第二章 试管苗快速繁殖

1、第第2 2章章 植物快速繁殖技术植物快速繁殖技术研究根系生理代谢的优良实验体系研究根系生理代谢的优良实验体系 研究营养吸收、生长和代谢的变化规律研究营养吸收、生长和代谢的变化规律建立快速生长的根无性系建立快速生长的根无性系 进行诱变育种进行诱变育种2.2 器官培养器官培养2.2.1 根的培养根的培养 2.2.1.1 根无性繁殖性的建立根无性繁殖性的建立根无性繁殖系根无性繁殖系1.2cm接后接后1周周侧根侧根反复转接反复转接无菌种子无菌种子概念：概念：切取茎的先端或茎尖分生组织进切取茎的先端或茎尖分生组织进行无菌培养。行无菌培养。 意义：意义：微茎尖培养可获得脱毒苗；茎尖微茎尖培养可获得脱毒苗；

2、茎尖培养技术简单，操作方便，易成活，成培养技术简单，操作方便，易成活，成苗时间短，加快繁殖。苗时间短，加快繁殖。 类型：类型：根据培养目的和取材大小分为：根据培养目的和取材大小分为： 微茎尖培养微茎尖培养; ;普通茎尖培养普通茎尖培养 茎尖培养的类型茎尖培养的类型普通茎尖指几毫米到几普通茎尖指几毫米到几十毫米的芽尖及侧芽。十毫米的芽尖及侧芽。微茎尖为微茎尖为0.3-0.5mm0.3-0.5mm取材取材材料处理及材料处理及消毒消毒培培 养养 茎尖培养的方法茎尖培养的方法接种接种直接取材：直接取材：在生长旺在生长旺盛、枝条健壮、无病的母盛、枝条健壮、无病的母株上选生长不久、杂菌污株上选生长不久、杂

3、菌污染少的顶梢（染少的顶梢（1 12cm2cm）（取前可喷杀菌药，可顶（取前可喷杀菌药，可顶芽或侧芽）。芽或侧芽）。 从试管苗获取。从试管苗获取。2.2.2.1 取材取材取取1-2顶梢顶梢 顶梢切割成顶梢切割成0.5-1.0cm0.5-1.0cm的茎尖（除叶的茎尖（除叶, ,剥剥去休眠芽的鳞片）去休眠芽的鳞片） 茎尖流水冲洗茎尖流水冲洗2-4h 2-4h 75%75%酒精迅速漂洗酒精迅速漂洗30s 30s 0.1%0.1%升汞或稀释升汞或稀释2020倍的次氯酸钠液消毒倍的次氯酸钠液消毒5-8min(5-8min(取自老枝条上的可适当延长时间）取自老枝条上的可适当延长时间）2.2.2.2 材料处

4、理及消毒材料处理及消毒接前可再剥去一些接前可再剥去一些叶片。然后随切随叶片。然后随切随接，动作迅速。亦接，动作迅速。亦可将切下茎尖材料可将切下茎尖材料在在1-5% V1-5% VC C液中浸一液中浸一下。下。 2.2.2.3 接种接种培养基培养基 基本培养基：基本培养基：MSMS、WhiteWhite、B5B5、HellerHeller。蔗糖作碳源效果好，浓度蔗糖作碳源效果好，浓度2 23%3%。激素和有机添加物有明显影响。但激素激素和有机添加物有明显影响。但激素浓度以浓度以0.1mg/L0.1mg/L为宜，不要太为宜，不要太高。2.2.2.4 培养培养 培养条件培养条件光强：光强：10001

5、0003000lx3000lx；光照时间：；光照时间：16h16h。温度：温度：2525左右左右 昼夜温差有或无，以植物或培养过程来定昼夜温差有或无，以植物或培养过程来定 干燥季节注意保湿。干燥季节注意保湿。2.2.3 茎段的培养茎段的培养培养基：培养基：MS MS 腋芽增殖效果腋芽增殖效果 ：BA KTBA KT、ZTZT，生长素改，生长素改善苗生长，善苗生长，GAGA促芽伸长。注意激素配比。促芽伸长。注意激素配比。继代增殖途径：继代增殖途径：促腋芽快速生长；诱导形促腋芽快速生长；诱导形成不定芽。成不定芽。2.2.3 叶的培养叶的培养2.2.3.1 材料选择与灭菌材料选择与灭菌2.2.3.2 接种接种外植体大小：外植体大小： 5 55mm5mm薄片薄片2.2.3.3 培养培养 污染是指在组织培养过程中，由于真菌、细污染是指在组织培养过程中，由于真菌、