王佩开题报告终稿

1、中华鳖中华鳖IGF系统基因的克隆及序列分析系统基因的克隆及序列分析姓姓 名：王名：王 佩佩 班班 级：级： 2011级水产级水产2班班指导老师：王晓清指导老师：王晓清 教授教授 010204研究背景研究方法预期结果目 录 / contents05研究的意义与目的03国内外研究进展12345培育高产、抗逆的中华鳖良种。肉味鲜美，营养丰富，蛋白质含量高，有活血化瘀，滋补强身的功效是一种滋补珍品。经济效益高，社会需求量大。养殖水平的提高，养殖规模增大。生长减慢、个体小型化、单产降低、病害易发等生产性状退化现象 。 研究 背景 1 1、中华鳖的研究现状、中华鳖的研究现状 目前，中华鳖的养殖方式主要有鱼

2、鳖混养、池塘单养和工厂化养殖，中华鳖自20世纪90年代开始在中国广泛养殖，截至2011年，中华鳖年产量达25万多吨。目前，有关中华鳖的研究主要集中在营养、养殖、病害、形态、遗传多样性、性别分化等方面。 国内外研究进展国内外研究进展 由于长期盲目的苗种培育，导致目前中华鳖种质资源混杂，中华鳖的生长性能下降，因此，有关中华鳖的生长性能的报道多数集中在饲料营养、药物等研究上，而从基因角度提高中华鳖的生长性能，从而改变中华鳖选育工作方法的研究较少。张志允采用微卫星分子标记技术对中华鳖黄河群体F3世代选育，发现F3世代保持较高的遗传多样性，显示具有较大的选育潜力。李林春通过转入“全鱼”生长激素基因，提高

3、了F0转基因中华鳖的生长速度。2、IGF系统基因在水产动物中的研究现状系统基因在水产动物中的研究现状 IGFs通过自分泌、旁分泌和内分泌的方式作用于靶器官,影响细胞的生长和分化,并抑制细胞凋亡，IGFs,尤其是IGFI，能够介导GH在体内完成生理功能。IGFI及IGF能诱导罗非鱼卵母细胞的成熟和颗粒细胞的增殖与分化。 此外，鱼类IGF还可能参与卵黄的生成,以供胚胎后期发育使用。 鱼类 IGF-的研究，自 1989 年银大麻哈鱼 IGF-cDNA 的首次克隆，人们已从罗非鱼、斑马鱼中分离了 IGF-基因。近几年的研究表明，IGF还能刺激或抑制一些激素的释放。有报道IGF-I在体外会抑制杂交条纹鲈

4、鱼和大比目鱼垂体释放GH。同时，研究发现，和抑制GH释放不同，IGF-和IGF-会刺激罗非鱼垂体释放促乳素(prolactin，PRL)，但并不改变PRL mRNA含量，说明IGF是在转录后水平调节PRL的。3 3、候选基因的研究、候选基因的研究 相对传统育种方法，基因候选法在动物育种工作中的应用有多态位点选择简单、统计检验效率高、应用范围广、总费用低，易于实施、操作简单等优点。目前，在牛、羊、猪等家禽育种工作中开始应用。有学者通过对IGF-I、IGF-及IGF-R这三个候选基因的多态性进行研究,并分析了IGF-I的微卫星多态可能对山羊的产羔数的影响。 IGF-I作为机体生长、发育和代谢的一个

5、重要调控因子，同时也是生长激素(GH)启动生长活性的主要介导者。其对动物胚胎期的发育及其出生后的生长都起着重要作用。国外学者研究发现，IGF-基因是影响肌肉发育表达的主要候选基因，IGF-与机体的生长发育相关，IGF-的缺乏或者过度表达都会导致机体发生相应的变化。研究的意义研究的意义胰岛素样生长因子（IGF）:IGF-I、IGF-、IGF-IR、IGF-R、IGFBPs。IGFs在动物的胚胎期和生后的生长发育期都介导了GH激素大部分的促进生长的生物学功能,调节动物机体内糖类代谢、脂肪代谢、蛋白合成、肝脏功能、线性生长等功能。IGF-I和IGF-的分泌受到神经内分泌激素的调控,主要于动物机体的肝

6、脏和局部各个组织以内分泌、自分泌及旁分泌等作用形式分泌，分泌的IGFs进入血液循环系统和细胞内细胞液系统,依赖于IGFBPs家族基因的运载而提高IGFs的半衰期以及组织的偏向性从而促进组织细胞的分化与增殖。此外，IGF对肌肉、心血管系统、脑、生殖系统、脂肪组织、免疫系统、肝、肾、肾上腺、消化系统、肿瘤细胞生长都有重要作用。 目的 IGF系统基因作为调节生长的一个重要基因家族,在调节生长过程中的作用机制是研究的重点和热点。本实验研究以中华鳖为实验对象，探究IGF系统基因对中华鳖生长性状的影响，寻找可以用于辅助选择的可能性标记，为中华鳖的分子辅助育种提供理论依据。 研究目的 研究 活体解剖得到肌肉、肝脏等组织，液氮速冻，置于-80冰箱保存备用。NCBI查找近缘物种基因序列设计简并引物，扩增获得基因部分片段序列，设计引物进行3及5端扩增，PCR产物进行电泳检测、测序、生物信息学分析。基因序列分析测序PCR引物设计反转录提取RNA实验步骤实验步骤实验预期结果实验预期结果克隆中华