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文档简介

1、 实验七实验七 牛乳中酪蛋白的制备牛乳中酪蛋白的制备 目的要求目的要求 学习从牛乳中分离纯化酪蛋白的原理和方法。 实验原理实验原理 牛乳中主要的蛋白质是酪蛋白，含量约为牛乳中主要的蛋白质是酪蛋白，含量约为3535g/Lg/L。酪蛋酪蛋白是一些含磷蛋白质的白是一些含磷蛋白质的混合物混合物，等电点为等电点为4.74.7。利用等电点。利用等电点时溶解度最低的原理，将牛乳的时溶解度最低的原理，将牛乳的pHpH调至调至4.74.7时，酪蛋白就沉时，酪蛋白就沉淀出来。用乙醇洗涤沉淀物，乙醚除去脂类杂质后便可得淀出来。用乙醇洗涤沉淀物，乙醚除去脂类杂质后便可得到纯的酪蛋白。到纯的酪蛋白。试剂和器材试剂和器材

2、 试剂：试剂：95%乙醇；乙醇乙醚混合液 (V/V=1 1);无水乙醚0.2mol/L pH4.7醋酸醋酸钠缓冲液 材料材料 纯牛奶(蒙牛) 1 1将将2525mLmL牛奶加热至牛奶加热至4040。在搅拌下慢慢加入预热至。在搅拌下慢慢加入预热至4040、pH4.7pH4.7醋酸缓冲液醋酸缓冲液2525mLmL。用用精密试纸调精密试纸调pHpH值至值至4.74.7。 2. 2. 将上述悬浮液冷却至室温。离心将上述悬浮液冷却至室温。离心1010min(3000r/min)min(3000r/min)弃弃去上清液，得酪蛋白粗制品。去上清液，得酪蛋白粗制品。 3 3用水洗沉淀两次，离心用水洗沉淀两次，

3、离心5 5min(3000r/min)min(3000r/min)，弃去上清液。弃去上清液。 操作方法操作方法 3 3用乙醇洗沉淀用乙醇洗沉淀1 1次，离心次，离心5 5min(3000r/min)min(3000r/min)，弃去上清弃去上清 液。用乙醇液。用乙醇乙醚混合液洗沉淀乙醚混合液洗沉淀1 1次。最后用乙醚洗沉淀次。最后用乙醚洗沉淀1 1次，次， 各离心各离心5 5min(3000r/min)min(3000r/min) 。 4 4将沉淀摊开在表面皿上，将沉淀摊开在表面皿上，风干风干；得酪蛋白纯品。；得酪蛋白纯品。 5 5准确称重，计算含量酪蛋白准确称重，计算含量酪蛋白g/100mLg/100mL牛乳（牛乳（g%g%）, ,并和并和 理论含量为理论含量为3.53.5g/100mLg/100mL牛乳相比较，求出实际得率。

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