5-6 其它类成分中药制剂的分析

1、第六节第六节 木脂素类成分分析木脂素类成分分析第七节第七节 其它类型成分分析其它类型成分分析熟悉熟悉木脂素类、木脂素类、有机酸类、环烯醚萜类、香有机酸类、环烯醚萜类、香豆素类、单萜类及二萜类成分、多糖豆素类、单萜类及二萜类成分、多糖的理化的理化性质性质 掌握掌握木脂素类、木脂素类、有有机酸类、机酸类、环环烯醚萜类、香烯醚萜类、香豆素类、单萜类及二萜类成分、多糖豆素类、单萜类及二萜类成分、多糖的中药的中药制剂定性鉴别、含量测定的原理和方法选择制剂定性鉴别、含量测定的原理和方法选择以及供试液的提取纯化方法以及供试液的提取纯化方法 第六节 木脂素类成分分析（一）概述（了解）（一）概述（了解）l木脂素

2、：两分子苯丙素衍生物（木脂素：两分子苯丙素衍生物（C6-C3）聚合而聚合而成的天然化合物。成的天然化合物。l分布：存在于植物的木部和树脂中，如厚朴、五分布：存在于植物的木部和树脂中，如厚朴、五味子、连翘、牛蒡子、细辛等的主要化学成分味子、连翘、牛蒡子、细辛等的主要化学成分l结构：母核常具有醇基、酚羟基、亚甲二氧基、结构：母核常具有醇基、酚羟基、亚甲二氧基、甲氧基、羧基和内酯结构甲氧基、羧基和内酯结构 123456789123456789（二）理化性质功能团反应功能团反应酚酚-OH：FeCl3试剂，重氮化试剂试剂，重氮化试剂亚甲二氧基：亚甲二氧基：Labat试剂试剂-没食子酸浓硫酸没食子酸浓硫酸

3、Ecgrine试剂：变色酸试剂：变色酸-浓硫酸浓硫酸（二）理化性质性状：木脂素多为无色结晶，少数能升华性状：木脂素多为无色结晶，少数能升华溶解度：游离木脂素溶于乙醇、氯仿、苯等溶剂，溶解度：游离木脂素溶于乙醇、氯仿、苯等溶剂，难溶于水。木脂素苷水溶性增加。难溶于水。木脂素苷水溶性增加。化学性质：具光学活性，遇酸碱易发生异构化作用化学性质：具光学活性，遇酸碱易发生异构化作用 OOOOHOOCH3OCH3ABC山荷叶素（A）式山荷叶素（B）式OOHOH3COABCH3COOOKMnO4/KOH(1)KMnO4/Me2O(2)CH2N2OOCOOHH3COH3COOOCOOMeO（二）理化性质理化性

4、质：理化性质：氧化反应：剧烈氧化氧化反应：剧烈氧化-碱性碱性KMnO4/H2O、NaBrO/H2O；缓和氧化缓和氧化-中性中性KMnO4/丙酮丙酮 （二）理化性质提取与分离：提取与分离：提取：游离木脂素提取：游离木脂素-石油醚、丙酮、乙醇等溶剂石油醚、丙酮、乙醇等溶剂 木脂素苷木脂素苷-苷类提取方法苷类提取方法 木脂内酯木脂内酯-碱溶酸沉法碱溶酸沉法分离：溶剂萃取法、分级沉淀法、重结晶、色谱分离：溶剂萃取法、分级沉淀法、重结晶、色谱法等法等 （三）定性鉴别色谱检识：薄层色谱色谱检识：薄层色谱 吸附剂：硅胶吸附剂：硅胶 展开剂：氯仿、氯仿展开剂：氯仿、氯仿- -甲醇、乙酸乙酯甲醇、乙酸乙酯- -

5、甲醇甲醇等等 显色剂：茴香醛浓硫酸，显色剂：茴香醛浓硫酸，110110加热加热5min5min 5% 5%或或10%10%磷钼酸，磷钼酸，120120加热至斑点出加热至斑点出现现 10%10%硫酸，硫酸，110110加热加热5min5min 三氯化锑，三氯化锑，100100加热加热10min/UV10min/UV 碘蒸气，熏碘蒸气，熏/UV/UV（四）含量测定方法（四）含量测定方法总木脂素成分：总木脂素成分：1 1、比色法、比色法l酚类：三氯化铁试剂反应，重氮化试剂反应酚类：三氯化铁试剂反应，重氮化试剂反应lEcgrineEcgrine（变色酸（变色酸浓硫酸）反应浓硫酸）反应lLabat（没食

6、子酸（没食子酸/浓硫酸）反应浓硫酸）反应2 2、二阶导数光谱法二阶导数光谱法 3 3、柱色谱比色法、柱色谱比色法（四）含量测定方法（四）含量测定方法 单体木脂素成分：单体木脂素成分：1 1、薄层色谱扫描法、薄层色谱扫描法2 2、分光光度法分光光度法3 3、高效液相色谱法、高效液相色谱法 （五）应用实例（五）应用实例1、香砂养胃丸中厚朴酚、和厚朴酚的含量测香砂养胃丸中厚朴酚、和厚朴酚的含量测定定第七节第七节 其它类型成分分析其它类型成分分析 一、有机酸类成分分析一、有机酸类成分分析 （一）概述（一）概述l分布：广泛分布于中药中，并参与机体的代谢，分布：广泛分布于中药中，并参与机体的代谢，具有多种

7、生理活性，大多与钾、钠、钙等阳离子或具有多种生理活性，大多与钾、钠、钙等阳离子或生物碱结合成盐或酯存在生物碱结合成盐或酯存在l生理活性：生理活性：蜂王酸蜂王酸- - 王浆中提取，提高免疫力王浆中提取，提高免疫力阿魏酸阿魏酸- - 抑制血小板聚集抑制血小板聚集齐墩果酸齐墩果酸- - 防治脂肪肝，抗动脉硬化防治脂肪肝，抗动脉硬化绿原酸绿原酸- - 抑菌作用（茵陈）抑菌作用（茵陈）油酸油酸-具有抗癌作用，是鸦胆子有效成分之一具有抗癌作用，是鸦胆子有效成分之一一、有机酸类成分分析一、有机酸类成分分析 （一）概述（一）概述l结构特征：含羧基结构特征：含羧基- - 与显色剂产生颜色反应与显色剂产生颜色反应

8、用于鉴别和含量测定用于鉴别和含量测定l溶解性：游离有机酸易溶于有机溶剂难溶于水，溶解性：游离有机酸易溶于有机溶剂难溶于水，低级脂肪酸一般易溶于水、乙醇等难溶于亲脂性有低级脂肪酸一般易溶于水、乙醇等难溶于亲脂性有机溶剂，高级脂肪酸及芳香酸较易溶于有机溶剂而机溶剂，高级脂肪酸及芳香酸较易溶于有机溶剂而难溶于水；有机酸盐易溶于水难溶于有机溶剂。难溶于水；有机酸盐易溶于水难溶于有机溶剂。l检识方法：检识方法：1.1.与氢氧化钡、氢氧化钙生成钡盐和钙盐沉淀；与与氢氧化钡、氢氧化钙生成钡盐和钙盐沉淀；与醋酸铅与碱式醋酸铅生成铅盐沉淀。醋酸铅与碱式醋酸铅生成铅盐沉淀。2.2.薄层色谱薄层色谱一一、有机酸类成

9、分分析、有机酸类成分分析 （一）概述（一）概述l提取和分离：一般先酸化使有机酸游离，再选择提取和分离：一般先酸化使有机酸游离，再选择合适的有机溶剂提取合适的有机溶剂提取 一一、有机酸类成分分析、有机酸类成分分析 （一）概述（一）概述l提取和分离：一般先酸化使有机酸游离，再选择提取和分离：一般先酸化使有机酸游离，再选择合适的有机溶剂提取合适的有机溶剂提取 人参蜂王浆含蜂王酸人参蜂王浆含蜂王酸1.4%1.4%以上以上含量测定方法：薄层间接和直接定量法、高含量测定方法：薄层间接和直接定量法、高效液相色谱法和气相色谱法效液相色谱法和气相色谱法例：例：（1 1）薄层间接定量法：样品预处理）薄层间接定量法

10、：样品预处理有机有机溶剂提取溶剂提取聚酰胺薄膜上点样聚酰胺薄膜上点样展开展开罗丹明罗丹明B B染色染色深红色（深红色（10-HAD10-HAD）-吹干，剪下洗脱吹干，剪下洗脱在在=560nm=560nm处比色处比色（一） 人参蜂王浆中蜂王酸的测定人参蜂王浆人参蜂王浆 水溶解水溶解 盐酸盐酸pH=3.0 pH=3.0 乙醚提取乙醚提取 回收乙醚回收乙醚 残留物溶于氯仿聚残留物溶于氯仿聚酰胺薄膜上点样酰胺薄膜上点样 石油醚石油醚- -乙醚乙醚- -冰醋酸（冰醋酸（3 3：2 2：0.50.5）展开）展开 凉干后于醋酸中浸泡凉干后于醋酸中浸泡10-10-20min 20min 浸于罗丹明浸于罗丹明B

11、 5-10min B 5-10min 吹干，剪吹干，剪下下- 95%- 95%乙醇乙醇- -冰醋酸冰醋酸- -水（水（4545：5 5：5050）洗脱）洗脱30min 30min 比色比色（一） 人参蜂王浆中蜂王酸的测定（一） 人参蜂王浆中蜂王酸的测定 （2 2）薄层扫描法）薄层扫描法 样品制备：精密取样样品制备：精密取样加甲醇加甲醇冷冻离心冷冻离心取取上清液，沉淀甲醇洗上清液，沉淀甲醇洗3 3次，合并上清液次，合并上清液回收甲醇回收甲醇残渣酸化残渣酸化水饱和的二氯甲烷萃取水饱和的二氯甲烷萃取回收回收残渣氯仿残渣氯仿定容定容测定测定 制备标准溶液、标准曲线制备标准溶液、标准曲线 （3 3）高效

12、液相色谱法）高效液相色谱法 关键：样品预处理（甲醇沉淀蛋白、超声波提关键：样品预处理（甲醇沉淀蛋白、超声波提取或固相萃取柱净化），保持酸度取或固相萃取柱净化），保持酸度 （4 4）气相色谱法：甲酯化后用）气相色谱法：甲酯化后用GCGC其它实例（二）桂皮浸膏中肉桂酸的测定二）桂皮浸膏中肉桂酸的测定 桂皮：桂皮醛、桂皮酸（国外要求）桂皮：桂皮醛、桂皮酸（国外要求） 高效液相色谱法测定：样品经超微过滤器处理，高效液相色谱法测定：样品经超微过滤器处理，定容，进样定容，进样, ,以外标法、峰面积计算含量以外标法、峰面积计算含量 （三）益心口服液中阿魏酸与桂皮酸的分析三）益心口服液中阿魏酸与桂皮酸的分析益

13、心口服液：肉桂、川芎、丹参、三七等益心口服液：肉桂、川芎、丹参、三七等阿魏酸阿魏酸 、桂皮酸、桂皮酸（四）含绿原酸中药制剂的分析四）含绿原酸中药制剂的分析薄层层析薄层层析-舒肝消积丸中舒肝消积丸中绿原酸绿原酸的测定的测定高效液相色谱法高效液相色谱法-感冒舒中绿原酸的测定感冒舒中绿原酸的测定（五）抗病毒较囊中齐墩果酸的测定五）抗病毒较囊中齐墩果酸的测定-薄层色谱扫薄层色谱扫描法描法二、二、含环烯醚萜类制剂的分析含环烯醚萜类制剂的分析 （一）（一） 概述概述 环烯醚萜：一类特殊的单萜。环烯醚萜：一类特殊的单萜。 生源途径：焦磷酸牻牛儿酯生源途径：焦磷酸牻牛儿酯(GPP)(GPP)为前体。为前体。

14、生理活性：多种多样。生理活性：多种多样。 分布：多科植物分布：多科植物-栀子、地黄、龙胆，栀子、地黄、龙胆， 制剂制剂-黄连解毒汤、温清瘾、六味地黄丸、龙黄连解毒汤、温清瘾、六味地黄丸、龙胆泻肝丸胆泻肝丸二、二、含环烯醚萜类制剂的分析含环烯醚萜类制剂的分析 结构类型：结构类型： 特点：特点：C1C1多有官能团，多有官能团，-OH(-OH(成苷成苷) )、-OCH3 -OCH3 、C=OC=O等；等； C3C3、C4C4多为双键，多为双键，C4-CH3C4-CH3易为氧化物；易为氧化物； C8-CH3C8-CH3易为氧化物；易为氧化物；环戊烷呈不同氧化态，如双键、环氧、环酮等。环戊烷呈不同氧化态

15、，如双键、环氧、环酮等。分类：环烯醚萜及其苷分类：环烯醚萜及其苷,裂环环烯醚萜及其苷裂环环烯醚萜及其苷OO-glc123456789二二、含环烯醚萜类制剂的分析含环烯醚萜类制剂的分析 溶解性：易溶于水和甲醇，成苷后苷键易被酸溶解性：易溶于水和甲醇，成苷后苷键易被酸水解断裂水解断裂 显色反应：环烯醚萜类遇氨基酸并在加热下显显色反应：环烯醚萜类遇氨基酸并在加热下显蓝色蓝色-初步鉴定初步鉴定（二）含栀子中药制剂的分析（二）含栀子中药制剂的分析栀子：茜草科，苦寒清降、凉血解毒栀子：茜草科，苦寒清降、凉血解毒 化学成分化学成分-栀子苷（栀子苷（geniposide）、）、栀子苷酸栀子苷酸（genipos

16、idic acid）等等 栀子苷是致泻有效成分，常作为评价制剂质量的栀子苷是致泻有效成分，常作为评价制剂质量的指标性成分指标性成分1.定性鉴别：薄层色谱法定性鉴别：薄层色谱法例：清胃黄连丸：例：清胃黄连丸：栀子、黄芩、黄柏、知母等组成栀子、黄芩、黄柏、知母等组成对照溶液制备对照溶液制备:栀子苷、栀子苷、黄芩苷对照品黄芩苷对照品-加甲醇加甲醇（二）含栀子中药制剂的分析（二）含栀子中药制剂的分析 样品溶液制备：样品研细样品溶液制备：样品研细-加甲醇加甲醇-超声震超声震荡提取荡提取30min-过滤、浓缩过滤、浓缩-加甲醇加甲醇-供试液供试液 薄层鉴别：吸取对照液、供试液薄层鉴别：吸取对照液、供试液-

17、硅胶硅胶G板点板点样样-正丁醇正丁醇-冰醋酸冰醋酸-水（水（7：2：1）展开）展开-吹干吹干 5%香草醛硫酸香草醛硫酸-栀子栀子 2%三氯化铁乙醇三氯化铁乙醇-黄芩黄芩2. 含量测定：色谱、紫外分光光度法、高效液相色含量测定：色谱、紫外分光光度法、高效液相色谱法谱法（三）含龙胆中药制剂的分析（三）含龙胆中药制剂的分析龙胆：主要有效成分为龙胆苦苷龙胆：主要有效成分为龙胆苦苷（gentiopicroside）、）、当药苦苷和当药苷等水溶性当药苦苷和当药苷等水溶性苷，均为裂环烯醚萜类，性质不稳定，对光、热、苷，均为裂环烯醚萜类，性质不稳定，对光、热、酸、空气较为敏感。提取过程中如遇氨会转化为含酸、空

18、气较为敏感。提取过程中如遇氨会转化为含N的化合物的化合物 1. 含龙胆中药制剂的鉴别：薄层色谱含龙胆中药制剂的鉴别：薄层色谱 2. 含龙胆中药制剂的含量测定：根据标准品的含龙胆中药制剂的含量测定：根据标准品的种类，结合剂型，进行样品的预处理，设定方法：种类，结合剂型，进行样品的预处理，设定方法：环糊精单分子胶束荧光法、高效液相色谱环糊精单分子胶束荧光法、高效液相色谱（一）（一） 概述概述 香豆素：一类邻羟基桂皮酸的内酯。香豆素：一类邻羟基桂皮酸的内酯。 生理活性：抗菌消炎、扩张冠脉、抗凝血。生理活性：抗菌消炎、扩张冠脉、抗凝血。 分布：多科植物分布：多科植物白芷素、蛇床子素、白芷素、蛇床子素、

19、秦皮中七叶内酯和七叶苷等秦皮中七叶内酯和七叶苷等三、含香豆素类制剂的分析三、含香豆素类制剂的分析结构类型：邻羟基桂皮酸的内酯，由苯环和吡喃酮结构类型：邻羟基桂皮酸的内酯，由苯环和吡喃酮环组成。环组成。分类：简单香豆素类、呋喃香豆素类、吡喃香豆素分类：简单香豆素类、呋喃香豆素类、吡喃香豆素类、其它香豆素类类、其它香豆素类溶解性：苷元分子量小的随水蒸气蒸发，可升华；溶解性：苷元分子量小的随水蒸气蒸发，可升华；易溶于乙醇、甲醇、氯仿和乙醚，可溶于热水，难易溶于乙醇、甲醇、氯仿和乙醚，可溶于热水，难溶于冷水。溶于冷水。 苷能溶于水、乙醇、甲醇，难溶于氯仿和乙醚等苷能溶于水、乙醇、甲醇，难溶于氯仿和乙醚

20、等三三、含含香豆素香豆素类制剂的分析类制剂的分析 三、含香豆素类制剂的分析三、含香豆素类制剂的分析显色反应：显色反应：1 1、异羟肟酸铁反应：红色、异羟肟酸铁反应：红色2 2、与酚羟基反应：、与酚羟基反应：FeCl3FeCl3试剂、试剂、GibbsGibbs试剂、重氮试剂、重氮化试剂化试剂光谱特征：光谱特征：uv300nmuv300nm，多有蓝色荧光多有蓝色荧光（二）定性分析（二）定性分析1、化学反应法、化学反应法例：青叶胆片的鉴别例：青叶胆片的鉴别2、荧光法、荧光法例：白芷的鉴别例：白芷的鉴别3、TLC法法例：七宝美髯颗粒的鉴别例：七宝美髯颗粒的鉴别（三）定量分析（三）定量分析1、分光光度法

21、、分光光度法利用颜色反应、如利用颜色反应、如重氮化试剂重氮化试剂本身有紫外吸收本身有紫外吸收例：消痔液的补骨脂素例：消痔液的补骨脂素2、TLCS法法例：千金止带丸中补骨脂素、异补骨脂素的汗测例：千金止带丸中补骨脂素、异补骨脂素的汗测3、HPLC法法例：辛芩冲剂的欧前胡素例：辛芩冲剂的欧前胡素4、GC法法例：乌蛇止痒丸的蛇床子素例：乌蛇止痒丸的蛇床子素四、含四、含单单萜萜及二萜及二萜类制剂的分析类制剂的分析 （一）（一） 概述概述单萜：单萜：2 2个异戊二烯单位的萜烯及其衍生物个异戊二烯单位的萜烯及其衍生物 二萜：二萜：4 4个分子异戊二烯单位聚合而成。个分子异戊二烯单位聚合而成。 生源途径：生

22、源途径： 二萜以牻牛儿醇基牻牛儿醇为前体；二萜以牻牛儿醇基牻牛儿醇为前体； 分布：单萜分布：单萜广泛存在于高等植物中广泛存在于高等植物中 二萜多以树脂、内酯或苷等存在于多科植物中；二萜多以树脂、内酯或苷等存在于多科植物中； 含氧衍生物具有多方面的显著生理活性，如：含氧衍生物具有多方面的显著生理活性，如：芫花、雷公藤、穿心莲、冬凌草含二萜内酯类化合芫花、雷公藤、穿心莲、冬凌草含二萜内酯类化合物。物。分类：分类：单萜种类较多单萜种类较多二萜分为链状二萜、单环二萜、双环二萜、三环二二萜分为链状二萜、单环二萜、双环二萜、三环二萜、四环二萜萜、四环二萜四、含四、含单单萜萜及二萜及二萜类制剂的分析类制剂的

23、分析 单萜类：单萜类：芍药苷：芍药的主要活性成分，为单萜的衍生物，芍药苷：芍药的主要活性成分，为单萜的衍生物，水溶性大，具易吸湿性，不稳定水溶性大，具易吸湿性，不稳定制剂分析：制剂分析： 例：脏连丸的分析、化毒丸的分析、复方白芍片例：脏连丸的分析、化毒丸的分析、复方白芍片的含量测定的含量测定含含单单萜萜及二萜及二萜类制剂的分析类制剂的分析 五五、含含多糖多糖类制剂的分析类制剂的分析 （一）（一） 概述概述多糖多糖类类：单糖等通过苷键连接而成，如常见的菊糖、：单糖等通过苷键连接而成，如常见的菊糖、淀粉、树胶、粘液质等。淀粉、树胶、粘液质等。生理活性：抗肿瘤、提高免疫、降糖等。生理活性：抗肿瘤、提高免疫、降糖等。分布：多科植物分布：多科植物灵芝多糖、茯苓多糖、南瓜多糖、灵芝多糖、茯苓多糖、南瓜多糖、大黄多糖、当归多糖、党参多糖等大黄多糖、当归多糖、党参多糖等结构类型：单糖等通过苷