日立Chromaster液相色谱仪操作、清洁、维护、保养规程

1、编 号页 数1 / 12制订部门技质部颁发部门技质部安琪酵母股份有限公司药业分公司日立日立 ChromasterChromaster 液相色谱液相色谱仪操作、清洁、维护、保仪操作、清洁、维护、保养规程养规程生效日期： 年 月 日文文 件件 目目 录录一、一、目的目的 .2 2二、二、范围范围 .2 2三、三、责任者责任者 .2 2四、四、内容内容 .2 2五、五、修订历史修订历史 .2 2六、六、相关记录相关记录 .3 3你的签名表明你已清楚了解本文件及附件内容，充分理解并认可本文件的所有条款。部门部门签签 名名日日 期期起草人起草人技质部技质部审核人审核人技质部技质部审核人审核人机修车间机修

2、车间QAQA 审阅审阅技质部技质部批准人批准人质量管理负责人质量管理负责人批准人批准人总经理总经理本文件根据需要应分发于以下部门：技质部生产部办公室调度室制剂车间原料药车间机修车间中心化验室仓储档案室编 号安琪酵母股份有限公司药业分公司日立日立 ChromasterChromaster 液相色谱仪操作、液相色谱仪操作、清洁、维护、保养规程清洁、维护、保养规程页 数2 / 12一、一、 目的目的1、建立一个日立Chromaster液相色谱仪操作、清洁、维护、保养规程。二、二、 范围范围1、日立 Chromaster 液相色谱仪。三、三、 责任者责任者1、中心化验室主任，操作者。四、四、 内容内容

3、1、仪器型号及组成：日立 Chromaster 液相色谱仪模块泵自动进样器柱温箱二极管阵列检测器（DAD）荧光检测器蒸发散射光检测器(ELSD)型号5110521053105430544060002、工作环境温度435，在测量期间温度波动5；湿度25%85%电源220V 50HZ环境无腐蚀气体、磁场、阳光直射3、操作规程3.1 使用前准备a）每次开机前先检查电源连接情况,确保电源正确的连接。b）每次开机前检验流动相,以保证足够量的流动相。3.2 开机 确认电源连接正确后，打开各使用模块电源。3.3 打开与设备连接的电脑，在电脑桌面双击图标，使操作系统与设备联机，进入登录窗口。3.4 第一次使用

4、仪器时应对仪器进行配置。选择配置，进入仪器配置界面3.4.1 点击“增加” ，选择连接的仪器编 号安琪酵母股份有限公司药业分公司日立日立 ChromasterChromaster 液相色谱仪操作、液相色谱仪操作、清洁、维护、保养规程清洁、维护、保养规程页 数3 / 123.4.2 打开仪器，自动检测配置的仪器模块编 号安琪酵母股份有限公司药业分公司日立日立 ChromasterChromaster 液相色谱仪操作、液相色谱仪操作、清洁、维护、保养规程清洁、维护、保养规程页 数4 / 123.4.3 确认自动检测所有模块，确认泵的信息、自动进样器的信息、柱温箱信息（选择control off a

5、t shutdown） 、检测器信息（选择 lamp off at shutdown）3.4.4 配置仪器，点击向右箭头，命名仪器名称。3.5 输入用户名、密码，选择创建新工程登录。3.6 仪器准备3.6.1 排空 打开设备监视器，打开排空阀，设流速为 5，流量 100%，点击“清洗” ，分别将四条管路排气泡，结束之后关闭排空阀。3.6.2 自动进样器清洗 点击“清洗” ，依次对柱塞、注射器进行清洗3.7 方法设置点击“新建方法” ，在“方法”下选择“事件表”按照检测需要对自动进样器、LC 梯度、液相色谱控制、测量、采集、恒温器、积分、计算进行设置，设置完成后点击“发送方法”3.8 基线 方法

6、发送仪器运行稳定之后，点击“数据采集”查看基线3.9 序列设置及运行 点击“序列” ，分别对样品起始位置“SV” 、结束位置“EV” 、样品编 号安琪酵母股份有限公司药业分公司日立日立 ChromasterChromaster 液相色谱仪操作、液相色谱仪操作、清洁、维护、保养规程清洁、维护、保养规程页 数5 / 12ID、样品名、进样量、进样体积、文件名、方法名、报告格式等进行设置，设置完毕后点击“序列检查” 、 “序列保存”再“运行” 。3.10 ELSD 检测器操作3.10.1开机：打开 ELSD 电源，并通过面板将 ELSD 设置为“运行(run)”状态。3.10.2通气：打开并逐步调节

7、供气压力至 0.5Mpa。 （注意：在使用钢瓶气源时，通气前主阀与减压阀应处于全关状态；拧开减压阀时需小心操作、将供气压力从小到大逐步调高至 0.5Mpa，最高压力不得超过 0.55Mpa 或 80psi。 ）3.10.3通气加热平衡：根据检测的需要设定加热温度和气体流速，然后让仪器平衡 10 分钟。平衡后基线噪音应小于 1mV，否则需要进行故障排查（如气体清洁度及光源稳定性） 。3.10.4流动相平衡：确保流动相清洁无污染，不含不挥发的改性剂。将柱后流份接入 ELSD，然后平衡 5 分钟，基线噪音应小于 2mV，可通过调整漂移管温度和气流量使噪音最小化。如噪音始终很高，需要进行故障排查（如气

8、源、流动相或柱后流出物是否被污染） 。3.10.5测试后清洗：如测试时使用腐蚀性的流动相（含强酸或强碱） ，建议将 ELSD 继续连接在柱上清洗约 30 分钟。在使用高水含量的流动相清洗柱和 ELSD 时，相应调高 ELSD 漂移管加热温度和气流量以利于流动相挥发。3.10.6关机：停止通入流动相后保持 ELSD 继续运行 10 分钟。可将 ELSD 设置为“待机(standby)”状态则 ELSD 会自动关闭气阀、光源并停止加热，等待下次启动工作。或者，可以关闭供气源 1 分钟后，完全关闭 ELSD 电源。3.10 数据处理 点击“数据处理”进入数据处理界面，打开需要处理的色谱图。3.10.

9、1 单击右键，选择“基线” 、 “锁定”编 号安琪酵母股份有限公司药业分公司日立日立 ChromasterChromaster 液相色谱仪操作、液相色谱仪操作、清洁、维护、保养规程清洁、维护、保养规程页 数6 / 123.10.2 选择锁定基线后，指定不需要积分的区域编 号安琪酵母股份有限公司药业分公司日立日立 ChromasterChromaster 液相色谱仪操作、液相色谱仪操作、清洁、维护、保养规程清洁、维护、保养规程页 数7 / 123.10.3 定峰，为目标峰命名编 号安琪酵母股份有限公司药业分公司日立日立 ChromasterChromaster 液相色谱仪操作、液相色谱仪操作、清

10、洁、维护、保养规程清洁、维护、保养规程页 数8 / 123.10.4 制作标准曲线 3.10.4.1 点击“新建” ，创建一个新的标准曲线并命名。3.10.4.2 打开校准下面的“选项”设置校准选项3.10.4.3 设置校准选项编 号安琪酵母股份有限公司药业分公司日立日立 ChromasterChromaster 液相色谱仪操作、液相色谱仪操作、清洁、维护、保养规程清洁、维护、保养规程页 数9 / 123.10.4.4 打开标准曲线的第一个标样色谱图，选择“增加峰” ，为目标峰定峰，修改化合物名称和峰类型，输入含量编 号安琪酵母股份有限公司药业分公司日立日立 ChromasterChromas

11、ter 液相色谱仪操作、液相色谱仪操作、清洁、维护、保养规程清洁、维护、保养规程页 数10 / 123.10.4.5 打开第二个浓度的标样色谱图，选择“增加现有的” ，然后输入等级 2 的含量；打开第三个浓度的标样色谱图，输入含量，创建等级 3；打开第 4 个浓度的标样色谱图，输入含量，创建等级 4，所有浓度处理完后，可在左下角化合物，查看标样的标准曲线。3.10.4.6 打开未知样品的色谱图，使用得到的标准曲线计算未知样，单击“设置”选择已有的标准曲线，选择 ESTD 外标法，左下角查看计算结果、性能等编 号安琪酵母股份有限公司药业分公司日立日立 ChromasterChromaster 液

12、相色谱仪操作、液相色谱仪操作、清洁、维护、保养规程清洁、维护、保养规程页 数11 / 124、清洁维护及保养4.1 检测器的维护和保养4.1.1 检测器是液相色谱仪器的数据收集部分，由很多的电子和光学元件组成。禁止拆卸更动仪器内部元件防止损坏或影响准确度。4.1.2 仪器内部的流通池是流动相流过的元件，样品的干净程度和微生物的生长都可能污染流通池，导致无法检测或检测结果不准，所以在使用了一段时间以后要先用水冲洗流通池和管路再换有机溶剂冲洗。4.1.3 当仪器检测数据出现明显波动，基线噪音变大时要冲洗仪器管路，冲洗后如果还是没有改善就应该检测氘灯能量，如果能量不足就因更换新的氘灯。4.1.4 仪

13、器在每次使用完了以后都要用水和一定浓度的有机溶剂冲洗管路，保证下次使用时管路和系统的清洁。4.1.5 气源纯度（氮气或空气）必须达到 99.9%，否则引起基线噪音。4.1.6 对于钢瓶气源，ELSD 操作结束后应完全关闭主阀与减压阀。要进行 ELSD 操作时，先打开 ELSD 电源，然后依次打开钢瓶主阀与减压阀，小心操作减压阀，将供气压力逐渐提高到 0.5Mpa。4.2 色谱柱的维护和保养编 号安琪酵母股份有限公司药业分公司日立日立 ChromasterChromaster 液相色谱仪操作、液相色谱仪操作、清洁、维护、保养规程清洁、维护、保养规程页 数12 / 124.2.1 所使用的流动相均应为 HPLC 级或相当于该级别的，在配置过程中所有非 HPLC 级的试剂或溶液均经 0.45um 薄膜过滤。而且流动相使用前都经过超声仪超声脱气后才使用。4.2.2 所使用的水必须是经过蒸馏纯化后再经过 0.45um 水膜过滤后使用，所有试液均新用新配。并且在进样的样品都必须经过 0.45um 薄膜针筒过滤后进样。4.2.3 在仪器检测完了后，均使用水：甲醇=90：10 清洗管路和色谱柱 1