临床微生物质谱鉴定技术及其应用初探

1、现代感染性疾病和临床微生物检测现状现代感染性疾病和临床微生物检测现状耐药耐药菌株菌株增多增多疑难疑难菌株菌株增多增多现代感现代感染性疾染性疾病新特病新特点点条件致条件致病菌增病菌增多多人员人员少、少、鉴定鉴定速度速度较慢较慢感染感染菌种菌种类增类增多多临床微生物当前现状病原病原生长时间生长时间报告时间报告时间需氧菌需氧菌24h3-4个工作日个工作日厌氧菌厌氧菌48h酵母菌酵母菌2-5天天5-7个工作日个工作日丝状真菌丝状真菌2-5天天 第一天 第二天 第三-四天常规微生物检验遇到的困惑：呼吸道、肠道标本的细菌种类繁多，常规的鉴定成本高或者操作麻烦， 容易漏掉或者忽视某些细菌。厌氧菌、弯曲菌、分

2、枝杆菌和真菌：培养的难点，鉴定的死角，技术上不好掌握或者成本高、时间长，难以实施。血培养的分级报告制度：存在很多变数，使得初次报告的结果可靠性 得不到临床的认可。（比如：直接革兰染色涂片，初步能估计细菌大比如：直接革兰染色涂片，初步能估计细菌大类，但是无法确切到种。比如：类，但是无法确切到种。比如：L型菌无法确定其革兰染色性。型菌无法确定其革兰染色性。）操作方便的，成本便宜的。不仅是实验室要求的，更是临床迫切需要的。将实验室人员从一些技术要求较低的、能由仪器完成的工作中解脱出来，提高标本处理效率，缩短报告时间。 临床微生物实验室自动化 MALDI-TOF革命性基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱

3、(MALDI-TOF MS)MALDI-TOF MS蛋白质指纹特征蛋白质指纹特征梅里埃梅里埃VITEK MS的数据库包含的数据库包含IVD1046种菌和种菌和RUO1500种菌的图谱。种菌的图谱。挑取部分菌落点样至靶板生成图谱搜库鉴定质谱质谱检测流程检测流程MALDI TOF检测加基质液准确度准确度时间（包括操作）时间（包括操作）成本成本MALDI-TOF技术技术90%20min20元常规方法80%2448 h50元Impact of Rapid Organism Identification via Matrix-Assisted Laser Desorption/IonizationTim

4、e-of-Flight Combined With Antimicrobial Stewardship Team Intervention in Adult Patients With Bacteremia and Candidemia届由质谱快速分析及快速药敏介入临床抗生素管理小组执行成人病患菌血症及霉菌血症的影响Clinical Infectious Diseases Clinical Infectious Diseases 2013;57(9):1237452013;57(9):123745快速鉴定质谱结合药敏报告减少鉴定时间并帮助临床执行最合适抗生素用药快速鉴定质谱结合药敏报告减少鉴定

5、时间并帮助临床执行最合适抗生素用药30 30 天内死亡率减少天内死亡率减少6.6%;ICU 6.6%;ICU 住院天数减少住院天数减少6.66.6天天; ;对症用药时间缩短对症用药时间缩短1010个小时个小时 鉴定鉴定/ /药敏最终报告时间提早药敏最终报告时间提早 2929小时小时; ; 84hr vs 55.9hr84hr vs 55.9hr有效用药时间提早十个小时有效用药时间提早十个小时: : 30.1hr vs 20.4 hr30.1hr vs 20.4 hr正确使用广效抗生素选择提早正确使用广效抗生素选择提早4343小时小时 ; ; 90.3hr vs 47.3 hr90.3hr vs 47.3 hr501501位临床病患中位临床病患中, , 快速报告族群快速报告族群3030天内死亡率减少天内死亡率减少6.6%6.6%脓毒症复发率减少脓毒症复发率减少3.9% ; 3.9% ; 5.9% vs 2.0%5.9% vs 2.0% 梅里埃细菌鉴定药敏分析仪梅里埃细菌鉴定药敏分析仪 给出两个鉴定选项（产单核、无害李斯特菌），给出两个鉴定选项（产单核、无害李斯特菌），VITEK 2 COMPACT 需要补充需要补充CAMP试验结果（试验结果（24小时孵育）小时孵育）质谱鉴定质谱鉴定 直接给出直接给出99.9%的鉴定结果的鉴定结果 产单核李斯特菌产单核李斯特菌MALDI-TOF M