课题2　月季的花药培养

1、Cqtlez081029 植物的花药培养在育种上有什植物的花药培养在育种上有什么意义？么意义？花粉粒（花粉粒（1N）单倍体植株（单倍体植株（1N）二倍体纯合子二倍体纯合子植株（植株（2N）花的结构花的结构花丝花丝花药：花药：囊状结构，内有很多花粉囊状结构，内有很多花粉 花粉是由花粉母细胞（即小孢子母细胞）花粉是由花粉母细胞（即小孢子母细胞）经过经过而形成的，因此，花粉是而形成的，因此，花粉是。 花粉的发育要经历：花粉的发育要经历：时期、单核时期、单核期、双核期期、双核期等阶段。等阶段。雄蕊雄蕊（一）被子植物的花粉发育（一）被子植物的花粉发育1花粉母花粉母细胞（细胞（2n）4个小孢子个小孢子(小

2、孢子小孢子四分体时期四分体时期)（n）减数减数分裂分裂1个花粉管细胞核（个花粉管细胞核（n）1个生殖细胞核（个生殖细胞核（n）有丝有丝分裂分裂2个精子个精子单核居中期（单核居中期（n）单核靠边期（单核靠边期（n）注意： 二核花粉粒：成熟的花粉粒中，只含二核花粉粒：成熟的花粉粒中，只含花粉花粉管细胞核和生殖细胞核管细胞核和生殖细胞核。（精子在花粉管中。（精子在花粉管中形成）形成） 三核花粉粒：有些植物的花粉，在成熟前，三核花粉粒：有些植物的花粉，在成熟前，生殖细胞进行一次有丝分裂，形成两个精子，生殖细胞进行一次有丝分裂，形成两个精子，这样的花粉在成熟时，含有这样的花粉在成熟时，含有一个营养核和两

3、一个营养核和两个精子。个精子。 两个精子和一个营养核的两个精子和一个营养核的基因型基因型相同。相同。（二）产生花粉植株的两种途径二）产生花粉植株的两种途径形成原因：主要形成原因：主要取决于培养基中取决于培养基中的激素的种类及的激素的种类及其浓度的配比其浓度的配比体细胞胚（胚状体）：体细胞胚（胚状体）： 在组织培养过程中，某些体细胞在在组织培养过程中，某些体细胞在形态上转变为与合子发育成的胚非常相形态上转变为与合子发育成的胚非常相似的结构，发育过程亦与合子胚类似，似的结构，发育过程亦与合子胚类似，被称为被称为。（三）影响花药培养的因素（三）影响花药培养的因素1、材料的选择、材料的选择 不同植物不

4、同植物 同一植物的不同生理状况同一植物的不同生理状况（花期早期初花期花期早期初花期） 合适的花粉发育期合适的花粉发育期 （单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期） 此外，植株生长条件、材料低温预处理、接种密度等此外，植株生长条件、材料低温预处理、接种密度等2、培养基的组成、培养基的组成实验操作实验操作材料选取材料选取材料的材料的消毒消毒接种和接种和培养培养（一）材料选取（一）材料选取 通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。 最常用的方法：最常用的方法：醋酸洋红法。醋酸洋红法。 某些植物的花粉细胞核不易着

5、色，某些植物的花粉细胞核不易着色， 采用采用焙花青焙花青-铬矾法铬矾法，这种方法能将，这种方法能将花粉细胞核花粉细胞核染成染成蓝黑色蓝黑色。月季的初花期月季的初花期。 选择合适的花粉发育时期也是提高诱导成功率的选择合适的花粉发育时期也是提高诱导成功率的重要因素。一般来说，重要因素。一般来说，在单核期，细胞核由中央移向在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期细胞一侧的时期，花药培养成功率最高。，花药培养成功率最高。 二、材料的消毒：二、材料的消毒：花花蕾蕾（70酒精）酒精）大约大约30s（无（无菌水菌水）清洗清洗（无菌（无菌吸水纸吸水纸）吸干水吸干水分分（0.1氯氯化汞溶液化汞溶液）24min（

6、无（无菌水菌水）冲洗冲洗 月季花蕾的消毒与菊花外植体的消月季花蕾的消毒与菊花外植体的消毒相比较，二者有何不同？毒相比较，二者有何不同？ 在酒精消毒前，花药不需要预先用流在酒精消毒前，花药不需要预先用流水冲洗、洗衣粉洗涤和软刷刷洗水冲洗、洗衣粉洗涤和软刷刷洗 ，酒精酒精氯化汞处理的时间稍长。氯化汞处理的时间稍长。三、接种和培养三、接种和培养剥取花药剥取花药接种花药接种花药培养培养分化培养基培养分化培养基培养鉴定和筛选鉴定和筛选不要损伤花药不要损伤花药？要彻底除去花丝要彻底除去花丝？常常会出现染色体倍性的变化常常会出现染色体倍性的变化？每个培养瓶接种每个培养瓶接种 （7 710 10 ） 个花药个

7、花药？花药长出愈伤组织还要转移花药长出愈伤组织还要转移到哪？到哪？主要原因是主要原因是营养核和生营养核和生殖核融合殖核融合造造成的成的项目项目相同点相同点不同点不同点P40第第2题题植物组植物组织培养织培养技术技术离体的植物组织经离体的植物组织经脱分化形成愈伤组脱分化形成愈伤组织，再分化成丛芽，织，再分化成丛芽，诱导出根，然后进诱导出根，然后进行移栽。行移栽。培养基配制方法，培养基配制方法，无菌技术及接种无菌技术及接种操作等基本相同。操作等基本相同。外植体为体细胞，染色体数无需加外植体为体细胞，染色体数无需加倍。倍。取材为花药，培养的为取材为花药，培养的为单倍体幼苗单倍体幼苗，植株植株弱小，高度不育弱小，高度不育，必须用，必须用秋水秋水仙素处理仙素处理，使染色体加倍，恢复正，使染色体加倍，恢复正常植株的染色体数，而且为纯种。常植株的染色体数，而且为纯种。花药培养的选材非常重要，需事先花药培养的选材非常重要，需事先摸索时期适宜的花蕾；摸索时期适宜的花蕾；花药裂开后花药裂开后释放出的