第四章-定量分析

1、第四章第四章 药物的含量测定方法与验证药物的含量测定方法与验证主要内容主要内容 药品分析方法的验证药品分析方法的验证 定量分析方法的分类与特点定量分析方法的分类与特点23 3 定量分析样品的前处理方法定量分析样品的前处理方法3 1定量分析？定量分析？药品定量分析定量分析是依据统计数据，建立数学模型，并计算出分析对象的各项指标及其数值的一种方法。定性分析与定量分析是统一的，相互补充的；定性分析是定量分析的基本前提，没有定性的定量是一种盲目的、毫无价值的定量；定量分析使之定性更加科学、准确，它可以促使定性分析得出广泛而深入的结论。药物含量测定药物含量测定u基于化学或物理学原理的含量测定u基于生物学

2、原理的效价测定药物的含量系指所含主成分的量，是评价药物的重要指标第一节、定量分析方法的分类与特点第一节、定量分析方法的分类与特点含量测定项采用的定量分析方法含量测定项采用的定量分析方法u 容量分析法容量分析法u 光谱分析法光谱分析法u 色谱分析法色谱分析法 基本原理：基本原理：将已知浓度的滴定液由滴定管加到待测药物的溶液中，直到所加滴定液与被测药物按化学计量反应完全为止，然后根据滴定液的浓度和消耗的体积可以计算出被测物的含量。 化学计量关系化学计量关系特点：特点：所用仪器价廉、易得；操作简便、快速、测定结果准确（相对标所用仪器价廉、易得；操作简便、快速、测定结果准确（相对标准差一般应不大于准差

3、一般应不大于0.2)；专属性较差，适用于含量较高的样品专属性较差，适用于含量较高的样品指示剂指示反应化学计量点的到达指示剂指示反应化学计量点的到达一、容量分析法一、容量分析法( (滴定法滴定法) )容量分析的相关计算 滴定度指每1mL规定浓度的滴定液所相当的被测药物的质量滴定度（T）的计算 (mg/mL)：P144-145 aA+bBcC+dD T(mg/mL) = m(a/b) MWA= T VB m-滴定液的摩尔浓度（mol/L）；a-被测药物的摩尔数； b-滴定液的摩尔数； M-被测药物的摩尔毫摩尔质量（mg/mmol）；含量计算含量计算（1）直接滴定法 V x T含量（%）= x 10

4、0% W实际滴定度药典给出的是规定浓度下，实际滴定度要乘以校正因子F = 实际摩尔浓度/规定摩尔浓度 V x T x F含量（%）= x 100% W间接滴定法u 生成物滴定法药物+AB （定量反应）u 剩余量滴定法（回滴定法）先加入过量的滴定液A，使其与药物定量反应，但反应完全后，再用另一滴定液来回滴反应后剩余的滴定液A药物B滴定剂例：P146 (VBo- VBs )x TA x FB含量（%）= x 100% W实例溴量法实例溴量法凡取代基中含有双键的巴比妥类药物，其不饱和键可与溴定量地发生加成反应，故可采用溴量法进行测定。如司可巴比妥钠的测定原理为： 精密量取维生素C注射液4mL（相当于

5、维生素C 0.2g），加水15mL与丙酮2mL，摇匀，放置5分钟，加稀醋酸4mL与淀粉指示液1mL，用碘滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液显蓝色，并持续30秒钟不退。已知：注射液规格2mL:0.1g，消耗0.05mol/L碘滴定液（F=1.005）22.45mL，维生素C的分子量为176.12，反应摩尔比为1:1，问：（1）每1mL碘滴定液(0.05mol/L)相当于多少mg的维生素C？（2）求本品相当于标示量的百分含量？课堂练习课堂练习12022-4-1212维生素维生素C C1摩尔维生素摩尔维生素C与与1摩尔碘相当摩尔碘相当T0.05176.121/1=8.806mg/ml标示量标示量

6、%=TFV/W标示量标示量100% 8.80622.451.005= 0.21000 100% =99.34%OOOHOHOHHCH2OHOOOOOHHCH2OHI2H+CC+2HI课堂练习课堂练习2烟酸片的含量测定：取本品20片，精密称定重量为7.1680g，研细，取片粉0.3729g，加新沸放冷的水50mL，加热使溶解，放冷，用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）滴定，消耗25.20mL，每1mL NaOH滴定液（0.1mol/L）相当于12.31mg烟酸，已知烟酸片规格0.3g，NaOH滴定液（0.1mol/L）的F=1.005，计算每片含烟酸的量。光谱光谱记录由能级跃迁所产生的辐射能随波

7、长的变化所得的图谱记录由能级跃迁所产生的辐射能随波长的变化所得的图谱光谱分析法光谱分析法利用物质的光谱进行利用物质的光谱进行定性定量定性定量和结构分析的方法。和结构分析的方法。分光光度法分光光度法测定被测物质在光谱的测定被测物质在光谱的特定波长特定波长处或处或一定波长范围一定波长范围内的内的吸光度吸光度或或发光强度发光强度，对该物质进行定性或定量分析的方法。，对该物质进行定性或定量分析的方法。中国药典收载的光谱分析法包括中国药典收载的光谱分析法包括紫外可见分光光度法（紫外可见分光光度法（UV-VISUV-VIS）红外分光光度法红外分光光度法(IR)(IR)原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法(

8、AAS)(AAS)荧光分析法荧光分析法(FL)(FL)光焰光度法光焰光度法(FP)(FP)二、光谱光谱分析法二、光谱光谱分析法紫外分光光度法（UV-VIS）基于物质分子对紫外光谱区（200-400 nm）和可见光区（400-760 nm）的单色光辐射的吸收特性建立的光谱分析法。朗伯比耳定律：单色光单色光辐射穿过被测物质溶液时，在一定的在一定的浓度范围浓度范围内被该物质吸收光的量与该物质的浓度和液层的厚度（光程）成正比。正比。吸光度A一般在0.30.7（误差最小）浓度点n5，用浓度c对A作线性回归处理，得一直线方程，r应大于0.999(n5)，方程的截距应近于零。A为吸光度T为透光率C为吸光物质

9、的浓度 L为吸收层厚度 A=ECLUVVIS的特点的特点 (1) 灵敏度高（10-410-7 g/mL)(2) 准确度高 (RSD, 2 5%)(3) 仪器价格低廉、操作简单、易于普及(4) 应用广泛注意事项注意事项仪器校正波长，准确度溶剂要求光谱纯（甲醇、乙醇、扣除空白）含量测定方法含量测定方法RRCAAxCx对照品比较法原料药百分含量%100%WDCx）含量（D：为稀释体积：为稀释体积固体制剂含量%100%BWWDCx）标示量（液体制剂含量%100%BVVDCx）标示量（100)/(%11cmEAxmlgCx吸收系数法1 含量100 WA D100% E%cm%11)100/(cmEAxm

10、lgCx示例4-6定量计算复习 对供对供对供对供对供对供AAccccAAlcElcEAA%1cm1%1cm1对照法%mVnAAcs 对对供供对对百分含量百分含量固体制剂-1. 容量分析法 （1）直接滴定法 %100%标示量平均片重标示量smTVF（2）剩余滴定法 %100%0标示量平均片重）（标示量smFVVT2. 紫外分光光度法（1）吸收系数法 %100100%11标示量平均片重标示量scmmVnlEA（2）对照法 %100%标示量平均片重标示量对供对smVnAAc%72.99%10010003630. 01 . 01010. 000.2092.17%非那西丁习题习题1. 维生素B12注射液

11、规格为1mL：0.1mg，含量测定方法如下：精密量取本品7.5mL，置25mL量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，混匀，置1cm石英池中，以蒸馏水为空白，在3611nm波长处测得吸收度为0.593，以E1%1cm 为207，计算得维生素B12相当于标示量的百分含量2 . 烟酸片的含量测定：取本品20片，精密称定重量为7.1680g，研细，取片粉0.3729g，加新沸放冷的水50mL，加热使溶解，放冷，用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）滴定，消耗25.20mL，每1mL NaOH滴定液（0.1mol/L）相当于12.31mg烟酸，已知烟酸片规格0.3g，NaOH滴定液（0.1mol/L）的F=1.00

12、5，计算每片含烟酸的量。3. HPLC测定复方SMZ片中SMZ含量，以SG为内标，测得标准液中：SMZ峰高14.90cm，浓度8.0mg/mL，SG峰高13.80cm，浓度4.0mg/mL。样品液中SMZ峰高11.92cm，SG峰高16.20cm，浓度4.0mg/mL。 （进样量均为5l）,样品液中SMZ的浓度为：课堂习题课堂习题非那西丁含量测定：精密称取本品0.3630g加稀盐酸回流1小时后，放冷，用亚硝酸钠液（0.1010mol/L）滴定，用去20.00mL。每1ml亚硝酸钠液（0.1mol/L）相当于17.92mg的C10H13O2N。计算非那西丁的含量为（ ）A. 95.55% B.

13、96.55% C. 97.55% D. 98.55% E. 99.72% 三、色谱分析法三、色谱分析法色谱分析法是基于 混合 物 各组 分在体系中 两相 的物 理化学性能差异（如吸附、分配差异等）而进行分离和分析的方法u 分离原理：吸附色谱法、分配色谱法、离子交换色谱法与排阻色谱法u 分离方法：纸色谱、薄层色谱法、柱色谱、纸色谱、气相色谱法、高效液相色谱法。色谱法分类高效液相色谱法 特点：高压、高效、高速特点：高压、高效、高速 高沸点、热不稳定有机及生化试样的高效分离分析方法。高沸点、热不稳定有机及生化试样的高效分离分析方法。1. 仪器要求：高效液相色谱仪仪器要求：高效液相色谱仪Agilent

14、 HP11002. 对色谱柱要求对色谱柱要求u高效液相色谱：硅胶和化学键合硅胶（高效液相色谱：硅胶和化学键合硅胶（C18C18，CNCN，苯基），苯基）u离子色谱：离子交换填料离子色谱：离子交换填料u分子排阻色谱：凝胶或高分子多孔小球分子排阻色谱：凝胶或高分子多孔小球色谱柱是HPLC的心脏部件，它包括柱管与固定相两部分。3. 对检测器要求对检测器要求u紫外检测器紫外检测器u荧光检测器荧光检测器u示差检测器示差检测器u蒸发光散射检测器蒸发光散射检测器u电化学检测器电化学检测器u质谱检测器质谱检测器4. 流动相要求流动相要求u紫外检测器：溶剂无干扰紫外检测器：溶剂无干扰u蒸发光散射检测器、质谱检测

15、器：不含不挥发性盐蒸发光散射检测器、质谱检测器：不含不挥发性盐uC18：水、甲醇、乙腈、缓冲液：水、甲醇、乙腈、缓冲液COOHCOO-COO-COOHCOOHCOOHCOOHCOOHCOO-COO-COO-COO-COOHCOO-Figure Interaction between REE-species and the carboxylic groupsof the ion exchangerREE3+REE3+nHmLj-REE(HmL)n(3-nj)+Mobile phase flown离子色谱离子色谱 (Ion Chromatography)利用溶液中不同离子与离子交换剂间的交换能力的

16、不同而进行分离的方法。利用多孔性物质对不同大小的分子的排阻作用进行分离的方利用多孔性物质对不同大小的分子的排阻作用进行分离的方法。法。固定相为化学情性多孔物质固定相为化学情性多孔物质凝胶，它类似于分子筛，但孔径比分子筛大。凝凝胶，它类似于分子筛，但孔径比分子筛大。凝胶内具有一定大小的孔穴，体积大的分子不能渗透到孔穴中去而被排阻，较早地胶内具有一定大小的孔穴，体积大的分子不能渗透到孔穴中去而被排阻，较早地被淋洗出来；中等体积的分子部分渗透；小分子可完全渗透入内，最后洗出色谱被淋洗出来；中等体积的分子部分渗透；小分子可完全渗透入内，最后洗出色谱柱。这样，样品分子基本上按其分子大小，排阻先后由柱中流

17、出。柱。这样，样品分子基本上按其分子大小，排阻先后由柱中流出。M.W.tR空间排阻色谱空间排阻色谱(Size Exclusion Chromatography)5. 系统适用性试验系统适用性试验u理论塔板数（N）：色谱柱分离效能u分离度（R）：Rs1.5u重复性：RSD10%，加入少量多碳化合物还原剂（如蔗糖、淀，加入少量多碳化合物还原剂（如蔗糖、淀粉）以利于氮转变为氨粉）以利于氮转变为氨 通过高温灼烧的方式实现对有机结构的破坏。适用通过高温灼烧的方式实现对有机结构的破坏。适用 于于含卤素、硫、磷、硒及砷盐等有机合成药物的前处理。含卤素、硫、磷、硒及砷盐等有机合成药物的前处理。 高温炽灼法高温

18、炽灼法 氧瓶燃烧法氧瓶燃烧法 干法破坏干法破坏 高温炽灼法高温炽灼法将含待测元素的有机药物经高温将含待测元素的有机药物经高温灼烧灰化，使有机结构分解而待测元素转化为无机灼烧灰化，使有机结构分解而待测元素转化为无机元素或可溶性无机盐。元素或可溶性无机盐。适用对象：含卤素类药物鉴别、含磷药物的定量测适用对象：含卤素类药物鉴别、含磷药物的定量测定和药物中砷盐的检查。定和药物中砷盐的检查。加入无水碳酸钠、硝酸镁、氢氧化钙、氧化加入无水碳酸钠、硝酸镁、氢氧化钙、氧化锌等辅助灰化。锌等辅助灰化。u含碘药物鉴别含碘药物鉴别u含氟、氯、溴等元素药物的鉴别含氟、氯、溴等元素药物的鉴别u含磷药物的定量测定含磷药物

19、的定量测定u砷盐的检查砷盐的检查 氧瓶燃烧法氧瓶燃烧法将含待测元素的有机药物置于充满氧气的将含待测元素的有机药物置于充满氧气的密闭的燃烧瓶中充分燃烧，使有机结构彻底分解为二氧化碳和密闭的燃烧瓶中充分燃烧，使有机结构彻底分解为二氧化碳和水，而待测元素转化为不同价态的氧化物（或无氧酸），被吸水，而待测元素转化为不同价态的氧化物（或无氧酸），被吸收到适当吸收液中，再采用适宜的方法分析。收到适当吸收液中，再采用适宜的方法分析。特点：特点：设备简单、破坏完全，尤其适用于微量样品的分析设备简单、破坏完全，尤其适用于微量样品的分析适用对象适用对象：含卤素、硫、磷等元素的鉴别、限度检查和含量：含卤素、硫、磷等

20、元素的鉴别、限度检查和含量测定。测定。NaClHClOClCNaOH2 溶液点燃 （ 2） 仪器与材料仪器与材料 仪器装置 燃烧瓶为500、1000或2000ml无色、磨口、厚壁、硬质玻璃锥型瓶；瓶塞空心，底部熔封铂丝一根，下端呈螺旋状或网状称样用材料及称样（样品制备）:A. 固体样品无灰滤纸；B. 液体样品 纸袋；C. 软膏类样品：将适量样品置不含被测成分的蜡油纸中包裹严密，外层再用无灰滤纸包裹吸收液吸收液：吸收液： 作用将样品经燃烧分解所产生的各种价态的卤素、硫、氮、作用将样品经燃烧分解所产生的各种价态的卤素、硫、氮、硒等，定量地吸收并转变为一定的便于测定的价态；硒等，定量地吸收并转变为一

21、定的便于测定的价态；A. 吸收液的选择吸收液的选择氟氟 水水 （茜素氟蓝比色法）（茜素氟蓝比色法） 氯氯 氯化氢水中溶解度低，氯化氢水中溶解度低，NaOH溶液溶液溴溴 H2O-NaOH NaOH-二氧化硫（还原剂）饱和溶液二氧化硫（还原剂）饱和溶液碘碘 NaOH水水-二氧化硫饱和溶液二氧化硫饱和溶液硫硫 浓浓H2O2 与水的混合液与水的混合液 （SO3SO42-) 硒硒 硝酸溶液硝酸溶液（SeO3H2SO4) （3）操作方法）操作方法燃烧瓶燃烧前的准备燃烧瓶燃烧前的准备 用洗液洗净后，按各药品项下的规定加入吸收液，将瓶用洗液洗净后，按各药品项下的规定加入吸收液，将瓶口用水湿润，小心急速地通入氧

22、气口用水湿润，小心急速地通入氧气1min1min，立即用表面皿覆盖瓶，立即用表面皿覆盖瓶口。口。样品的准备样品的准备 取样品适量，精密称定后按规定方法包裹，固定于铂丝取样品适量，精密称定后按规定方法包裹，固定于铂丝下端的网内或螺旋处。下端的网内或螺旋处。样品的燃烧样品的燃烧点燃包有供试品的滤纸尾部，迅速放入燃烧瓶中，按紧瓶塞，点燃包有供试品的滤纸尾部，迅速放入燃烧瓶中，按紧瓶塞，加水少量封闭瓶口，俟燃烧完毕加水少量封闭瓶口，俟燃烧完毕（应无黑色碎片），（应无黑色碎片），充分振摇，充分振摇，使生成的烟雾完全吸入吸收液中，放置使生成的烟雾完全吸入吸收液中，放置15min，用水少量冲洗，用水少量冲洗

23、瓶塞及铂丝，合并洗液及吸收液，同法另做空白试验。然后按瓶塞及铂丝，合并洗液及吸收液，同法另做空白试验。然后按各药品项下规定的方法进行鉴别、检查或含量测定。各药品项下规定的方法进行鉴别、检查或含量测定。 待分解样品量 燃烧瓶的体积 35mg（微量分析） 150250ml 2030mg（半微量分析） 300500ml 5060mg 1000ml 0.60.7g或更多 2000ml或特殊结构的燃烧瓶例 碘苯酯的含量测定原理 碘苯酯系有机碘化物，用氧瓶燃烧分解，转变为碘化物，继而氧化为游离的碘，并被定量地吸收于吸收液中，和氢氧化钠反应，生成碘化物与碘酸盐，加入溴-醋酸溶液，使全部转变为碘酸盐，过量的溴

24、以甲酸及通空气去除。加入碘化钾，使与碘酸盐反应析出游离碘，用硫代硫酸钠液滴定，碘与淀粉结合所显的蓝色消失即为终点。碘苯酯I2 (HIO3, HIO,HI) 取本品约取本品约20mg，精密称定，照氧瓶燃烧法进行有机破坏，精密称定，照氧瓶燃烧法进行有机破坏，用氢氧化钠试液用氢氧化钠试液2ml与水与水l0ml为吸收液，待吸收完全后，加溴为吸收液，待吸收完全后，加溴醋酸溶液醋酸溶液(取醋酸钾取醋酸钾10g，加冰醋酸适量使溶解，加溴，加冰醋酸适量使溶解，加溴0.4ml，再，再加冰醋酸使成加冰醋酸使成1000m1)l0ml，密塞，振摇，放置数分钟，加甲，密塞，振摇，放置数分钟，加甲酸约酸约lml，用水洗涤

25、瓶口，并通入空气流约，用水洗涤瓶口，并通入空气流约35min以除去剩余以除去剩余的溴蒸气，加碘化钾的溴蒸气，加碘化钾2g，密塞，摇匀，用硫代硫酸钠滴定液，密塞，摇匀，用硫代硫酸钠滴定液(0.02mol/L)滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。每每lml的硫代硫酸的硫代硫酸钠滴定液钠滴定液(0.02mol/L)相当于相当于1.388mg的的C19H29IO2。 测定法滴定度的计算滴定度的计算2mol碘苯酯碘苯酯1molI21molI21molNaIO+1molNaI1m

26、olNaIO1/3molNaIO3+2/3molNaI321molNaI+Br2321molNaIO3即即2mol碘苯酯碘苯酯2molNaIO32mol NaIO3+10molI 6molI2 即即2mol碘苯酯碘苯酯6molI212molNa2S2O3反应摩尔比为反应摩尔比为1616mlmgncMT/388.1634.41602.0第三节 药品质量标准分析方法验证一、目的一、目的 证明所采用的分析方法适合于相应的检测要求，方法验证过程和结果均应记载在药品标准起草和修订说明中。 二、用途（一）药品质量标准起草时，分析方法需经验证。（二）药物合成方法变更、制剂的组分变更、原分析方法进行修订时，分

27、析方法需经验证。三、需验证的分析项目三、需验证的分析项目u 鉴别试验；鉴别试验；u 杂质定量或限度检查；杂质定量或限度检查；u 原料或制剂中有效成分含量测定；原料或制剂中有效成分含量测定；u 制剂中其它成分（降解产物、防腐剂等）的测定；制剂中其它成分（降解产物、防腐剂等）的测定；u 溶出度、释放度等功能检查中的溶出量等的测试方法。溶出度、释放度等功能检查中的溶出量等的测试方法。 四、验证内容 1. 准确度准确度 2. 精密度精密度 3. 专属性专属性 4. 检测限检测限 5. 定量限定量限 6. 标准曲线标准曲线 7. 线性范围线性范围 8. 耐用性耐用性重复性重复性中间精密度中间精密度重现性

28、重现性 准确度是指用该方法测定的结果与真实值或准确度是指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，用百分回收率表示。参考值接近的程度，用百分回收率表示。 测定回收率R（recovery）的具体方法可采用“回收试验法”和“加样回收试验法”。 （一）（一） 准确度（准确度（accuracy）空白+已知量A的对照品（或标准品）测定，测定值为M%100AMR回收试验回收试验 已准确测定药物含量P的真实样品+已知量A的对照品（或标准品）测定，测定值为M。%100APMR加样回收试验加样回收试验 加入已知纯度对照品的量为原制剂中含加入已知纯度对照品的量为原制剂中含量的量的80%、100%、120%,每

29、一浓度测每一浓度测3 3份份. .规定的范围内，至少用9次测定结果评价，如制备三个不同浓度样品各测三次。数据要求UV、HPLC、GC法法 98.0 102.0%容量法容量法 99.7 100.3%体内药物分析体内药物分析 85.0 115.0%RSD 2%杂质定量测定的准确度 可向原料药或制剂中加入已知量杂质进行测定。如果不能得到杂质或降解产物，可用本法测定结果与另一成熟的方法进行比较。 是指在规定条件下，同一个均匀样品，经多次取样是指在规定条件下，同一个均匀样品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。用偏差（测定所得结果之间的接近程度。用偏差（d d）、标准偏）、标准偏差差( (SDSD)

30、)、相对标准偏差、相对标准偏差( (RSDRSD) )（变异系数，（变异系数，CVCV）表示。）表示。 （二）精密度（二）精密度（precision） 精密度精密度偏差（d）：测量值与平均值之差xxdi标准（偏）差（SD或S）12nxxSDi相对标准（偏）差（RSD），也称变异系数（CV）%100 xSDRSD 重复性重复性 在相同条件下，由同一个分析人员测定所得结果的精密度在相同条件下，由同一个分析人员测定所得结果的精密度；在规定的范围内，至少用在规定的范围内，至少用9 9次测定结果评价，如制备三个不同次测定结果评价，如制备三个不同浓度样品各测三次或把被测物浓度当作浓度样品各测三次或把被测物

31、浓度当作100%100%，至少测，至少测6 6次进行次进行评价。评价。2. 2. 中间精密度中间精密度 同一实验室，不同时间由不同分析人员用不同设备所得结果的同一实验室，不同时间由不同分析人员用不同设备所得结果的精密度。精密度。考察随机变动因素的影响。变动因素为不同日期、不同考察随机变动因素的影响。变动因素为不同日期、不同分析人员、不同设备分析人员、不同设备验证内容验证内容3. 3. 重现性重现性 不同实验室，不同分析人员测定结果的精密度。不同实验室，不同分析人员测定结果的精密度。当分析方法当分析方法将被法定标准采用时，应进行重现性试验。如建立药典分析方法将被法定标准采用时，应进行重现性试验。

32、如建立药典分析方法时通过协同检验得出重现性结果，协同检验的过程、重现性结果时通过协同检验得出重现性结果，协同检验的过程、重现性结果均应记载在起草说明中。均应记载在起草说明中。 RSD允许值允许值容量分析容量分析 0.2%重量分析法重量分析法 0.5%氧瓶燃烧法、凯氏定氮法氧瓶燃烧法、凯氏定氮法 0.5%紫外、原子吸收分析法紫外、原子吸收分析法 1%HPLC、GC、 TLC分析法分析法 2% 指有其他成分（杂质、降解物、辅料等）可能存在情况下采指有其他成分（杂质、降解物、辅料等）可能存在情况下采用的方法能准确测定出被测物的特性，能反映该方法在有共存物用的方法能准确测定出被测物的特性，能反映该方法

33、在有共存物时对供试物准确而专属的测定能力。是指该法用于复杂样品分析时对供试物准确而专属的测定能力。是指该法用于复杂样品分析时相互干扰程度的度量。时相互干扰程度的度量。 （三）专属性（三）专属性（specificity） 专属性不够,应采用多个方法予以补充1. 鉴别反应鉴别反应不含被测成分的样品不含被测成分的样品,以及结构相似或组分中的有关化合物以及结构相似或组分中的有关化合物,均呈负反应均呈负反应2. 含量测定和杂质测定含量测定和杂质测定l注明成分在谱图中的位置注明成分在谱图中的位置l杂质是否干扰含量测定杂质是否干扰含量测定(是否和主峰分离是否和主峰分离)l降解试样降解试样l峰纯度检查峰纯度检

34、查(PDA)l两法比较测定结果两法比较测定结果 检测限系指试样中被测物能被检测出的最低量。是限度检查效能指标，反应方法是否灵敏,无需定量测定。常用%、ppm、ppb表示。 （四）（四） 检测限（检测限（limit of detection， LOD） 1非仪器分析目视法 用已知浓度的被测物，试验出能被可靠地检测出的最低浓度或量。 5 g/mL 10 g/mL 20 g/mL 50 g/mL 100 g/mL 2 2信噪比法信噪比法 用于能显示基线噪音的分析方法（仪器分析方法），是把用于能显示基线噪音的分析方法（仪器分析方法），是把已知低浓度试样测出的信号与空白样品测出的信号进行比较，已知低浓度

35、试样测出的信号与空白样品测出的信号进行比较，算出能被可靠地检测出的最低浓度或量。一般以信噪比（算出能被可靠地检测出的最低浓度或量。一般以信噪比（S/NS/N）3131或或2121时的相应浓度或注入仪器的量确定检测限。时的相应浓度或注入仪器的量确定检测限。 3 3数据要求数据要求 应附测试图谱，说明测试过程和检测限结果。应附测试图谱，说明测试过程和检测限结果。 指样品中被测物能被定量测定的最低量，结果应具有一定准确度和精密度。常用%、ppm、ppb表示。（五）定量限（五）定量限（1imit of quantitation1imit of quantitation，LOQLOQ） 常用信噪比法确定

36、定量限，一般以信噪比（S/N）为101时相应的浓度或注入仪器的量进行确定，也可用仪器所测空白背景响应标准差（SD）的10倍为估计值，再经试验确定。 在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接呈正比在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接呈正比关系的程度。关系的程度。数据要求：数据要求：应列出回归方程、相关系数和线性图。应列出回归方程、相关系数和线性图。（六）（六） 线性线性X- 浓度浓度CY- 峰面积平均值峰面积平均值0.999156241310.499579974850.199832446530.099916677160.019983543290.009991748180.00199844082.5EXCEL表YXab 指达到一定精密度、准确度和线性的条件下，测试指达到一定精密度、准确度和线性的条件下，测试方法适用的高低限浓度或量的区间。方法适用的高低限浓度或量的区间。（七）范围（七）范围 原料、制剂原料、制剂 80% 120%制剂含量均匀度制剂含量均匀度 70%130%标准曲线浓度系列等比例梯度