任务六细菌的生化试验

1、综合实训一综合实训一 大肠杆菌病的实验室诊断大肠杆菌病的实验室诊断任务六任务六 细菌的生化试验细菌的生化试验综合实训一 大肠杆菌病的实验室诊断-细菌的生化试验实验目标实验目标 利用糖发酵、MR、H2S实验对分离到的细菌进行生化鉴定。综合实训一 大肠杆菌病的实验室诊断-细菌的生化试验实验器材实验器材 恒温培养箱 大肠杆菌纯培养物 微量糖发酵管、MR培养基、三糖铁试管斜面 接种针、酒精灯、MR试剂、胶头滴管等。 综合实训一 大肠杆菌病的实验室诊断-细菌的生化试验细菌的生化鉴定细菌的生化鉴定-糖发酵实验糖发酵实验原理：有些细菌能分解糖产酸，从而使指示剂变有些细菌能分解糖产酸，从而使指示剂变色。色。培

2、养基：微量糖发酵管微量糖发酵管操作步骤：将细菌纯培养物无菌操作接种于糖发将细菌纯培养物无菌操作接种于糖发酵培养基中，于酵培养基中，于3737培养培养181824h24h。综合实训一 大肠杆菌病的实验室诊断-细菌的生化试验糖发酵试验结果判定方法糖发酵试验结果判定方法 实验结果及现象实验结果及现象：分解某糖产酸分解某糖产酸( () )：培：培养基变为黄色养基变为黄色分解某糖有的产酸产气分解某糖有的产酸产气()()：培养基变为黄色，：培养基变为黄色，且内有气泡且内有气泡不发酵某糖不发酵某糖( () )：培养：培养基仍为紫色。基仍为紫色。接种前接种后+ 综合实训一 大肠杆菌病的实验室诊断-细菌的生化试

3、验细菌的生化鉴定细菌的生化鉴定-MR实验实验原理原理：有些细菌能分解葡萄糖糖产生大量酸，从：有些细菌能分解葡萄糖糖产生大量酸，从而使指示剂变色，甲基红指示剂的变色范围是而使指示剂变色，甲基红指示剂的变色范围是PH4.4-6.2PH4.4-6.2。培养基培养基：葡萄糖蛋白胨水：葡萄糖蛋白胨水操作步骤操作步骤：取菌接种于葡萄糖蛋白胨水中，置：取菌接种于葡萄糖蛋白胨水中，置3737温箱培养温箱培养242448h48h。综合实训一 大肠杆菌病的实验室诊断-细菌的生化试验MR结果判定方法结果判定方法 结果观察：培养培养48h后，向后，向MR培养基内滴加甲基红试培养基内滴加甲基红试剂，立即观察结果剂，立即

4、观察结果 实验结果及现象：液体呈红色者为阳性液体呈红色者为阳性黄色者为阴性黄色者为阴性橙色者为可疑。橙色者为可疑。+接接种种前前综合实训一 大肠杆菌病的实验室诊断-细菌的生化试验细菌的生化鉴定细菌的生化鉴定-H2S实验实验原理：有些细菌能分解含硫有些细菌能分解含硫AAAA产生产生H2S， H2S可与可与培养基中的培养基中的FeFe2 2SO4SO4反应，生成黑色沉淀反应，生成黑色沉淀FeSFeS。培养基：三糖铁试管斜面三糖铁试管斜面操作步骤：用接种针取菌穿刺于含有硫酸亚铁的用接种针取菌穿刺于含有硫酸亚铁的琼脂培养基中，琼脂培养基中，3737培养培养1824h h综合实训一 大肠杆菌病的实验室诊断-细菌的生化试验H2S实验结果判定方法实验结果判定方法1. 培养基变黑色者为阳性2. 培养基未变黑色者为阴性+接接种种前前综合实训一 大肠杆菌病的实验室诊断-细菌的生化试验大肠杆菌的生化特性大肠杆菌的生化特性MR：+葡萄糖：葡萄糖： 乳糖：乳糖： 麦芽糖：麦芽糖： 甘露醇：甘露醇： 蔗糖：蔗糖：H2S：+综合实训一