两部分: 第一部分:应用实时定量PCR法检测HSC和ACC-3细胞中趋化因子CXCL12及其受体CXCR4的表达;应用免疫荧光试验检测HSC趋化因子CXCL
24、12的表达和ACC-3细胞趋化因子受体CXCR4的表达;应用流式细胞术检测HSC和ACC-3细胞膜的趋化因子受体CXCR4的表达;应用免疫印迹法检测在HSC和ACC-3细胞培养上清液中趋化因子CXCL12蛋白的表达;应用酶联免疫吸附试验检测免疫抑制剂作用后HSC培养上清液中趋化因子CXCL12的表达。 第二部分:应用趋化实验观察HSC培养上清液对ACC-3细胞的趋化作用及CXCR4受体激活拮抗剂的趋化抑制效应。 实验数据采用SPSS10.0统计软件,t检验进行分析 结果: 第一部分:HSC中趋化因子CXCL12基因有较高的表达,而ACC-3细胞中表达量极少;HSC和ACC-3细胞中趋化因子受体
25、CXCR4基因均有表达,而ACC-3细胞表达量明显较多(p0.05);HSC有趋化因子CXCL12蛋白明显阳性表达,ACC-3细胞有趋化因子受体CXCR4蛋白明显阳性表达;HSC细胞膜上的趋化因子受体CXCR4阳性表达率为67.10,ACC-3细胞膜上趋化因子受体CXCR4的阳性表达率为74.15;HSC培养上清液中可检测到趋化因子CXCL12,而在ACC-3细胞培养上清液中未检测到;免疫抑制剂作用后HSC培养上清液中趋化因子CXCL12的表达量明显减少(p0.05): 第二部分:HSC培养上清液能够对ACC-3细胞产生趋化作用,应用CXCR4受体激活拮抗剂AMD3100能明显的抑制这种趋化效
26、应。 结论: 第一部分:人雪旺细胞表达趋化因子CXCL12并能分泌到细胞外,并且人雪旺细胞细胞膜上有趋化因子受体CXCR4表达;涎腺腺样囊性癌ACC-3细胞表达趋化因子受体CXCR4,而趋化因子CXCL12的表达量极少;免疫抑制剂甲氨喋呤作用后可明显抑制人雪旺细胞趋化因子CXCL12的分泌。 第二部分:人雪旺细胞培养上清液对涎腺腺样囊性癌ACC-3细胞的趋化迁移作用可能是通过人雪旺细胞分泌的趋化因子CXCL12和涎腺腺样囊性癌ACC-3细胞所表达的趋化因子受体CXCR4介导的,CXCR4受体激活拮抗剂AMD3100可以抑制这种作用。目的:检测趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在人雪旺细胞(
27、HSC)和涎腺腺样囊性癌细胞(ACC-3)的表达情况,观察HSC培养上清液对ACC-3细胞的趋化作用及CXCR4受体激活拮抗剂的趋化抑制效应。探讨趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在涎腺腺样囊性癌嗜神经侵袭中的作用。 方法:本实验共分两部分: 第一部分:应用实时定量PCR法检测HSC和ACC-3细胞中趋化因子CXCL12及其受体CXCR4的表达;应用免疫荧光试验检测HSC趋化因子CXCL12的表达和ACC-3细胞趋化因子受体CXCR4的表达;应用流式细胞术检测HSC和ACC-3细胞膜的趋化因子受体CXCR4的表达;应用免疫印迹法检测在HSC和ACC-3细胞培养上清液中趋化因子CXCL12蛋
28、白的表达;应用酶联免疫吸附试验检测免疫抑制剂作用后HSC培养上清液中趋化因子CXCL12的表达。 第二部分:应用趋化实验观察HSC培养上清液对ACC-3细胞的趋化作用及CXCR4受体激活拮抗剂的趋化抑制效应。 实验数据采用SPSS10.0统计软件,t检验进行分析 结果: 第一部分:HSC中趋化因子CXCL12基因有较高的表达,而ACC-3细胞中表达量极少;HSC和ACC-3细胞中趋化因子受体CXCR4基因均有表达,而ACC-3细胞表达量明显较多(p0.05);HSC有趋化因子CXCL12蛋白明显阳性表达,ACC-3细胞有趋化因子受体CXCR4蛋白明显阳性表达;HSC细胞膜上的趋化因子受体CXC
29、R4阳性表达率为67.10,ACC-3细胞膜上趋化因子受体CXCR4的阳性表达率为74.15;HSC培养上清液中可检测到趋化因子CXCL12,而在ACC-3细胞培养上清液中未检测到;免疫抑制剂作用后HSC培养上清液中趋化因子CXCL12的表达量明显减少(p0.05): 第二部分:HSC培养上清液能够对ACC-3细胞产生趋化作用,应用CXCR4受体激活拮抗剂AMD3100能明显的抑制这种趋化效应。 结论: 第一部分:人雪旺细胞表达趋化因子CXCL12并能分泌到细胞外,并且人雪旺细胞细胞膜上有趋化因子受体CXCR4表达;涎腺腺样囊性癌ACC-3细胞表达趋化因子受体CXCR4,而趋化因子CXCL12
30、的表达量极少;免疫抑制剂甲氨喋呤作用后可明显抑制人雪旺细胞趋化因子CXCL12的分泌。 第二部分:人雪旺细胞培养上清液对涎腺腺样囊性癌ACC-3细胞的趋化迁移作用可能是通过人雪旺细胞分泌的趋化因子CXCL12和涎腺腺样囊性癌ACC-3细胞所表达的趋化因子受体CXCR4介导的,CXCR4受体激活拮抗剂AMD3100可以抑制这种作用。目的:检测趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在人雪旺细胞(HSC)和涎腺腺样囊性癌细胞(ACC-3)的表达情况,观察HSC培养上清液对ACC-3细胞的趋化作用及CXCR4受体激活拮抗剂的趋化抑制效应。探讨趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在涎腺腺样囊性癌嗜神经
31、侵袭中的作用。 方法:本实验共分两部分: 第一部分:应用实时定量PCR法检测HSC和ACC-3细胞中趋化因子CXCL12及其受体CXCR4的表达;应用免疫荧光试验检测HSC趋化因子CXCL12的表达和ACC-3细胞趋化因子受体CXCR4的表达;应用流式细胞术检测HSC和ACC-3细胞膜的趋化因子受体CXCR4的表达;应用免疫印迹法检测在HSC和ACC-3细胞培养上清液中趋化因子CXCL12蛋白的表达;应用酶联免疫吸附试验检测免疫抑制剂作用后HSC培养上清液中趋化因子CXCL12的表达。 第二部分:应用趋化实验观察HSC培养上清液对ACC-3细胞的趋化作用及CXCR4受体激活拮抗剂的趋化抑制效应
32、。 实验数据采用SPSS10.0统计软件,t检验进行分析 结果: 第一部分:HSC中趋化因子CXCL12基因有较高的表达,而ACC-3细胞中表达量极少;HSC和ACC-3细胞中趋化因子受体CXCR4基因均有表达,而ACC-3细胞表达量明显较多(p0.05);HSC有趋化因子CXCL12蛋白明显阳性表达,ACC-3细胞有趋化因子受体CXCR4蛋白明显阳性表达;HSC细胞膜上的趋化因子受体CXCR4阳性表达率为67.10,ACC-3细胞膜上趋化因子受体CXCR4的阳性表达率为74.15;HSC培养上清液中可检测到趋化因子CXCL12,而在ACC-3细胞培养上清液中未检测到;免疫抑制剂作用后HSC培
33、养上清液中趋化因子CXCL12的表达量明显减少(p0.05): 第二部分:HSC培养上清液能够对ACC-3细胞产生趋化作用,应用CXCR4受体激活拮抗剂AMD3100能明显的抑制这种趋化效应。 结论: 第一部分:人雪旺细胞表达趋化因子CXCL12并能分泌到细胞外,并且人雪旺细胞细胞膜上有趋化因子受体CXCR4表达;涎腺腺样囊性癌ACC-3细胞表达趋化因子受体CXCR4,而趋化因子CXCL12的表达量极少;免疫抑制剂甲氨喋呤作用后可明显抑制人雪旺细胞趋化因子CXCL12的分泌。 第二部分:人雪旺细胞培养上清液对涎腺腺样囊性癌ACC-3细胞的趋化迁移作用可能是通过人雪旺细胞分泌的趋化因子CXCL1
34、2和涎腺腺样囊性癌ACC-3细胞所表达的趋化因子受体CXCR4介导的,CXCR4受体激活拮抗剂AMD3100可以抑制这种作用。目的:检测趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在人雪旺细胞(HSC)和涎腺腺样囊性癌细胞(ACC-3)的表达情况,观察HSC培养上清液对ACC-3细胞的趋化作用及CXCR4受体激活拮抗剂的趋化抑制效应。探讨趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在涎腺腺样囊性癌嗜神经侵袭中的作用。 方法:本实验共分两部分: 第一部分:应用实时定量PCR法检测HSC和ACC-3细胞中趋化因子CXCL12及其受体CXCR4的表达;应用免疫荧光试验检测HSC趋化因子CXCL12的表达和ACC
35、-3细胞趋化因子受体CXCR4的表达;应用流式细胞术检测HSC和ACC-3细胞膜的趋化因子受体CXCR4的表达;应用免疫印迹法检测在HSC和ACC-3细胞培养上清液中趋化因子CXCL12蛋白的表达;应用酶联免疫吸附试验检测免疫抑制剂作用后HSC培养上清液中趋化因子CXCL12的表达。 第二部分:应用趋化实验观察HSC培养上清液对ACC-3细胞的趋化作用及CXCR4受体激活拮抗剂的趋化抑制效应。 实验数据采用SPSS10.0统计软件,t检验进行分析 结果: 第一部分:HSC中趋化因子CXCL12基因有较高的表达,而ACC-3细胞中表达量极少;HSC和ACC-3细胞中趋化因子受体CXCR4基因均有
36、表达,而ACC-3细胞表达量明显较多(p0.05);HSC有趋化因子CXCL12蛋白明显阳性表达,ACC-3细胞有趋化因子受体CXCR4蛋白明显阳性表达;HSC细胞膜上的趋化因子受体CXCR4阳性表达率为67.10,ACC-3细胞膜上趋化因子受体CXCR4的阳性表达率为74.15;HSC培养上清液中可检测到趋化因子CXCL12,而在ACC-3细胞培养上清液中未检测到;免疫抑制剂作用后HSC培养上清液中趋化因子CXCL12的表达量明显减少(p0.05): 第二部分:HSC培养上清液能够对ACC-3细胞产生趋化作用,应用CXCR4受体激活拮抗剂AMD3100能明显的抑制这种趋化效应。 结论: 第一
37、部分:人雪旺细胞表达趋化因子CXCL12并能分泌到细胞外,并且人雪旺细胞细胞膜上有趋化因子受体CXCR4表达;涎腺腺样囊性癌ACC-3细胞表达趋化因子受体CXCR4,而趋化因子CXCL12的表达量极少;免疫抑制剂甲氨喋呤作用后可明显抑制人雪旺细胞趋化因子CXCL12的分泌。 第二部分:人雪旺细胞培养上清液对涎腺腺样囊性癌ACC-3细胞的趋化迁移作用可能是通过人雪旺细胞分泌的趋化因子CXCL12和涎腺腺样囊性癌ACC-3细胞所表达的趋化因子受体CXCR4介导的,CXCR4受体激活拮抗剂AMD3100可以抑制这种作用。目的:检测趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在人雪旺细胞(HSC)和涎腺腺样
38、囊性癌细胞(ACC-3)的表达情况,观察HSC培养上清液对ACC-3细胞的趋化作用及CXCR4受体激活拮抗剂的趋化抑制效应。探讨趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在涎腺腺样囊性癌嗜神经侵袭中的作用。 方法:本实验共分两部分: 第一部分:应用实时定量PCR法检测HSC和ACC-3细胞中趋化因子CXCL12及其受体CXCR4的表达;应用免疫荧光试验检测HSC趋化因子CXCL12的表达和ACC-3细胞趋化因子受体CXCR4的表达;应用流式细胞术检测HSC和ACC-3细胞膜的趋化因子受体CXCR4的表达;应用免疫印迹法检测在HSC和ACC-3细胞培养上清液中趋化因子CXCL12蛋白的表达;应用酶联免疫吸附试验检测免疫抑制剂作用后HSC培养上清液中趋化因子C
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