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文档简介
DMEM细胞培养基成分分析姓名:刘程 学号:K0711414121、 实验目地熟练掌握DMEM细胞培养液的配置。2、 实验材料500mL大烧杯 玻璃棒 250mL/500mL盐水瓶 酸度计 50mL小烧杯3个 孔径0.22m 微孔滤膜 一次性滤器 一次性滤纸 去离子水 灭活的小牛血清 DMEM干粉 青霉素 链霉素 NaHCO3 超净工作台 磁力搅拌器 电子天平 药匙3、 配方分析DMEM干粉 1瓶(1,000mL量)NaHCO3 3.7gL-谷氨酰胺 0.2g超纯水 1,000mL4、 实验步骤1、取清洗干净的500mL大烧杯一个,加入新鲜制备的三蒸水约300mL,加热至1530;2、 将DMEM干粉袋竖立轻弹,使袋中粉下沉,剪开袋口,将干粉倒入500mL的大烧杯中,用超纯水冲洗袋23次;3、 放入清洗干净的磁子,在磁力搅拌器充分搅拌,以确保培养基干粉充分溶解;4、 根据配方要求,加入准确称取的NaHCO31.85g,L-谷氨酰胺0.1g,充分摇匀至完全溶解;5、 加入已经制备好的双抗溶液,使青霉素和链霉素的最终使用浓度达到100g/mL;加入培养基总体积约10的已灭活的小牛血清;6、 用浓度为7.4的NaHCO3溶液调整溶液的pH值为7.27.4,加超纯水定容,并将培养液转入盐水瓶;用
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