第三讲糖蛋白质鉴定

1、具有两个或两个以上肽键具有两个或两个以上肽键的化合物在碱性条件下与的化合物在碱性条件下与Cu2反应生成络合物反应生成络合物含醛基的可溶性还原糖含醛基的可溶性还原糖将将Cu(OH)2还原为还原为Cu2O沉淀沉淀反应原理反应原理0.01 g/mL CuSO4溶液溶液0.1 g/mL NaOH溶液溶液0.05 g/mL CuSO4溶液溶液0.1 g/mL NaOH溶液溶液B液液A液液乙液乙液甲液甲液成分成分双缩脲试剂双缩脲试剂斐林试剂斐林试剂比较项目比较项目都含有都含有NaOH、CuSO4两种成分，且所用两种成分，且所用NaOH溶溶液浓度都是液浓度都是0.1 g/mL相同点相同点样液变紫色样液变紫色

2、样液浅蓝色样液浅蓝色棕色棕色砖红色砖红色反应现象反应现象不需加热不需加热5065水浴加热水浴加热反应条件反应条件先加入先加入A液液2 mL摇匀，再摇匀，再加加34滴滴B液摇匀液摇匀甲、乙两液等量混匀甲、乙两液等量混匀后立即使用后立即使用添加顺序添加顺序第第10 d有可溶性糖，不排除有还原糖的可能，故加入斐林有可溶性糖，不排除有还原糖的可能，故加入斐林试剂，水浴加热后可能出现砖红色沉淀；试剂，水浴加热后可能出现砖红色沉淀；种子中一定有蛋白质，加入双缩脲试剂后会出现紫色反应；种子中一定有蛋白质，加入双缩脲试剂后会出现紫色反应；第第30 d种子中有脂肪，与苏丹种子中有脂肪，与苏丹染液发生反应，呈染液

3、发生反应，呈现橘黄色；现橘黄色；第第40 d种子中无淀粉，加入碘液后不会呈现蓝色。种子中无淀粉，加入碘液后不会呈现蓝色。发芽的小麦种子匀浆中含有淀粉酶，发芽的小麦种子匀浆中含有淀粉酶，淀粉酶能使小麦种子中的淀粉水解产淀粉酶能使小麦种子中的淀粉水解产生麦芽糖等还原糖。生麦芽糖等还原糖。 14号试管中加入斐林试剂后，因号试管中加入斐林试剂后，因1、3号试管号试管中是蒸馏水而无还原糖，故显示斐林试剂本身中是蒸馏水而无还原糖，故显示斐林试剂本身的蓝色，的蓝色，2号试管中虽含还原糖，但未水浴加号试管中虽含还原糖，但未水浴加热，故仍呈蓝色，热，故仍呈蓝色，4号试管进行水浴加热后出号试管进行水浴加热后出现砖

4、红色沉淀。现砖红色沉淀。 用于鉴定还原糖的斐林试剂甲液和乙液，必须混合均匀用于鉴定还原糖的斐林试剂甲液和乙液，必须混合均匀后再使用，而鉴定蛋白质时需先加后再使用，而鉴定蛋白质时需先加A液，再加液，再加B液，且两液，且两者者CuSO4溶液浓度也不同；溶液浓度也不同；用双缩脲试剂鉴定蛋白质时，不需要加热。用双缩脲试剂鉴定蛋白质时，不需要加热。 根据溶液甲中的颜色变化可知其含有蛋白质；根据溶液甲中的颜色变化可知其含有蛋白质；根据乙溶液中的颜色变化可根据乙溶液中的颜色变化可知其含有淀粉；知其含有淀粉；甲、乙混合后，两溶液中的物质发生反应产生了还原糖，甲、乙混合后，两溶液中的物质发生反应产生了还原糖，由此可知，甲溶液中含有淀粉酶，乙溶液中含有淀粉。由此可知，甲溶液中含有淀粉酶，乙溶液中含有淀粉。20和和30培养条件下相比较，培养条件下相比较，30时淀粉酶的活性时淀粉酶的活性相对较高，淀粉酶催淀粉水解成麦芽糖的速率更快，相对较高，淀粉酶催淀粉水解成麦芽糖的速率更快，相同条件下产生的麦芽糖更多。相同条件下产生的麦芽糖更多。麦芽糖属于还原糖，与斐林试剂反应生成砖红色沉淀，麦芽糖属于还原糖，与斐林试剂反应生成砖红色沉淀，麦芽糖越多显色越明显，斐林试剂本身为蓝色，可得出麦芽糖越多显色越