湿热灭菌工艺的验证

1、湿热灭菌工艺验证 D12药剂4班第1组 湿热灭菌的定义： 利用饱和蒸汽水、沸水或流通蒸汽灭菌的方法。 湿热灭菌工艺的验证 实际上是对产品、灭菌设备和装载方法的验证。 验证活动包括：1、对照灭菌设备设计的灭菌参数来校核灭菌器的性能；2、建立某产品及装载方式的灭菌程序的有效性和重现性；3、估计灭菌过程中产品可能发生的变化。验证目的 湿热灭菌验证的目的就是通过一系列验证试验提供足够的数据和文件依据，从而找到最有效最合理的灭菌参数，并把已经验证过的饱和蒸汽灭菌设备和灭菌参数应用到药品生产的除菌过程中去，以证明用于药品生产过程中的每一台饱和蒸汽灭菌设备都能起到灭菌的效果，并且对不同灭菌物品的灭菌过程和灭

2、菌效果具有可靠性和重现性，及验证结果必须证明生产中所采用的灭菌过程对经过灭菌的物品能够保证残存微生物污染的概率后可能性低于百万分之一。 是通过饱和蒸汽、空气-蒸汽混合物或过热水等介质所含的热量与灭菌物品的热传递和产生冷凝水的水合作用来实现的。冷凝水是在蒸汽回到它的能量较低的液态时形成的，这种相变需要蒸汽潜热向周围环境的转化，这样就加热了灭菌器和灭菌物品。选择一种合适的蒸汽灭菌方式，能满足产品本身性能的情况下取得满意的灭菌效果，但是任何一种灭菌方法，都必须应用前予以验证。灭菌的效果 菌的条件：1、灭菌斧内热分布均一，要求从产品达到灭菌温度时起，直至加热结束整个过程中温度都能够保持在 0.5的波动

3、范围以内；2、检查每种灭菌物装载方式的热分布是否一致；3、灭菌斧内部及灭菌物的温度不得低于预定的灭菌工序所规定的温度；4、确定灭菌斧抽真空所需的时间，满足热分布的要求；5、确定灭菌物达到灭菌温度的时间；6、确定灭菌后可以将设备冷却至40以下所需的时间；7、湿热灭菌的标准灭菌时间F0不小于8F0值 可以认为是以相当于121摄氏度的热压灭菌时杀死灭菌容器中全部微生物所需的时间。如果湿热灭菌参比温度规定为121，并假设特别耐热的微生物指示剂（嗜热脂肪芽孢杆菌）的Z值为10。 则F=t10 T-T0/Z湿热灭菌设备确认 安装确认及运行确认一般由设备供货商与使用单位共同完成，供货商通过运行确认，将灭菌设

4、备调至适当的工作状态，同时培训企业的人员。 湿热灭菌设备确认内容包括检查设备构造、控制/检测系统、运行系统、安全系统及所有零部件均与采购要求相同；控制/检测仪器的校验，包括程序控制器、温度压力表和时间控制设备，以及计时器、记录测量仪等。对于湿热灭菌设备，应具备如下条件：1、设备能够承受内部灭菌工艺所需的蒸汽压力，同时为保证灭菌腔室内蒸汽分布的均一性；2、湿热灭菌设备的门，应设计有防止在蒸汽压力下门被打开的安全装置；3、在内腔室内部和夹套上分别设置疏水装置；4、湿热灭菌设备应具备有较强的温度控制能力；5、具有热风干燥功能的设备，还应设置灭菌腔室对外的进气通道，该通道应设置截留微生物的呼吸过滤器；

5、6、湿热灭菌设备应安装有一系列的计量仪器装置（例如温度传感器、温度计、压力传感器、压力表等）。湿热灭菌设工艺运行确认 检查灭菌柜个单元的性能及整机运行是否达到供货单位设计要求。湿热灭菌设工艺性能验证 一台湿热灭菌设备在安装确认及运行确认后，需要进行性能验证。湿热灭菌设备的性能验证则由使用单位完成。验证试验应根据设定的灭菌程序，证实待灭菌品灭菌运行的可靠性及灭菌程序的重现性。验证试验包括：灭菌柜的热分布试验、各种待灭菌品在满载方式下的热穿透试验、确认蒸汽灭菌的效果试验等。湿热灭菌工艺（性能）验证（一）热分布试验1.热电隅校正2.空载热分布试验3.装载热分布试验（二）热穿透试验（三）确认蒸汽灭菌的

6、效果试验确认蒸汽灭菌的效果试验操作1.生物指示剂纸上活菌和活芽孢数的确认2.将各生物指示剂置于电隅旁3.按照灭菌柜验证规程运行一个灭菌周期4.灭菌结束后，待灭菌柜冷却，打开柜门，立即取出所有生物指示剂送微生物实验室培养。5.压碎生物指示剂中的安瓿瓶，按同样操作方法将一个未经灭菌处理的生物指示剂作为阳性对照，56下培养48h。下面是我们做的湿热灭菌工艺验证实验目的：1、掌握湿热灭菌工艺验证的项目。2、熟悉湿热灭菌工艺验证的操作过程。 实验原理：采用饱和蒸汽的方式进行灭菌灭菌。试验内容（热穿透实验）： 热穿透实验是在热分布实验的基础上，确定装载中的“最冷点”，并确认该点在灭菌过程中获的F0不小于8

7、.验证步骤： 将1支探头置于热分布试验确定的冷点位置，其余探头按温度探头装载图均匀分布在灭菌产品中并固定好（铂电阻安装时不要与塑料袋接触），记下探头编号，关上灭菌柜的门，运行灭菌程序，启动验证仪记录灭菌温度、F0，每1min采集一次，直到灭菌程序结束。灭菌程序： 121摄氏度,30min合格标准： 对于此灭菌程序产品来说，腔室内个点（包括最冷点）8，冷点F0值和产品F0的平均值之间的差值不超过2.5相关知识链接药物制剂工艺与制备： F0值： F0值可以认为是以相当于121的热力灭菌时杀死灭菌容器中全部微生物所需的时间。 F0仅用于热压灭菌。计算、设置F0值时，应适当考虑增加理论值的50%，即规

8、定F0值为8min，则实际操作控制在12min。 实验结果与数据时间（min）012345温度（）100102.3105.6107.3109.1110.5时间（min）67891011温度（）109.7106.7109.6111.7112.7113.6时间（min）121314151617温度（）113.9113.7113.8113.7114.3115.7时间（min）181920212223温度（）116.6117.3116.1116.3116.2116.5时间（min）242526272829温度（）117.2117.4118.2116115.9114.3时间（min）3031323334

9、35温度（）113.2111.4108.3106.6106.1105.4时间（min）353637383940温度（）105.4105.2104.5103.2102.2101时间（min）41424344温度（）100.8100.4100.299.9公式：F0=t10(T-121)/10F0=1*（10（100121）/10）+（10（102.3121）/10）+（10（ 105.6121）/10）+.+（10（100.2121）/10）即得：F0=7.06（min）规定F0=8合格，7.068，因此该灭菌柜不符合标准结果分析：1.在温度感应器与温度显示器连接处，因没有塑料管包裹易受水蒸汽影响

10、，导致数据有误2.在数据记录的过程中存在着一下操作的偏差，在记录数据的过程中，数据变化快致使记录数据与真实数据之间存在一定误差！ 生物指示剂生物指示剂： 生物指示剂是一类特殊的活微生物制品，可用于确认灭菌设备的性能，灭菌程序的验证，生产过程灭菌效果的监控等。对特定灭菌处理有确定抗力，并装在内层包装中可供使用的染菌载体。使用方法A、将生物指示剂管放入标准检测包的中心，置于灭菌器的规定位置。B、按规定的灭菌温度和时间进行灭菌处理。C、灭菌结束即刻将指示剂管取出,，该朝上垂直握于手中用镊子夹住指示管下端尖部，将管内瓯夹碎，让培养液流出浸没菌片，充分振摇。将置于56培养箱内或配套微型培养器内，同时放一支未经灭菌处理的生物指示管作为阳性对照，一并