化学药品检验中应注意的问题

1、化学药品检验中应注意的问题化学药品检验中应注意的问题安康市食品安康市食品药品药品检验检测中心检验检测中心朱清丽朱清丽2014.32014.3实验准备与操作中应注意的问题溶出度实验中应注意的问题高效液相色谱常见故障及解决方案滴定实验中的注意事项一、实验准备与操作中应注意的问题 1、玻璃仪器的清洗及干燥 清洗标准：内壁上附着的水膜均匀，既不聚成水滴，也不成股流下。常用的烧杯、三角瓶、量筒等一般玻璃仪器洗涤时，先用自来水冲去灰尘，再用毛刷蘸取洗衣粉等洗涤剂直接刷洗内外表面。最后用自来水冲洗干净，用纯化水淋洗三次。滴定管、比色管、容量瓶和移液管等量器不用毛刷刷洗，根据油污程度选择适当的洗涤剂清洗。新购

2、买的玻璃器皿可先用0.5%的去污剂洗刷，再用自来水洗净，然后浸泡在1%2%盐酸溶液中过夜（不可少于不可少于4小时小时），再用自来水冲洗，最后用纯化水冲洗两次。 干燥控干干燥法：又叫风干，是最简单易行的干燥方法烘干干燥法：将仪器放入烘箱中，控制温度在105左右烘干。（容量瓶等精密刻度玻璃仪器不适用）吹干干燥法：用电吹风快速吹干玻璃器皿。烤干干燥法：用酒精灯或红外灯加热烤干玻璃器皿。有机溶剂干燥：对一些不能加热的厚壁或有精密刻度的仪器，如试剂瓶、吸滤瓶、容量瓶、滴定管等，可加入少量易挥发且与水互溶的有机溶液（如无水乙醇、甲醇等），转动仪器使溶剂浸润内壁后倒出。如此反复操作23次，便可借助残余溶剂的

3、挥发将水分带走。 2、取样要求具有科学性、真实性与代表性取样量：设样品总件数为X 当X3时，每件取样； 当3X300时，按 随机取样； 当X300时，按 随机取样； 3、滤纸的选择类型：定量分析滤纸、定性分析滤纸、层析定性分析滤纸定量分析滤纸：用于定量化学分析中重量法分析试验和相应的分析试验。定性分析滤纸：用于定性化学分析和相应的过滤分析。1X12/X 4、影响实验的各种因素仪器：比对、测试条件 操作：严格按标准要求规范 对照品：来源、纯度、水分、换算、对照品溶液的稳定性样品：贮存条件、均一性滴定液及试剂：重新标化、更换试剂并重新配备eg.奥美拉唑肠溶胶囊释放度问题用不同厂家试剂配制的0.23

4、5mol/L磷酸氢二钠溶液实验结果：上海某一厂 20%国药集团 90%广东金砂 90%谷维素片（含量应为标示量的95.0%105.0% )不同振摇时间对实验结果的影响10min 93.4%30min 96.2%100min 97.0%阿司匹林片中游离水杨酸由于阿司匹林非常容易分解，所以时间控制很重要。必须是临用新配。二、溶出度实验中应注意的问题 1、溶出度（释放度）的基本概念、溶出度（释放度）的基本概念（1）溶出度：指活性药物成分从片剂、胶囊剂或颗粒剂等制剂在规定条件下溶出的速率和程度。中国药典2010年版（2）溶出度试验：是一种控制药物制剂质量的体外检测方法，是以实验为基础，以溶解为理论，并

5、用数学分析手段处理溶出度试验数据，是研究固体制剂以及半固体制剂所含主药的晶型、粒度、处方组成、辅料品种和性质、生产工艺等对制剂质量统一性的方法。（3）溶出度测定法：是将某种固体制剂的一定量分别置于溶出度仪的转篮（或溶出杯）中，在370.5恒温下，在规定的转速、溶出介质中依法操作。中国药品检验标准操作规范2010年版 2、影响溶出度的因素 影响溶出度的因素药物性质工 艺试验条件制 剂溶出试验条件的影响温度的影响溶出介质脱气的影响投样取样操作的影响转篮转杆的影响转速的影响药片位置效应的影响配置溶出介质的试剂的影响（1）温度的影响a、外围水浴高度应超过溶出杯里液面的高度，保证杯中溶出介 质的温度；b

6、、当溶出介质中有机相比例较大时，注意预热和试验过程中介 质挥发，需要使用密封性良好的溶出仪。从杯架板杯孔往水浴箱里注入蒸馏水，并使水位达到红色标线 （2）溶出介质脱气的影响 a、溶液中的气泡在转篮中聚集，会堵塞转篮孔隙，改变 了筛网的孔隙率，从而影响了药物的溶出。 b、气泡与药物相连降低了与溶剂接触的表面，或改变了 比重而使崩解和解聚过程改变。 c、气泡与聚集颗粒结合，使溶剂部颗粒的浓度及颗粒均 匀度随意改变。 d、溶入的气体有时会明显改变有效成分的性质。 e、温度改变时小气泡释放出，对液体流型产生影响。 f、改变溶出介质的pH值。 脱气的方法： a、煮沸法：煮沸15分钟 b、抽滤法：加热至约

7、41，趁热减压0.45m过滤 c、超声法：减压超声脱气5分钟以上 d、真空脱气：取溶出介质在缓慢搅拌加热至41，并在 真空条件下不断搅拌5分钟以上(真空脱气仪）（3）投样与取样操作的影响a、投样 篮法：分别置于干燥转篮中，同时投入六个杯中，自接触 溶出介质时开始计时。 浆法与小杯法：逐片投入溶出杯中，在30秒内完成投样自第一个样品接触溶出介质开始启动搅拌并计时。b、取样 在达到该品种规定的溶出时间时，应在仪器开动的情况下取样。 自6杯中完成取样，时间一般应在1min内。 取样至滤过应在30s内完成。 c、滤膜吸附影响 过滤时滤膜与主成分间存在着一个吸附饱和过程，滤膜吸附一定量后达到饱和，不再吸

8、附。（滤膜用蒸馏水浸泡） 吸附量2%以下时可忽略不计；如果滤膜的吸附较大，可以将滤膜在水中煮沸1h以上，如果吸附仍很大，应改用其他滤膜或滤材。必要时可将微孔滤膜滤过改为离心操作，取上清液测定。 （4）转篮与转杆的影响 a、转动时杆是否在溶出杯的正中央。 b、转篮洁净程度：转篮孔隙如有堵塞可用水或其他溶剂超声处理、洗净。 c、浆板厚度：一般规定浆板的厚度均为4.01.0mm，浆板越厚产生的物理机械力就越大。 （5）转速的影响 低转速有时差异明显 （6）药片位置效应的影响 a、投放过程中要避免与桨杆或桨叶发生碰撞。 b、样品在溶出杯中位置应处于底部中心位置，如有差异距底部中心距离1cm （7）配制

9、溶出介质的试剂和试液 a、无机盐或有机溶剂，一般因不会厂商不同而产生显著性差异。 b、水，有时会由于来源各异，pH值有所不同，从而导致测定结果的差异。 c、表面活性剂SDS（十二烷基磺酸钠 ）、吐温80等会因生产厂商的不同测定结果有差异。 d、缓冲液调节pH值至规定pH值0.05之内。三、高效液相色谱常见故障及解决方案数据结果色谱图压力 （一）压力 1、无压力现现 象象判判 断断故故 障障 排排 除除面版灯不亮电源不通检查电源接头松脱拧紧接头泵头漏液接口太松拧紧泵头螺丝泵密封垫磨损更换密封垫泵不送溶剂泵头有气泡排气泡，溶剂需脱气使用的溶剂黏性太高换低黏性溶剂溶剂贮液器中过滤器脏清洗贮液瓶、过滤

10、器排空阀打开关闭排空阀控制器设定不正确设置正确流动相不够补足流动相 2、压力高现现 象象判判 断断故故 障障 排排 除除压力值高泵流速设定太高设定正确的流速流动相使用不恰当使用恰当的流动相缓冲结晶盐沉淀冲洗样品与流动相不互溶稀释或改变流动相柱温太低升高温度色谱柱性能下降换柱溶剂贮液器中过滤器脏清洗链接管路阻塞冲洗，必要时更换进样阀阻塞冲洗进样器 3、压力低现现 象象判判 断断故故 障障 排排 除除压力值低泵流速设定太低设定正确的流速色谱柱选择不恰当更换恰当的色谱柱柱温过高降低柱温系统漏液检查漏液位置并维修流动相使用不当改变流动相 4、压力不稳定现现 象象判判 断断故故 障障 排排 除除压力变化

11、重现性好采用的方法是梯度所引起的压力变化是正常的泵内有气泡溶剂脱气不适当排气泡，溶剂需脱气压力波动泵密封垫损坏更换密封垫 溶剂混合器故障清洗或更换混合器漏 液连接口太松拧紧接口管路损坏更换 （二）从色谱图的异常情况推测 1、峰前延现 象判 断故 障 排 除峰前延柱性能下降更换色谱柱保护柱失效换柱芯进样体积太大或样品浓度太高降低进样体积或降低样品浓度 2、峰拖尾现 象判 断故 障 排 除峰拖尾柱性能下降更换色谱柱保护柱失效换柱芯色谱柱或保护柱被污染清洗柱或保护柱，必要时更换色谱柱选择不当选择恰当的色谱柱流动相选择不当选择恰当的流动相 3、峰变宽现 象判 断故 障 排 除峰变宽柱性能下降更换色谱柱

12、保护柱失效换柱芯色谱柱或保护柱被污染清洗柱或保护柱，必要时更换色谱柱选择不当选择恰当的色谱柱流动相选择不当选择恰当的流动相流动相流速太低调节流速缓冲液浓度太低增加浓度系统没到达平衡使系统到达平衡进样器问题检查进样器环境温度变化使用柱温箱漏夜检查漏夜的位置并维修出现两个或多个未被完全分离的物质的峰选择其它色谱条件以改善分离效果检测器时间常数太大使用较小的时间常数 4、峰分叉现 象判断故障排除峰分叉柱性能下降更换色普柱保护柱失效换柱芯色谱柱或保护柱被污染清洗柱或保护柱，必要时更换进样体积太大或样品浓度太高降低进样体积或降低样品浓度样品溶剂不溶流动相改变溶剂或采用流动相溶解样品 5、无峰现 象判 断

13、故 障 排 除无峰检测器参数设置错误设置正确的检测器参数样品降解检查样品配制过程，更换样品自动进样器故障检查进样器无样品加样品检测器与数据处理装置链接故障检查并正确链接 6、负峰现象判断故障排除出现所有负峰连接数据处理系统信号线接反正确连接记录仪或检测器信号极性相反改变极性设置出现一个或几个负峰离子对分离体系对峰的影响在流动相中溶解样品使用的流动相吸收高使用流动相稀释样品自动进样器注射进空气清洗自动进样器 7、鬼峰现 象判 断故 障 排 除色谱图出现鬼峰样品前处理时产生降解或混入杂质用标准品对照、检查样品处理过程，换新样品前一次进样的洗脱物增加分析时间或梯度洗脱、提高流速、如问题仍存在，两次进

14、样间用强溶剂冲洗色谱柱注射器脏清洗注射器、冲洗进样口流动相被污染清洗溶剂贮液瓶、清洗溶剂入口过滤器、使用HPLC级试剂柱被污染清洗柱或更换柱六通阀污染清洗六通阀检测器污染清晰检测器管路污染冲洗流动相中含有稳定剂或稳定剂变化使用无防腐溶剂 8、保留时间变化现 象判 断故 障 排 除保留时间不重复系统不稳或未达到平衡分析之前应有足够的时间使系统平衡室温波动大使用柱温箱、将系统置于恒温、空气对流小的环境柱被污染冲洗柱或更换柱溶剂配比不合适调节溶剂配比进样体积太大或样品浓度太高减小进样体积现 象判 断故 障 排 除保留时间不变化流速变化重新设定流速,检查泵 是否正常工作系统没有达到平衡分析之前应有足够

15、的时间使系统平衡柱被污染冲洗柱或更换柱流动相被污染清洗溶剂贮液瓶、清洗溶剂入口过滤器、使用HPLC级试剂系统泄漏检查并进行维修流动相脱气不够充分清洗溶剂贮液瓶、清洗溶剂入口过滤器、使用HPLC级试剂 室温变化使用柱温箱、将系统置于恒温、空气对流小的环境柱恒温箱设置有误设置正确的温度 9、基线漂移现 象判 断故 障 排 除基线漂移系统不稳或没有达到平衡分析之前应有足够的时间使系统平衡室温不稳使用柱温箱、将系统置于恒温、空气对流小的环境流动相污染或分解清洗溶剂贮液瓶、清洗溶剂入口过滤器、使用HPLC级试剂流动相脱气不充分脱气重新平衡系统流动相配比不当或流速变化更改配比或流速柱被污染冲洗柱或更换柱现

16、 象判 断故 障 排 除基线漂移固定相流失为说明问题存在，用一段连接管路代替色谱柱，通流动相检测基线检测池被污染或有气体用甲醇或其他强极性的溶剂冲洗流通池测定的波长选择有误使用分光光度计说明背景吸收，如背景值高，说明流动相含有紫外吸收化合物导致基线漂移。使用的流动相应在紫外截止波长以外，或更换溶剂系统泄漏检查并进行维修样品中有强保留的物质用强度合适的溶剂清洗色谱柱 10、无规则基线噪音现 象判 断故 障 排 除无规则基线噪音系统不稳或没有达到平衡分析之前应有足够的时间使系统平衡系统泄漏检查并进行维修流动相污染或分解清洗溶剂贮液瓶、清洗溶剂入口过滤器、使用HPLC级试剂柱被污染冲洗柱或更换柱色谱

17、柱填料流失或阻塞更换色谱柱现 象判 断故 障 排 除无规则基线噪音流动相混合不均或混合器工作不正常维修或更换混合器检测池被污染或用甲醇或其他强极性的溶剂冲洗流通池系统内有气泡用强极性的溶剂清洗系统检测器内有气泡清洗检测器，在检测器后面安装背景压力调节器检测器灯能量不足更换灯11、规则基线噪音现 象判 断故 障 排 除规则基线噪音流动相、检测器或泵内有气泡流动相脱气，冲洗系统除去检测器或泵内的空气室温不稳稳定环境温度。使用柱温箱、将系统置于恒温、空气对流小的环境流动相回收使用除非特殊需要不使用回收溶剂流动相混合不完全使流动相混合均匀或使用低黏度的溶剂泵振动在系统中假如脉冲阻尼器泵入口管路松或阻塞

18、检查泵入口管路在同一水平上有其他设备关掉仪器，检查干扰是否来自于外部 （三）从数据结果中分析 1、定量结果现 象判 断故 障 排 除精密度降低样品预处理时样品降解或混入杂质用标准品对照、检查样品处理过程，换新样品保留时间改变，峰形不正常见“峰形不正常”的故障排除方法检测器响应故障检查检测器峰积分不正确重新设置参数现 象判 断故 障 排 除精密度降低进样问题（对外标法）随手动进样器的类型不同而异，有下列情况：（1）如使用全部定量环的手动进样器，在进样前需在“取样”状态下清洗三次；（2）如使用部分定量环的手动进样器，进样量需少于定量唤体积的50%（3）如使用注射器的手动进样器，需确保进样操作重复；

19、（4）如使用自动进样器需确保正确的进样体积，注射器不含空气，样品瓶有足够的样品，系统不泄漏（5）如手动进样器、自动进样器都使用，应确保系统的平衡现 象判 断故 障 排 除准确度降低峰积分不正确见“精密度降低”的故障排除方法进样问题见“精密度降低”的故障排除方法样品预处理时样品降解或混入杂质用标准品对照、检查样品处理过程，换新样品样品蒸发样品密封保存在适当的温度下样品前处理不当检查样品的处理过程内标物配置不当配置新的内标物 2、定性结果现 象判 断故 障 排 除峰不能分辨改变保留时间见“保留时间改变”的故障排除数据处理装置的参数不正确适当输入参数，进标准样，提高准确度无 峰改变保留时间故障排除方法数据处理装置的参数不正确重新适当输入参数，进标准样，提高准确度鬼 峰见“鬼峰”可能的原因见“鬼峰”的故障排除方法四、滴定实验中的注意事项 1、仪器的检漏涂凡士林的方法：取下滴定管的活旋塞，用滤纸仔细擦干旋塞和旋塞套里的水，蘸取少许凡士林，轻涂于旋塞小孔两侧，平行将旋塞塞入夹套之后，向一个方向旋动旋塞，直至磨口塞变得透明即可。（凡士林不应涂太多，否则会堵塞小孔；旋动旋塞时应有一定的向旋塞小头部分方向挤的力，以免来回移动旋