d二聚体的临床应用及研究进展

1、实验医学的发展向两极分化实验医学的发展向两极分化大型、高效率、自动化仪器、大型、高效率、自动化仪器、快速度、高通量、系列化快速度、高通量、系列化 模块式组合模块式组合 流水线工作站流水线工作站 （AutomatonAutomaton）PCPC、LIS - LIS - 高精密度高精密度实验室计算机管理实验室计算机管理 - - 高精确性高精确性数据传送系统数据传送系统 - - 高效率化高效率化诊疗依据诊疗依据小型、简单化、报告即时性、小型、简单化、报告即时性、快节奏、低要求、个体化快节奏、低要求、个体化 仪器体积小仪器体积小 缩短周转时间缩短周转时间 （Point-of-care testing

2、）急诊、门诊、急诊、门诊、手术、监护、手术、监护、 床床 旁旁 服务、服务、非非诊疗依据诊疗依据基础医学基础医学临床医学临床医学预防医学预防医学生物医学生物医学信息技术信息技术工程技术工程技术飞速发展飞速发展促进、支撑促进、支撑实验医学实验医学快速进步快速进步先进实验技术先进实验技术现代分析仪器现代分析仪器实验室实验室临床临床病因分析病因分析治治疗疗方案方案矛盾大为突出矛盾大为突出之之 间间 桥桥 梁梁急急 需需 检检 验验 医医 师师完成完成 分分 析析 数数 据据 信信 息息 诊诊 断断临临 床床 型型科科 研研 型型P O C医护其他医护其他 D-D 概述概述 检测方法检测方法 临床应用

3、临床应用 研究进展研究进展PlasminD-Dimer 因此因此：的的重要任务之一重要任务之一 1 1、提供新的理论、提供新的理论 2 2、发现新的证据、发现新的证据 3 3、建立新的方法、建立新的方法 研究、生产、整合技术研究、生产、整合技术不断完善和进步的过程不断完善和进步的过程！特点特点1 1 新的分析技术和研究目标需要新的分析技术和研究目标需要 多学科多学科 基础、临床、预防、统计等医学基础、临床、预防、统计等医学 多部门多部门 行政管理、知识产权行政管理、知识产权 、监管机构、监管机构 多技术多技术 工程学、信息学、卫生学、环境工程学、信息学、卫生学、环境 特点特点2 2 应用领域不

4、断扩展应用领域不断扩展 生物芯片生物芯片疾病预防（耳聋）疾病预防（耳聋）药物开发药物开发个体治疗（差异）个体治疗（差异）疾病预防（优生）疾病预防（优生）疾病预防（耳聋）疾病预防（耳聋）国家安全国家安全太空探索太空探索农业育种农业育种环境监测环境监测食品安全食品安全 特点3： 参考体系的建立， 是我们必须应对新的变革和跃迁 。 溯 源 传 递， 国家参考品， 参考实验室， 准确、通用。 1、未知物质的未知功能 2、未知物质的已知功能 3、已知物质的已知功能 4、已知物质的未知功能3、 一一、 D-二聚体的概述二聚体的概述内源凝血内源凝血外源凝血外源凝血凝血酶凝血酶交联的纤维蛋白降解交联的纤维蛋白

5、降解产物产物(FbDPs(FbDPs）交联的纤维蛋白交联的纤维蛋白纤维蛋白原降纤维蛋白原降解产物(FgDPs)纤维蛋白原纤维蛋白原纤溶酶纤溶酶纤维蛋白的纤维蛋白的单体单体FPA、 FPB FXIIIa凝血酶凝血酶 血浆血浆DD含量变化含量变化 鉴别指标鉴别指标 D- D 测定方法测定方法 10种种方法方法 二二、测定方法的原理测定方法的原理 A. 被检血浆中被检血浆中D-二聚体与包被在乳胶颗粒上的单克隆抗体相作用，产生絮状沉淀二聚体与包被在乳胶颗粒上的单克隆抗体相作用，产生絮状沉淀反应。反应。 方法经典方法经典 1983年年R ylat t、 1986年年Elms、 第一株第一株D D单克隆抗

6、体单克隆抗体 第一次吸附在乳胶颗粒上第一次吸附在乳胶颗粒上 B . 采用采用2 个个针对针对D-二聚体的单抗建立的二聚体的单抗建立的 , 以抗原为中心，以抗原为中心，2 种抗体夹心法，种抗体夹心法， 并加入辣根过氧化酶的底物以作显色反应并加入辣根过氧化酶的底物以作显色反应 1983年年R ylat t 和和 Elms 建立了双抗夹心建立了双抗夹心 将抗将抗D D 单克隆抗体包被于测试卡上单克隆抗体包被于测试卡上,血浆由加样孔加血浆由加样孔加入入 ,膜中抗体捕获标本中的膜中抗体捕获标本中的D D , 洗涤后加入胶体金标记的洗涤后加入胶体金标记的 D D 单克隆抗体单克隆抗体, 与被捕获的与被捕获

7、的 D D分子结合而显红色分子结合而显红色, 其显色程度与含其显色程度与含D D量成正比量成正比, 经标准卡比对或用专门检测计测量可定量测定经标准卡比对或用专门检测计测量可定量测定 D D含量。含量。 三种方法不同的特点三种方法不同的特点试验简便快捷试验简便快捷,适用于急诊检验。只能定性，适用于急诊检验。只能定性，半定量，敏感性低。半定量，敏感性低。 常用于常用于 S查，查，半定量结果不理想。半定量结果不理想。法敏感精确、速度比较快，可定量分析法敏感精确、速度比较快，可定量分析, 常常用于成批检测。用于成批检测。 但操作繁琐、要求较高，但操作繁琐、要求较高，不能满足急诊检验需要。不能满足急诊检

8、验需要。试验则结合了上述试验则结合了上述2种方法的优势种方法的优势, 简单、快速、特异性好，能定量、单个标本均可随简单、快速、特异性好，能定量、单个标本均可随时检测。满足急诊检验需要。时检测。满足急诊检验需要。不同方法的特点不同方法的特点 ,使使DD 检测结果更加精密、准确，特异检测结果更加精密、准确，特异 ，具良好的，具良好的线性关系。但不适合对线性关系。但不适合对DD过高的样本直接过高的样本直接检测检测！ 会出现阴性结果会出现阴性结果 2.在仪器上有必要设置预稀释程序及预稀释在仪器上有必要设置预稀释程序及预稀释标准曲线、编程时设定两个标准曲线、编程时设定两个DD实验程序，实验程序，增加一个

9、生理盐水试剂位。增加一个生理盐水试剂位。 法国梅里埃公司法国梅里埃公司VIDAS DDVIDAS DD在在VIDAVIDA免疫免疫分析仪进行，是在酶免疫法基础上与荧光检分析仪进行，是在酶免疫法基础上与荧光检测相结合，利用现成的单剂量试剂和分析仪测相结合，利用现成的单剂量试剂和分析仪中储存的校准系统，对单份样本进行检测。中储存的校准系统，对单份样本进行检测。VIDAS DDVIDAS DD是是目前研究最多目前研究最多的检测技术，敏感的检测技术，敏感性高，与经典的性高，与经典的ELISAELISA有很好的一致性。有很好的一致性。对DVT的敏感性和NPV分别是96 99 95 99 相比较缺点为速度

10、慢，抽血后离心15分钟，用纸条吸入血浆后，所有步骤由仪器完成，大约35分钟。 适合单人检测 ，不适合大样本 。日本日本Sysmex CA-1500Sysmex CA-1500全自动血凝仪全自动血凝仪日本日本Sysmex CA-500Sysmex CA-500半自动血凝仪半自动血凝仪 德国德国BEBE公司公司 Rack RatarRack Ratar自动血凝仪自动血凝仪美国美国Beckman Coulter 7000Beckman Coulter 7000全自动生化仪全自动生化仪 意大利亚特斯全自动酶免分析仪意大利亚特斯全自动酶免分析仪三、三、 D- D指标的临床应用指标的临床应用肝病肝病患者患

11、者心、脑血管疾心、脑血管疾病病恶性肿瘤恶性肿瘤妊娠高血压妊娠高血压综合征综合征恶性血液恶性血液病病溶栓药物溶栓药物的应用的应用 只要机体血管内有活化的血栓形成及只要机体血管内有活化的血栓形成及纤维溶解活动，纤维溶解活动，D-D-二聚体就会升高。心二聚体就会升高。心肌梗死、脑梗死、肺栓塞、肌梗死、脑梗死、肺栓塞、静脉血栓形静脉血栓形成成、手术、肿瘤、手术、肿瘤、弥漫性血管内凝血弥漫性血管内凝血、感染及组织坏死等均可导致感染及组织坏死等均可导致D-D-二聚体升二聚体升高。高。特别对老年人及住院患者，因患菌特别对老年人及住院患者，因患菌血症等病易引起凝血异常而导致血症等病易引起凝血异常而导致D-D-

12、二聚二聚体升高。体升高。 D-D-二聚体可采用血凝标本二聚体可采用血凝标本( (血浆血浆), ), 而而FDPFDP是是能采用血清标本。后者受血清制备是否完全能采用血清标本。后者受血清制备是否完全的影响。的影响。 FDPFDP乳胶颗粒法乳胶颗粒法3 3分钟完成试验分钟完成试验, D-, D-二聚二聚体胶体金免疫过滤法体胶体金免疫过滤法2 2分钟完成试验。分钟完成试验。 前者为半定量测定前者为半定量测定, , 后者若采用读数仪可与后者若采用读数仪可与ELISAELISA法比美法比美。 诱发新生儿诱发新生儿DIC的因素的因素 未足月产未足月产 先兆子痫先兆子痫 胎盘早剥胎盘早剥 妊娠高血压综合征妊

13、娠高血压综合征 患者存在着患者存在着凝血与纤溶凝血与纤溶 与非孕及正常妊娠妇女相比与非孕及正常妊娠妇女相比, D D 水平有显水平有显著性差异著性差异, P0.05，并且随病情并且随病情, 如不及时处置极易形成如不及时处置极易形成。 提出论点提出论点：患者血中患者血中D D 水平异常升高水平异常升高 可能可能是妊娠高血压综合征发生是妊娠高血压综合征发生D IC 时时 ！ 检测血清检测血清D-D 对胎盘早剥诊断的对胎盘早剥诊断的敏感性敏感性、特异性、特异性、阳性预测值和阴性预测值阳性预测值和阴性预测值分别为分别为 67%、93%、91%、48%。 血小板计数、凝血酶原时间、部分凝血活酶时间和血小

14、板计数、凝血酶原时间、部分凝血活酶时间和纤维蛋白原水平等的纤维蛋白原水平等的敏感性尚敏感性尚不足不足20%。提出论点提出论点： D-D 水平是早期诊断胎盘早剥的快速、有效方水平是早期诊断胎盘早剥的快速、有效方法。法。 DIC临床表现临床表现缺乏特异性缺乏特异性 1 : 临床需临床需要医护人员密切观察，要医护人员密切观察， 2 : 诊断需要实诊断需要实验室提供分析指标，验室提供分析指标， 90%的患者的患者：PLT 、APTT、PT、纤维蛋白原含量、纤维蛋白原含量、3P实验及实验及D-D 确诊。确诊。 提出论点提出论点： 经过溶栓药物经过溶栓药物治疗了一周后治疗了一周后提示溶栓提示溶栓物药不足不

15、足 - 含量含量升高升高 - 含量下降含量下降 提示溶栓物提示溶栓物药达到疗效达到疗效 肝病患者肝病患者： 其血管内皮的损伤激活了其血管内皮的损伤激活了外源性凝血外源性凝血途径途径, 最终最终激激活纤溶系统活纤溶系统导致导致D - D 增加增加。 肝病并发纤溶亢进引起的出血倾向肝病并发纤溶亢进引起的出血倾向, 必须动态观察血浆必须动态观察血浆D D水平水平,预警预警！ 重要的临床应用价值重要的临床应用价值 白血病白血病 患者易并发患者易并发凝血功能紊乱凝血功能紊乱, 可表现为出血、血栓。可表现为出血、血栓。 白血病细胞释放多种促凝活性物质及纤溶酶原白血病细胞释放多种促凝活性物质及纤溶酶原激活物

16、。进入血中引起凝血功能紊乱所致。激活物。进入血中引起凝血功能紊乱所致。 提出论点提出论点： D D 检测可作为白血病患者体内出凝血异常及检测可作为白血病患者体内出凝血异常及纤溶亢进诊断的纤溶亢进诊断的 。 大量的文献表明大量的文献表明 ： 肿瘤可以引起患者肿瘤可以引起患者D- D浓度升高，并且可以作为浓度升高，并且可以作为分期、预后等分期、预后等。 Masatoshi Oya等在一项研究中发现等在一项研究中发现 ： 结直肠癌患者结直肠癌患者 D- D比良性疾病患者的明显要高，比良性疾病患者的明显要高， 术前的术前的D- D与肿瘤的病理结果和分期正相关，与肿瘤的病理结果和分期正相关， 术前术前D

17、- D水平高的患者，术后生存期明显要比低水平高的患者，术后生存期明显要比低的患者短。的患者短。 提出论点提出论点： ？！ D- D升高与动脉粥样硬化的发生和严重程度有关。升高与动脉粥样硬化的发生和严重程度有关。 研究发现研究发现： 血浆血浆C反应蛋白反应蛋白(CRP) 、 纤维蛋白原纤维蛋白原( Fib) 、 D D的联合检测的联合检测, 提出论点提出论点： 可反映可反映原发性高血压原发性高血压 病情发展程度病情发展程度, 为早期诊断和及时有效治疗提供依据。为早期诊断和及时有效治疗提供依据。 急性心肌梗死急性心肌梗死实验急性心肌梗死实验冠心病冠心病又分为又分为三组：三组：急性急性心肌梗心肌梗死

18、组死组稳定性稳定性心肌梗心肌梗死组死组不稳定不稳定性心肌性心肌梗死梗死冠心病人冠心病人研究组研究组健康人健康人对照组对照组冠心病冠心病BA 1、急性心肌梗死组、不稳定心绞痛组、急性心肌梗死组、不稳定心绞痛组 D D 、Fib 明显明显稳定性心绞痛组稳定性心绞痛组 和对照组和对照组, 2、而、而急性心肌梗死组急性心肌梗死组的的D D 、Fib含量又明显含量又明显不稳定心绞痛组，不稳定心绞痛组， 3、 同时发现同时发现： D D 、Fib含含 量量轻、中度病变组。轻、中度病变组。 D-DD-D 。 1. D- D和急性主动脉瘤和急性主动脉瘤 Sodeck 等研究发现等研究发现 D- D水平的检测水

19、平的检测,可以排可以排 除急性主动脉瘤，除急性主动脉瘤，诊断的诊断的 敏感性为敏感性为100%。 然而然而： 急性主动脉瘤是一种威胁生命的疾急性主动脉瘤是一种威胁生命的疾病病 D- D水平水平作为诊断该病的作为诊断该病的, 应结合其他检查共同确诊。应结合其他检查共同确诊。 2 .yengli等研究了血中等研究了血中FDP物和物和DD 水平对硅水平对硅 沉着沉着(矽肺矽肺)病早期诊断的意义。病早期诊断的意义。 发现发现 ：硅沉着病早期硅沉着病早期FDP和和 DD水平很高水平很高,随随着病情的发展着病情的发展, 水平逐渐下降水平逐渐下降,尤其是尤其是 特异特异性较高性较高作者认为作者认为： 2项指

20、标项指标有希望用于有希望用于(矽肺矽肺) 的的, 尤其尤其是对是对 有很高适用的价值有很高适用的价值。即有望用即有望用溶栓药物达到溶栓药物达到的效果的效果, 将为将为(矽肺矽肺) 病治疗开辟另一病治疗开辟另一途径。途径。D- D. 研究发现研究发现：深静脉血栓患者其深静脉血栓患者其D- D水平水平低于低于正常者，正常者，,有较高的有较高的。 有研究发现有研究发现：608 例例无明显诱因、初患静脉血无明显诱因、初患静脉血栓栓塞的患者，在接受了栓栓塞的患者，在接受了 3 个月个月口服抗凝剂口服抗凝剂治疗，停药治疗，停药1 个月个月后检测后检测D- D 。水平异常水平异常 D- D水平水平 者较水平

21、正常者的者较水平正常者的复发风险复发风险率高率高2.27% 。D-D D- D 5.化疗化疗 某项关于使用沙利度胺治疗某项关于使用沙利度胺治疗患者血栓病的研究发现：患者血栓病的研究发现： D- D水平高水平高者其静脉血栓栓塞发生的者其静脉血栓栓塞发生的概率大概率大，延长抗凝剂使用时间可以有效，延长抗凝剂使用时间可以有效预防血栓的发生。预防血栓的发生。 但这一结论但这一结论更多的试验更多的试验予以证实予以证实 D-D 6.据报道多种据报道多种化疗药和免疫抑制剂化疗药和免疫抑制剂均可增加血栓均可增加血栓形成的风险。研究发现慢性形成的风险。研究发现慢性B 淋巴细胞白血病淋巴细胞白血病患者接受抗患者接

22、受抗CD20 单克隆抗体单克隆抗体（利妥昔单克隆利妥昔单克隆抗体抗体）治疗后可出现治疗后可出现细胞因子释放综合征细胞因子释放综合征，包包括括D- D、乳酸脱氢酶和转氨酶的乳酸脱氢酶和转氨酶的 。 Weitz 等发现等发现乳腺癌乳腺癌和和肺癌肺癌患者重复系统的化患者重复系统的化疗周期可导致疗周期可导致D- D水平水平， 化疗前单独使用肝素可预防此现象。化疗前单独使用肝素可预防此现象。 可监测化疗诱导血栓可监测化疗诱导血栓 ，此结论还此结论还。D- D 7.： 干细胞移植后患者干细胞移植后患者D- D水平水平 。 移植后血栓发生的危险性取决于移植后血栓发生的危险性取决于 食物疗法食物疗法 移植本身

23、移植本身 潜在的疾病潜在的疾病 移植后治疗移植后治疗 临床上很多疾病伴有临床上很多疾病伴有的改变的改变,随着研究的随着研究的 进一步深入进一步深入,人们发现、并认可人们发现、并认可D- D 检验的检验的临床价临床价值，值，可为可为 早期诊断和疗效评估提供准确的实验依早期诊断和疗效评估提供准确的实验依据，有效提高救治水平。据，有效提高救治水平。 敏感性敏感性、特异性特异性 均已达到临床基本要求均已达到临床基本要求,而且而且操作操作简便、快捷简便、快捷,不需特殊仪器的不需特殊仪器的定量检测方法学定量检测方法学, 在一般的实验室即可开展的技术在一般的实验室即可开展的技术 , 邮箱邮箱:博客博客:ht

24、tp:/:http:/ D-D 概述概述 检测方法检测方法 临床应用临床应用 研究进展研究进展PlasminD-Dimer 特点3： 参考体系的建立， 是我们必须应对新的变革和跃迁 。 溯 源 传 递， 国家参考品， 参考实验室， 准确、通用。 血浆血浆DD含量变化含量变化 鉴别指标鉴别指标 将抗将抗D D 单克隆抗体包被于测试卡上单克隆抗体包被于测试卡上,血浆由加样孔加血浆由加样孔加入入 ,膜中抗体捕获标本中的膜中抗体捕获标本中的D D , 洗涤后加入胶体金标记的洗涤后加入胶体金标记的 D D 单克隆抗体单克隆抗体, 与被捕获的与被捕获的 D D分子结合而显红色分子结合而显红色, 其显色程度与含其显色程度与含D