离体蛙心灌注及药物的影响

1、离体蛙心灌注及药物的影响离体蛙心灌注及药物的影响相关知识原理实验步骤 实验后处理 注意事项 实验相关知识实验相关知识 1.维持心脏正常收缩的条件维持心脏正常收缩的条件3.多种因素对蛙心活动的影响多种因素对蛙心活动的影响 2.离体蛙心的特性离体蛙心的特性 正正 常常蛙蛙 心心舒舒 缩缩正常结构正常结构与与 功功 能能适适 宜宜 的的体液环境体液环境适当的适当的负负 荷荷正常的正常的神经支配神经支配Na+ K+ H+ Ca2+ 温度温度PH？离体离体林格液林格液改改 变变正正 常常蛙蛙 心舒心舒 缩缩正常结构正常结构与与 功功 能能适适 宜宜 的体液的体液环境环境适当适当的负的负 荷荷正常的正常的

2、神经支配神经支配Na+ K+ H+ Ca2+ 温度温度PH？去甲肾上腺素（去甲肾上腺素（NA)NA)乙酰胆碱乙酰胆碱(Ach)(Ach)阿托品阿托品 毒毛旋花子甙毒毛旋花子甙K K离体离体林格液林格液改改 变变【相关知识原理】n离体蛙心正常收缩的条件改变理改变理化环境化环境u蛙心的正常解剖结构 心脏背面观 心脏腹面观 u各处理因素对蛙心的作用及原理影响l无机离子：0.65NaCl；2CaCl2；1KCll药物：NA；Ach；阿托品；毒毛旋花子甙Kl温度：低温林格液l酸、碱：NaHCO3 ；乳酸【实验步骤】【实验后处理【实验后处理】n打印结果打印结果n写实验报告写实验报告【注意事项【注意事项】n

3、 勿伤静脉窦，插管时注意方向和手法勿伤静脉窦，插管时注意方向和手法n保持心脏湿润保持心脏湿润n保持液面高度一致保持液面高度一致n滴管勿混用，勿碰蛙心插管，加药勿过量滴管勿混用，勿碰蛙心插管，加药勿过量n做好标记，出现作用立即换新鲜林格液做好标记，出现作用立即换新鲜林格液2、连接实验装置、连接实验装置右主动脉弓右主动脉弓蛙心结构图蛙心结构图腹面腹面左主动脉弓左主动脉弓左心房左心房右心房右心房动脉圆锥动脉圆锥心室心室背面背面心室心室左心房左心房房室沟房室沟窦房沟窦房沟静脉窦静脉窦连接处连接处后腔静脉后腔静脉右心房右心房蛙心结构图蛙心结构图1243穿线、插管穿线、插管离体蛙心实验装置离体蛙心实验装置

4、离体蛙心实验装置离体蛙心实验装置仪器连接仪器连接注意事项：注意事项：换能器换能器插管液面高度插管液面高度 烧杯烧杯调零调零4. 实验观察、处理和记录实验观察、处理和记录1 1）观察和记录正常蛙心收缩曲线）观察和记录正常蛙心收缩曲线 (幅度，疏密度，规律性，基线)1:10000NA（12滴）滴）1:100000Ach（1滴）滴）1:2000阿托品阿托品（1滴）滴） +1:100000Ach （1滴）滴）0.025%毒毛幻花苷毒毛幻花苷K溶液溶液5）观察温度的影响）观察温度的影响换入等量换入等量4的冷林格液的冷林格液6）观察酸碱的影响）观察酸碱的影响 12滴滴 2.5% NaHCO3 12滴滴 3

5、% 乳酸，乳酸，出现变化后，再加出现变化后，再加1-2滴滴 2.5% NaHCO32)2)分析各处理因素对蛙心收缩曲线影响分析各处理因素对蛙心收缩曲线影响 及其原理，写出实验报告。及其原理，写出实验报告。 1) 1)截取各种处理因素具有代表性的蛙心截取各种处理因素具有代表性的蛙心 收缩曲线，制成单页图打印出来。收缩曲线，制成单页图打印出来。离体蛙心灌注及药物的影响实验结果离体蛙心灌注及药物的影响实验结果1.等量等量 0.65%NaCl, 收缩力减弱，心率加快收缩力减弱，心率加快 等渗溶液，其内环境仅有等渗溶液，其内环境仅有Na+,Cl-，缺乏心肌收，缺乏心肌收缩所必需的缩所必需的Ca2+ ,

6、K+,尤其是尤其是Ca2+的缺乏，的缺乏，Ca2+内流减少，内流减少，导致心肌收缩力降低。导致心肌收缩力降低。 2. 2% CaCl2，收缩力增加，心率减慢，收缩力增加，心率减慢 3. 1% KCl，收缩力减弱，心率减慢，收缩力减弱，心率减慢4. NA，收缩力增加，心率加快，收缩力增加，心率加快5. Ach，收缩力减弱，心率减慢，收缩力减弱，心率减慢结果分析结果分析 胞外胞外K+浓度升高，浓度升高，Ca2+内流减少（竞争）内流减少（竞争） 胞外胞外K+浓度升高，静息电位绝对值减少，低浓度升高，静息电位绝对值减少，低于于-55-60mV时，快时，快Na通透失活，兴奋性下通透失活，兴奋性下降，心率

7、减慢，甚至停止在舒张期降，心率减慢，甚至停止在舒张期NA与心肌与心肌受体结合后受体结合后，激活，激活AC，Ca2+通道通道开放增加，正性变力、变时、变传导开放增加，正性变力、变时、变传导 Ach与心肌细胞膜上与心肌细胞膜上M-R结合，抑制钙通道，同结合，抑制钙通道，同时激活时激活GK蛋白，蛋白， K+外流增加，负性变力、变时、外流增加，负性变力、变时、变传导变传导 6.阿托品阿托品+Ach，无明显变化，无明显变化 阿托品为阿托品为M胆碱受体拮抗剂，但离体蛙心无神胆碱受体拮抗剂，但离体蛙心无神经支配，无经支配，无ACh释放，加入阿托品后无明显作用；释放，加入阿托品后无明显作用；再加入再加入Ach

8、，由于阿托品已将，由于阿托品已将M胆碱受体阻胆碱受体阻断，故断，故Ach无作用。无作用。 7.7.毒毒K K，收缩力增加收缩力增加 抑制抑制Na+-K+ATP酶使细胞内酶使细胞内Na+量升高，量升高，K+下下降，胞内降，胞内Na+升高，可促进细胞内外升高，可促进细胞内外Na+-Ca2+交换交换,使细胞内使细胞内Ca2+增多，从而加强心肌细胞收缩力。增多，从而加强心肌细胞收缩力。（毒（毒K的作用有赖于胞外的作用有赖于胞外 Ca2+的存在）的存在） 8. 8. 4冷林格液，收缩力减弱，心率减慢冷林格液，收缩力减弱，心率减慢 温度过低时，肌凝蛋白头部温度过低时，肌凝蛋白头部ATP酶活性降低酶活性酶活

9、性降低酶活性降低，代谢水平降低，各离子通道蛋白活性降低，降低，代谢水平降低，各离子通道蛋白活性降低，心脏收缩活动减弱，心率减慢。心脏收缩活动减弱，心率减慢。 图图3 0.65%NaCl3 0.65%NaCl对蛙心收缩活动的影响对蛙心收缩活动的影响 图图4 2%CaCl4 2%CaCl2 2对蛙心收缩活动对蛙心收缩活动的影响的影响图图5 1%KCl5 1%KCl对蛙心收缩活动的影响对蛙心收缩活动的影响 图图6 6 NANA对蛙心收缩活动的影对蛙心收缩活动的影响响 图图7 Ach7 Ach对蛙心收缩活动的影响对蛙心收缩活动的影响 图图8 8 先加阿托品再加先加阿托品再加AchAch对蛙心收缩活对蛙心收缩活动的影响动的影响 图图9 9 强心甙对蛙心收缩活动的影响强心甙对