探究培养液中酵母菌种群数量的变化

1、探究培养液中酵母菌种群数量的变化探究培养液中酵母菌种群数量的变化单细胞单细胞真核生物真核生物, ,异养异养生物生物既能进行出芽生殖又能进行有性生殖，在既能进行出芽生殖又能进行有性生殖，在氧气充足的环境中主要以出芽氧气充足的环境中主要以出芽生殖的方式快速增殖生殖的方式快速增殖；生长的最适宜温度在生长的最适宜温度在20-3020-30之间，之间，最简单的来源是使用食品类商店出售的用于发面或制酒的高活性干酵母最简单的来源是使用食品类商店出售的用于发面或制酒的高活性干酵母作为菌种作为菌种酵母菌的酵母菌的生长周期短，增殖速度快生长周期短，增殖速度快， 是良好实验材料。是良好实验材料。【酵母菌酵母菌】：探

2、究酵母菌的呼吸方式探究酵母菌的呼吸方式( (有氧呼吸和无氧呼吸有氧呼吸和无氧呼吸) )酶酶C6H12O6 +6H2O+6O212H2O+6CO2+能量能量(大量大量)C6H12O6酶酶2C2H5OH(酒精酒精) 2CO2能量能量(少量少量)1 1酵母菌生长周期短，增殖速度快且世代间不重叠，酵母菌生长周期短，增殖速度快且世代间不重叠，在含糖的液在含糖的液体培养基（培养液）中酵母菌繁殖很快，体培养基（培养液）中酵母菌繁殖很快，迅速形成一个封闭容器迅速形成一个封闭容器内的酵母菌种群，通过细胞计数可以测定封闭容器内的酵母菌种内的酵母菌种群，通过细胞计数可以测定封闭容器内的酵母菌种群随时间而发生的数量变

3、化。群随时间而发生的数量变化。2 2养分、氧气、温度和代谢废物养分、氧气、温度和代谢废物等是影响种群数量持续增长的限等是影响种群数量持续增长的限制因素。制因素。3 3利用血球计数板在显微镜下直接计数是一种常用的细胞计数法利用血球计数板在显微镜下直接计数是一种常用的细胞计数法( (抽样检测法抽样检测法) )，一般用于单细胞微生物数量的测定，由于血球计，一般用于单细胞微生物数量的测定，由于血球计数板上的计数室盖上盖玻片后的容积是一定的，所以可根据在显数板上的计数室盖上盖玻片后的容积是一定的，所以可根据在显微镜下观察到的细胞数目来计算单位体积的细胞的总数目。微镜下观察到的细胞数目来计算单位体积的细胞

4、的总数目。一、实验原理一、实验原理【血球计数板血球计数板】：. .计数室规格：计数室规格： 微生物计数室微生物计数室1mm1mm. .计数室大小：计数室大小： . .计数方法计数方法:(:(以以25251616为例为例) ). .计算公式计算公式:(:(以以25251616为例为例) ).使用方法使用方法计数计数5个中方格共个中方格共80个小方格的酵母菌数个小方格的酵母菌数每每mL菌数菌数 400104稀释倍数稀释倍数80个小方格的菌数个小方格的菌数80长：长：1mm1mm宽：宽：1mm1mm高：高：0.1mm0.1mm体积：体积： mmmm3 3 mLmL1010-4-40.10.11.1.

5、取相同试管若干支，分别加入取相同试管若干支，分别加入5mL5mL肉汤培养液肉汤培养液( (或马铃薯培养液或马铃薯培养液) )，塞上棉塞。塞上棉塞。2.2.用高压锅进行用高压锅进行高压蒸气灭菌高压蒸气灭菌后，后，冷却至室温冷却至室温，分别标记，分别标记1 1、2 2、3 3等。等。3.3.将酵母菌母液分别加入试管各将酵母菌母液分别加入试管各5mL5mL，摇匀后用血球计数板计数起，摇匀后用血球计数板计数起始酵母菌个数，做好记录。始酵母菌个数，做好记录。4.4.将各试管送进恒温箱将各试管送进恒温箱2828下培养下培养7 7天。天。5.5.每天同一时间每天同一时间各组取出本组的试管，用血球计数板计数酵

6、母菌各组取出本组的试管，用血球计数板计数酵母菌个数个数( (从试管中吸出培养液进行计数之前，应将试管从试管中吸出培养液进行计数之前，应将试管轻轻振荡轻轻振荡几几次次) )，并作记录，连续观察，并作记录，连续观察7 7天。天。 除去培养液中的杂菌除去培养液中的杂菌防止培养液温度过高杀防止培养液温度过高杀死酵母菌死酵母菌二、方法步骤二、方法步骤使培养液中的酵母菌分使培养液中的酵母菌分布均匀布均匀在在恒定体积恒定体积的培养液中培养酵母菌，定期取样测定培养液中酵的培养液中培养酵母菌，定期取样测定培养液中酵母菌的数量，结构如图。母菌的数量，结构如图。. .曲线的曲线的、 3 3各阶段呈型增长，原因是？各

7、阶段呈型增长，原因是？. .曲线的曲线的阶段种群数量下降，原因是？阶段种群数量下降，原因是？培养时间种群数量S培养液体积是恒定的，即环境资源是有限的培养液体积是恒定的，即环境资源是有限的营养物质的消耗，有害代谢产物的积累，营养物质的消耗，有害代谢产物的积累，PHPH的降低等的降低等造成造成种群的出生率死亡率种群的出生率死亡率 三、结果分析三、结果分析活菌数活菌数计数应重复计数应重复3 3次，取平均值次，取平均值1.1.从试管中吸出培养液进行计数之前，应将试管轻轻振荡几次。这是为什么？从试管中吸出培养液进行计数之前，应将试管轻轻振荡几次。这是为什么？2.2.对于压在小方格界线上的酵母菌，应当怎样

8、计数？对于压在小方格界线上的酵母菌，应当怎样计数？3.3.如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应当采取怎样的措施？如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应当采取怎样的措施？4.4.本实验需要设置对照？如果需要本实验需要设置对照？如果需要, ,请讨论对照组应怎样设计和操作，如果不请讨论对照组应怎样设计和操作，如果不需要，请说明理由。需要，请说明理由。5.5.血球计数板使用后，如何清洗？血球计数板使用后，如何清洗？浸泡后流水冲洗浸泡后流水冲洗四、实验讨论四、实验讨论使培养液中的酵母菌分布均匀使培养液中的酵母菌分布均匀只计数相邻两边及其顶角只计数相邻两边及其顶角适当稀释后再计数适当稀释后再计数不需

9、要，不同采样时间形成前后自身对照不需要，不同采样时间形成前后自身对照四、实验讨论四、实验讨论6.6.酵母菌能够作为良好的实验材料的原因？酵母菌能够作为良好的实验材料的原因？7.7.利用血球计数板对酵母菌进行计数的方法？具体操作？利用血球计数板对酵母菌进行计数的方法？具体操作？8.8.如果想只计数活菌数，可用如果想只计数活菌数，可用台盼蓝台盼蓝或或亚甲基蓝亚甲基蓝染色，被染上染色，被染上蓝色的蓝色的( (即死菌即死菌) )不计数。不计数。为何死亡酵母会被染成蓝色？为何死亡酵母会被染成蓝色？ 抽样检测法抽样检测法-在计数室上加盖盖玻片；在计数室上加盖盖玻片；用吸管吸取一滴酵母菌悬液用吸管吸取一滴酵

10、母菌悬液滴于盖玻片的边缘滴于盖玻片的边缘, ,使菌液缓缓渗入使菌液缓缓渗入, ,多余的菌液用吸水纸吸取；多余的菌液用吸水纸吸取；稍待片稍待片刻刻, ,使酵母菌全部沉降到血球计数室底部，显微镜下计数。使酵母菌全部沉降到血球计数室底部，显微镜下计数。 生长周期短、增殖速度快、世代间不重叠生长周期短、增殖速度快、世代间不重叠 死酵母的细胞膜失去了选择透过性，台盼蓝可以通过细胞膜死酵母的细胞膜失去了选择透过性，台盼蓝可以通过细胞膜1.1.种群在理想环境中，呈种群在理想环境中，呈“J”J”型曲线增长（图中曲线甲）；型曲线增长（图中曲线甲）；在有环境阻力的条件下，呈在有环境阻力的条件下，呈“S”S”型曲线增长（图中曲线乙）。型曲线增长（图中曲线乙）。下列有关种群增长曲线的叙述正确的是（下列有关种群增长曲线的叙述正确的是（ ）A.KA.K值是环境的最大容纳量，不受环境因素的影响值是环境的最大容纳量，不受环境因素的影