常见缓冲液的配制

1、附溶液配制方法：pH7.20.01mol/LPBSKH2PO4Na2HPO4NaCl蒸储水加至pH7.4PBS/TNaClKH2PO4Na2HPO412H2O(或Na2HPO47H2O)KCl吐温20蒸储水加至pH9.6碳酸盐缓冲液Na2CO31.59gNaHCO32.93g0.38g1.02g(或Na2HPO412H2O2.58g)8.0g1000mL8.0g0.2g2.89g(或2.16g)0.2g0.5mL1000mL蒸储水加至1000mL0.075mol/L氯化钾低渗液氯化钾0.559g,蒸储水100ml甲醇冰醋酸（3:1）固定液甲醇3份冰醋（乙）酸1份姬姆萨染液Giemsa原?夜1m

2、l1/15mol/L磷酸缓冲液（pH6.8或7.4）10ml2.3%柠檬酸钠溶液柠檬酸钠（NaCHO2HO）2.3g蒸储水100ml明胶显影液明胶粉0.2g三蒸水10ml甲酸0.1ml1%醋酸冰醋（乙）酸1ml蒸储水99mlH"o"33342-若丹明123染液H"o"33342(Hoechst33342)0.25科茜丹明123(Rhodamine123)1.0gPBS1mlDPH贮备液DPH11.6-Dipnenyl-1,3,5hexatriene,4.65mg)四氢味喃10mlDPH工作液(2¥0-6mol/L)DPH贮备液0.1mlPBS1

3、00mlFDA贮备液二醋酸脂荧光素(Fluoresceindiacetate,FDA)5.0mg丙酮1mlFDA工作液FDA贮备液0.1mlPBS100mlM-缓冲?衩(pH7.2)咪口坐50mmol/L3.404g氯化钾50mmol/L3.7g氯化镁(MgCl6HO)0.5mol/L101.65mgEGTA(乙二醇双(a氨基乙基)醛四乙酸)1mmol/L380.35mgEDTA(乙二胺四乙酸)0.1mmol/L29.22mg疏基乙醇1mmol0.07ml4mol/L甘油292ml蒸储水加至1000ml1%TritonX-100液TritonX-100(聚乙二醇辛基苯基醛)1mlM-缓冲液99

4、ml3%戊二醛液戊二醛25%3mlPBS液(pH7.2)97ml0.2%考马斯亮蓝R250染液考马斯亮蓝R250(CoomassiebrilliantblueR250)0.2g甲醇46.5ml冰醋(乙)酸7ml蒸储水46.5ml生理盐水(0.85%氯化钠)氯化钠8.5g三蒸水1000ml0.25mol/L蔗糖水溶液（含0.003mol/L氯华钙）蔗糖85.5g无水氯华钙0.33g蒸储水1000ml0.17mol/L氯化镂液氯化镂4.574g蒸储水500ml0.17mol/L硝酸钠液硝酸钠7.224g蒸储水500ml0.12mol/L硫酸钠液硫酸钠（NaSOHO）19.333g蒸储水500ml0

5、.12mol/L草酸镂液草酸镂（NH）CoHO）8.527g蒸储水500ml0.17mol/L醋酸镂液醋酸镂6.552g蒸储水500ml0.32mol/L葡萄糖液葡萄糖28.83g蒸储水500ml0.32mol/L甘油液甘油(CH(OH)1.26g/ml)11.7ml蒸储水500ml0.32mol/L乙醇液无水乙醇9.33ml蒸储水500ml0.32mol/L丙醇液正丙醇(比重0.803)11.976ml蒸储水500ml化学名：2-4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazinylethanesulfonicacid中文名：羟乙基哌嗪乙硫磺酸分子式：C8H18N2O4SHEPES

6、是一种非离子两性缓冲液，其在pH7.2-7.4范围内具有较好的缓冲能力。其最大优点是在开放式培养或细胞观察时能维持较恒定的PH值.在这种培养条件下，细胞培养瓶的盖子应拧紧，以防止培养液中所需的少量碳酸盐散入空气中.大多数培养液中含有酚红作为pH指示剂，酸性培养液呈橙黄色，碱性培养液呈深红色.HEPES有些昂贵，在高浓度时对一些细胞可能有毒.原则上,HEPES作为缓冲剂可用来代替碳酸氢盐，以解除需要高浓度CO2培养环境的限制.实际操作中并非如此简单.溶解的CO2与碳酸氢盐对良好的细胞生长也是很重要的。HEPES使用方法有两种：(1)HEPES可按所需的浓度直接加入到配制的培养液中，再过滤除菌.每1000ml培养液中加入2.38克HEPES,待溶后用INNaOH调pH至7.2,滤过除菌后使用.此时HEPES的使用浓度为10mmol/L.(2)亦可配成100x贮存液(lmol/L),使用前取99ml培养液加入lml贮存液，最终应用浓度仍为10mmol/L。lmol