紫外分光光度法测定荔枝核抗乙肝成份的含量

1、紫外分光光度法测定荔枝核抗乙肝成份的含M【关键词】荔枝核；，抗乙肝；，黄酮类；，紫外分光光度法摘要：目的研究荔枝核抗乙肝成份黄酮类化合物的测定方式。方式紫外分光光度法在510nm处测定。结果成立了回归方程C(Ug/ml)=61+26A,相关系数8,平均加标回收率为%(RSD)。测定荔枝核抗乙肝成份黄酮类化合物含量为。结论该方式简便,准确,可用于测定荔枝核抗乙肝成份黄酮类化合物的含量。关键词：荔枝核；抗乙肝；黄酮类；紫外分光光度法DeterminationoftheContentofAntihepatitisBConsituentsinLitchiSeedbySpectrophotometric

2、MethodAbstract：ObjectiveToestablishamethodforthedeterminationofthecontentofantihepatitisBconstituentsflavonoidsinLitchicontentofanti-hapatitisBconsituentsflavnoidsinLitchiSeedwasdeterminedbyspectrophtometricmethodat510nm.ResultsTheregressionequationC(Hg/ml)+AandR=oftherelationshipbetweenconcentratio

3、nandabsorbancewereestablished.Theaveragerecoverywas%andRSDwas%.ThecontentofantihepatitisBconsituentsflavonoidsinLitchiSeedwas%.ConclusionThemethodiseasyandaccurate,andcanbeusedfordeterminationofthecontentofantihepatitisBconsituentsflavnoidsinLitchiSeed.Keywords：LitchiSeed;AntihepatitisB;Flavonoids;S

4、pectrophometicmethod荔枝核是无患子科植物荔枝的干燥成熟种子，要紧散布在福建、台湾、广西、广东等省。我国古代药典记载荔枝核性温，归肝、肾经，能祛寒止痛。现代临床实验研究显示荔枝核能够降低血糖、调剂血脂和提高抗氧化能力、抑制乙肝病毒的作用1,2。徐庆等3发觉荔枝核中黄酮类化合物具有专门好的抑制乙肝病毒表面抗原HBsAg的功效。目前除少量荔枝核被药用外，大量荔枝核都被遗弃浪费。为了充分利用该资源、变废为宝、研究如何开发荔枝核抗乙肝成份黄酮类化合物很成心义和价值。天然药用植物中黄酮类化合物测定方式要紧有紫外可见分光光度法4、高效液相色谱法5、薄层色谱法6等。国内外文献关于荔枝核中黄

5、酮类化合物的测定方式尚未见报导，木文成立了铝盐显色分光光度法测定荔枝核抗乙肝成份黄酮类化合物的方式，并测定荔枝核抗乙肝成份黄酮类化合物的含量。1仪器与材料仪器756MC紫外-可见光分光光度计（上海分析仪器总厂）;WS2-133-74多功能电子恒温水浴锅（广东汕头医疗器械二厂），Explorer-11140电子天平（瑞士0HAUS公司）。材料荔枝核购自中药材公司，产地广西；芦丁对照品来自中国药品生物制品检定所；氯化铝、亚硝酸钠、氢氧化钠（分析纯）；95%乙醇；石油酸；水为蒸储水。2方式与结果测定方式依据以芦丁为对照品测定荔枝核抗乙肝成份黄酮类化合物的含量，加入铝离子试剂，同时操纵适宜pH值，使黄

6、酮类化合物与铝盐形成配合物在可见光区能取得稳固的特点吸收峰。试样品溶液的配制荔枝核打成粉过40目的筛。取必然量的荔枝核粉，加入适量50%乙醇浸提。提取液过滤后加入石油酸萃取以除去酯类物质和色素，分液去掉石油酸层取得荔枝核黄酮类化合物的提取溶液。对照品溶液的配制精准称取芦丁标准品mg,用50%乙醇溶解后定容，配制成芦丁50%乙醇标准溶液（mg/ml）o检测波长的选择各取试样品溶液和芦丁对照品标准溶液少量，按2.5方式显色后在400650nm区间扫描，确信二者在510nm处均有一强吸收峰（图广2）,应选择510nm为测定波长。图1芦丁标样显色扫描曲线（略）标准曲线的成立精准量取芦丁对照溶液，ml于

7、251nl容量瓶，加水至6mlo加入5%NaN02溶液ml,混匀后放置6min；再加入10%A1C13溶液ml,混匀后放置6min；最后加入4%NaOH溶液ml显色，加水至刻度。静置15mins后在510nm处测定吸光度，以1号瓶为空白。绘制出吸光度-浓度标准曲线（图3）o用最小二乘法求出回归方程为：C（Ug/ml）=61+26A,相关系数r=8,P说明芦丁含量在线性范围、Ug/ml之间与吸光度呈良好的线性关系。图2荔枝核提取液显色扫描曲线（略）图3芦丁标准曲线（略）准确性实验取荔枝核黄酮类化合物的提取液，加50%乙醇配成不同浓度的3种样品。取1ml样品溶液，按2.5显色测定A。结果见表lo实

8、验显示5次测定A值转变很小，相对标准误差（RSD）%（n二5）,说明该方式准确性高。表1准确性实验结果（略）稳固性实验取1ml的1号样品显色后，每隔10min测定1次A值。结果见表2。实验说明在30min内A值维持稳固，1h后A值下降约10%,因此提取液显色后应在30min内测定吸光度。表2稳固性实验结果（略）加标回收实验取3号样品1ml于25ml,再加入芦丁标准溶液，ml,按法显色测定总黄酮含量，计算加标回收率。结果见表3。表3加标回收实验结果（略）从表3可见，总黄酮含量在线形范围、Ug/ml）内，回收率在飞之间,平均回收率达到出52%）,说明该方式能够作为荔枝核中抗乙肝成份黄酮类化合物含量

9、的测定方式。荔枝核抗乙肝成份黄酮类化合物含量的测定荔枝核打成粉过40目的筛。平行取5g荔枝核粉5份，加入50%的乙醇溶液100ml,80回流提取两次，第1次6h,第2次4h。归并两次提取液，提取液加入石油酸萃取除去酯类物质。取必然体积的萃过液，稀释至必然倍数。吸取稀释液1ml按上面的方式显色，测定吸光度，通过回归方程计算出稀释液中总黄酮的浓度。荔枝核中总黄酮含量按下式计算：含量晚户总黄酮的浓度X25X提取液的体积数X稀释倍数荔枝核原料的质量X100%表4是5次平行实验的结果。从表中能够看到荔枝核中抗乙肝成份黄酮类化合物的平均含量为,RSD=%(n=5)。表4荔枝核黄酮类化合物含量(略)3讨论采

10、纳紫外分光光度法测定荔枝核抗乙肝成份黄酮类化合物的含量具有快速、准确、重现性好的特点。提取液显色前用石油酸萃取掉脂类物质和色素，减少了干扰，使含量测定结果准确性更高，重现性更好。荔枝核抗乙肝成份黄酮类化合物的含量测定显示黄酮类化合物的含量较高，能够作为新的抗乙肝药物成份来源开发利用。参考文献:1潘竞锵，郭洁文，韩超，等.荔枝核的药理实验研究J.中国新药杂志,2000,9(1)：14.2肖柳英，潘竞锵，饶卫农，等.荔枝查对小鼠免疫性肝炎的实验研究J.中国新医药，2004,3(6)：7.3徐庆，宋芸娟，陈全斌，等.荔枝核黄酮类化合物对HepG2.2.15细胞系HBsAg与HBeAg表达及HV-DNA含量的阻碍J.第四军医大学学报，2004,25(20)：1862.4王仲英，李香兰.马齿览中黄酮类化