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1、医学生物学实验医学生物学实验医学微生物教研室医学微生物教研室 2011年6月实验八实验八脓汁标本中金黄色葡萄球菌的鉴定实验内容实验内容l脓汁标本中金黄色葡萄球菌的鉴定脓汁标本中金黄色葡萄球菌的鉴定 目的目的l熟悉临床标本中常见化脓性细菌的分离鉴定程熟悉临床标本中常见化脓性细菌的分离鉴定程序；掌握细菌分离培养的基本技术。序；掌握细菌分离培养的基本技术。实验器材实验器材l标本：脓拭子、感染分泌物或模拟脓汁标本l菌种：金黄色葡萄球菌培养物、表皮葡萄球菌l培养基：血琼脂平板、甘露醇发酵管l其他：血浆、生理盐水、革兰染液、玻片、滴管 培养箱、 酒精灯、接种环等检查原则检查原则l 在脓汁标本中，以化脓性球

2、菌最为常见，本实 验主要检测金黄色葡萄球菌 l用药前采集标本 l无菌操作标本检测程序标本检测程序 脓汁、脓性分泌物（未知菌液/固体培养物）涂 片革兰染色镜 检血琼脂平板接种直接菌落观察血浆凝固酶试验甘露醇发酵诊断报告检查方法和结果报告检查方法和结果报告 l直接显微镜检查：取标本直接涂片，均匀涂成菌膜，自然干燥，固定后革兰染色，油镜观察。l注：若染色后未发现细菌，可报告“直接镜检未发现细菌” 革兰染色镜检革兰染色镜检 形态形态 排列排列 染色性染色性 金黄色金黄色 葡萄球菌葡萄球菌检查方法和结果报告检查方法和结果报告 l细菌分离培养：取脓液或创伤分泌物接种于血琼脂平板上（接种后4保存），划线分离

3、，37培养1824h后，观察菌落特征，取单个菌落进行革兰染色镜检。l注：第2天观察记录结果；如培养4872h后仍然无菌生长，则报告“无细菌生长”。 血平板培养结果观察血平板培养结果观察 菌落特点菌落特点 溶血性溶血性 菌落颜色菌落颜色金黄色金黄色葡萄球菌葡萄球菌检查方法和结果报告检查方法和结果报告l血浆凝固酶试验（玻片法）： l用灭菌接种环取标本和白葡菌（阴性对照）培养物少许，分别与玻片左右二侧的生理盐水制成均匀菌悬l于玻片玻片左右二侧菌悬液中各加血浆一滴并轻轻摇匀l13分钟内观察结果，出现颗粒状凝集为血浆凝固酶试验阳性，否则为阴性结果报告： 标本标本+ +血浆血浆 白葡菌白葡菌+ +血浆血浆阳性（阳性（+ +）/ /阴性（阴性（）检查方法和结果报告检查方法和结果报告l甘露醇发酵试验：无菌操作取标本和白葡菌（阴性对照）培养物分别接种于甘露醇发酵管，其上覆盖无菌液体石蜡油，37培养1824小时，观察结果。金葡菌发酵甘露醇产酸，使培养基变混充，颜色由紫色变黄色，是为甘露醇发酵试验阳性，而白葡菌相反。l注：第2天观察记录结果 标本标本+ +甘露醇甘露醇 白葡菌白葡菌+ +甘露醇甘露醇 阳性（阳性（+

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