艾滋病实验室检查学习教案

1、会计学1艾滋病实验室检查艾滋病实验室检查(jinch)第一页，共20页。2第1页/共19页第二页，共20页。3第2页/共19页第三页，共20页。4第3页/共19页第四页，共20页。5血清学检测血清学检测(jin c)（）（）第4页/共19页第五页，共20页。6测定测定(cdng)p24(cdng)p24抗原抗原敏感性很高（敏感性很高（7 710 pg/ml10 pg/ml）特异性稍差（可有假阳性）特异性稍差（可有假阳性）第5页/共19页第六页，共20页。7 核酸定量技术原理PCRPCR：高温：高温(gown)(gown)变性变性(94)(94)低温退低温退火火(55)(55)适温延伸适温延伸(

2、72)(72)；经；经25302530个循环，成倍数扩增个循环，成倍数扩增荧光定量荧光定量PCRPCR：比常规：比常规PCRPCR多一个寡聚核多一个寡聚核苷酸探针（带一个荧光发光分子和一苷酸探针（带一个荧光发光分子和一个荧光淬灭分子）个荧光淬灭分子）应用：应用：PCRPCR查查PBMCsPBMCs前病毒前病毒DNADNA；RT-PCRRT-PCR查查血浆中的病毒血浆中的病毒RNARNA第6页/共19页第七页，共20页。8淋巴细胞淋巴细胞HIV RNAHIV RNA检测检测(jin c)(jin c)NorthernNorthern印迹杂交印迹杂交(Northern blot)(Northern

3、 blot) 原理原理(yunl)(yunl)： RNA RNA片段经电泳分片段经电泳分离，从凝胶中转移到硝酸纤维素滤离，从凝胶中转移到硝酸纤维素滤膜，再用探针杂交膜，再用探针杂交第7页/共19页第八页，共20页。9 原理：核酸扩增时，核苷酸在某原理：核酸扩增时，核苷酸在某一固定点开始，随机在某一特一固定点开始，随机在某一特定的碱基处终止，产生定的碱基处终止，产生A、T、C、G四组不同长度的一系列核四组不同长度的一系列核苷酸，通过在尿素苷酸，通过在尿素(nio s)变变性的性的PAGE胶上电泳，获得胶上电泳，获得DNA序列序列第8页/共19页第九页，共20页。10第9页/共19页第十页，共20

4、页。11第10页/共19页第十一页，共20页。12染。染。第11页/共19页第十二页，共20页。13第12页/共19页第十三页，共20页。14第13页/共19页第十四页，共20页。15 HIV抗体阳性抗体阳性 CD4+T淋巴细胞数淋巴细胞数200/mm3 无上述表现无上述表现(bioxin)或症状或症状第14页/共19页第十五页，共20页。16第15页/共19页第十六页，共20页。17第16页/共19页第十七页，共20页。18第17页/共19页第十八页，共20页。19第18页/共19页第十九页，共20页。NoImage内容(nirng)总结会计学。HIV抗原检测ELISA夹心法。PCR：高温变性(94)低温退火(55)适温延伸(72)。荧光(ynggung)定量PCR：比常规PCR多一个寡聚核苷酸探针（带一个荧光(ynggung)发光分子和一个荧光(ynggung)淬灭分子）。原理： RNA片段经电泳分离，从凝胶中转移到硝酸纤维素滤膜，再用探针杂交。HIV变