病理组织的固定

1、病理组织的固定 凡需要进行病理组织学检查的标本 （器官或组织） ， 于离体 （活体或尸体）后，应尽快置放（浸泡）于装有足够量固定液的容器中固定。固定液量应为被固定标本体积的 510 倍。置放标本的容器大小视标本和固定液的体积而定，应适当大一些。 临床科室切取的标本置放于容器中固定后， 应尽快送交病理科继续固定。未能及时、充分固定的干涸或腐败标本不能再进行固定和用于制做切片。 常规固定液为4%中性甲醛（10%中性福尔马林），应预先多量配制贮存，以备随时使用。小标本的固定时间为 46 小时，大标本为 1824 小时或更久。 根据病理学特殊检查（特殊染色和组织化学染色、免疫组织化学染色和原位核酸分子

2、杂交染色、 电镜观察等） 的需要， 应选用其他适宜的固定液进行固定参见后述的“出固定液的常用种类和制备”人 器官、组织固定的基本方法1食管、胃、肠、胆囊、膀胱等空腔器官：依规范方法剪开后，按其自然状态平铺于硬纸板上（重点暴露黏膜面或内表面的病变处） ，并用大头针将标本边缘处固定于纸板上，然后放入4%中性甲醛中固定（黏膜面或内表面朝向容器的液面，并覆盖薄层脱脂棉） 。2肝、脾：由器官背面，沿其长轴每间隔1.52.0cm 纵向平行剖开，切成数片。将每片肝或脾轻轻地平放于装有4%中性甲醛的容器中，容器底面衬以脱脂棉。应避免标本弯曲和相互间的叠压。3肺叶：放入固定液中的肺叶漂浮于液面，需在肺表面覆盖薄

3、层脱脂棉。必要时从支气管注入适量4%中性甲醛。4肾：沿肾外缘中线朝肾门方向作一水平切面（深达于肾盏），再行固定。5淋巴结：先用4%中性甲醛固定1 小时后，再沿其长轴切成数片（厚 23mm） ，继续固定。6 骨组织： 先锯成小片 （若是长骨应作横向锯片） ， 在 4%中性甲醛中固定24小时后，再进行脱钙。7微小组织或液体沉淀物：先用拭纸或滤纸妥为包裹（需用大头针扎牢），然后放入专用小盒内进行中性4%甲醛固定，以防检材遗失。8凡进入固定程序的标本必须连带其正确无误的病理检验号（病理号） 多数固定液对人体有害，需要防护， 必须在封闭的通风条件下进行操作。 组织块的切取和固定：由较大标本切取用于制作切

4、片的组织块 （取材）时，应与标本的断面平行，组织块厚度一般为0.3 cm（不应0.5cm）,面积一般在 11.5X11.5以内。切取组织块的形状，在充分包括肉眼病变的前提下尽量 规则些（例如方形、矩形、三角形等） ；由一个标本切取的多块组织的形状有所不同，便于蜡块与其相应切片的核对。固定组织块的固定液量，一般应为组织块总体积的510倍以上。室内常温（25c左右）下的固定时间为 324小 时；低温（4C）下的固定时间应延长。固定组织块的容器要大一些。组织 块固定期间需要间断地轻摇或搅动固定液以利于固定液的渗入。 常用固定液1 4%中性甲醛（10%中性福尔马林）固定液甲醛（40%） 100 ml无

5、水磷酸氢二钠 6.5g磷酸二氢钠 4.0g蒸馏水 900ml2 乙醇一甲醛（酒精一福尔马林，AF）固定液甲醛（40%） 100ml95%乙醇 900ml说明一般组织块经乙醇一甲醛固定12小时后，即可移入95猿醇内脱水。3 Carnoy 固定液无水乙醇 60ml氯仿 30ml冰醋酸 10ml说明组织化学染色的常用固定液，组织经 Carnoy液固定12小时后， 即可移入无水乙醇中脱水。4 Zenker 固定液升汞 5.0g重铬酸钾 2.5g硫酸钠 1.0g蒸馏水（加至） 100ml说明配制本液时，先将升汞溶于蒸储水中、加温至4050c溶解后，再加入重铬酸钾，最后加入硫酸钠，贮存待用。使用前加入 5

6、ml 冰醋酸，混合。组织块需固定1224 小时。切片染色前，需进行脱汞沉淀处理。5 Bouin 固定液饱和苦味酸水溶液（约1.22%） 75ml甲醛（40%） 25ml冰醋酸5ml说明本液临用时配制。组织块置于Bouin液固定1224小时即可（小块组织只需固定数小时） 。经 Bouin 液固定的组织被苦味酸染成黄色，可用水洗涤 12 小时后进入乙醇脱水 （兼脱色） 。 不必将组织中的黄色除净 （残存于组织中的苦味酸无碍染色）6过碘酸赖氨酸多聚甲醛固定液（PLP）A液：赖氨酸1.827g蒸馏水 50ml0.1mol/L 磷酸盐缓冲液（pH7.4） 50mlB 液： 8%多聚甲醛水溶液100ml说明 本液临用时配制：取 A 液 3 份、B 液 1 份， 混合后， 加入过碘酸钠，使液体终浓度为2%。组织块在4下固定3654 小时。本液对细胞结构和抗原性保存较好。7. B5 （醋酸钠一升汞一甲醛）固定液无水醋酸钠1.25g升汞 6.0g蒸馏水90ml说明将以上物质混合、溶解， 使用前加入甲醛10ml