血片制作及染色

1、2022-5-31疟原虫血片制作及染色技术疟原虫血片制作及染色技术血片制作所需设备血片制作所需设备n载玻片载玻片 具有磨砂面，且规格是玻片宽度乘长度在具有磨砂面，且规格是玻片宽度乘长度在25.2*75.2mm，厚度，厚度1mm1.2mm为好。为好。n推玻片推玻片 有专用的。但现在一般选择边缘光滑整齐的载玻有专用的。但现在一般选择边缘光滑整齐的载玻片替代推玻片。片替代推玻片。 n采血针采血针 使用一次性的采血针。使用一次性的采血针。n玻片盒玻片盒 木制木制/塑料均可以。塑料均可以。n75%酒精棉球酒精棉球 用于采血部位的消毒。用于采血部位的消毒。n记号笔记号笔/B2铅笔铅笔 用于载玻片上编写号码

2、。用于载玻片上编写号码。nWhatman(沃特曼沃特曼)903号；将滤纸切成号；将滤纸切成10*2cm大小的纸片，以口径为大小的纸片，以口径为1.2cm的大孔的大孔管，在滤纸上压出两个圆形印迹备用。管，在滤纸上压出两个圆形印迹备用。2022-5-33载玻片的清洗载玻片的清洗n 载玻片载玻片 用以涂制血膜的载玻片，必须清洁无油迹。用以涂制血膜的载玻片，必须清洁无油迹。有油迹的载玻片涂制的厚血膜容易脱落，薄血膜涂有油迹的载玻片涂制的厚血膜容易脱落，薄血膜涂不均匀。不均匀。n新玻片处理新玻片处理 应浸于有液态洗涤剂清水中应浸于有液态洗涤剂清水中1020分分钟，然后用干净棉巾逐个擦拭，再用清水冲洗干净

3、，钟，然后用干净棉巾逐个擦拭，再用清水冲洗干净，晾干后用干净柔软的棉巾擦亮备用。也可以晾干后用干净柔软的棉巾擦亮备用。也可以95%的的乙醇浸泡乙醇浸泡510分钟，再用纱布擦干擦亮备用。分钟，再用纱布擦干擦亮备用。n旧玻片处理旧玻片处理 用过的玻片浸泡洗涤剂溶液中用过的玻片浸泡洗涤剂溶液中12天天或者浸泡于煮沸好的或者浸泡于煮沸好的5%肥皂水中肥皂水中12小时，逐个小时，逐个擦去玻片上的旧血膜痕迹，用清水漂洗干净擦干擦擦去玻片上的旧血膜痕迹，用清水漂洗干净擦干擦亮。亮。n洗净载玻片处理洗净载玻片处理 每每1020张用白纸包好或者装原张用白纸包好或者装原玻片盒里再放入塑料袋内，保存于干燥环境中备用

4、。玻片盒里再放入塑料袋内，保存于干燥环境中备用。2022-5-34取血部位及方法取血部位及方法n取血部位及方法取血部位及方法 取血部位以耳垂较为合取血部位以耳垂较为合适，也可在无名手指末端采血，婴儿可从适，也可在无名手指末端采血，婴儿可从拇趾或足跟取血。先用拇趾或足跟取血。先用75%酒精棉球消酒精棉球消毒取血部位后，以一次性采血针迅速刺入毒取血部位后，以一次性采血针迅速刺入取血部位取血部位12毫米深，然后用左手大拇指、毫米深，然后用左手大拇指、食指和右手中指协同挤出血滴。食指和右手中指协同挤出血滴。2022-5-35采血时间采血时间n取血时机取血时机 现症病人一般可随时取血，疟疾普现症病人一般

5、可随时取血，疟疾普查时可不考虑取血时机。但在诊断或需要某期查时可不考虑取血时机。但在诊断或需要某期疟原虫作标本时，则应掌握适宜的取血时机。疟原虫作标本时，则应掌握适宜的取血时机。 间日疟在寒热发作时，外周血液中主要可见环间日疟在寒热发作时，外周血液中主要可见环状体期；发作后数小时，环状体发育到滋养体状体期；发作后数小时，环状体发育到滋养体期，疟色素形成，形态较易辩认，为诊断疟疾期，疟色素形成，形态较易辩认，为诊断疟疾的有利时机；的有利时机；3648小时，可检出裂殖体；小时，可检出裂殖体；发作一、二次后，配子体出现较多。发作一、二次后，配子体出现较多。n恶性疟较理想的取血时间是在发作后至恶性疟较

6、理想的取血时间是在发作后至20小小时内取血，初发患者退热后常查不到疟原虫。时内取血，初发患者退热后常查不到疟原虫。涂制血膜规则涂制血膜规则用于检查疟原虫的血涂片有两种：一种是将血液涂呈用于检查疟原虫的血涂片有两种：一种是将血液涂呈薄膜状，称薄膜状，称薄薄血膜血膜；一种是血液涂成圆盘状，称；一种是血液涂成圆盘状，称厚血膜厚血膜。薄血膜上的血细胞要求平辅在玻片上面。薄血膜上的血细胞要求平辅在玻片上面。涂片顺序，先厚后薄；位置分配，血片自左向右：薄涂片顺序，先厚后薄；位置分配，血片自左向右：薄-厚厚-标签；推薄片用玻片短边。标签；推薄片用玻片短边。制作厚血膜制作厚血膜制作薄血膜制作薄血膜 2022-

7、5-37厚血膜血量及涂片方法厚血膜血量及涂片方法 厚血膜厚血膜 用推片的一角，从取血部位刮取约用推片的一角，从取血部位刮取约45微升血微升血量（相当于火柴头大小），使血滴与平置的载玻片接触，量（相当于火柴头大小），使血滴与平置的载玻片接触，再由里向外一个方向旋转，转再由里向外一个方向旋转，转24圈，涂成直径圈，涂成直径0.81厘米大小圆形厚血膜，血膜厚薄均匀，过厚易厘米大小圆形厚血膜，血膜厚薄均匀，过厚易于脱落，过薄达不到检出率的要求。于脱落，过薄达不到检出率的要求。2022-5-38薄血膜血量及涂片法薄血膜血量及涂片法n薄血膜薄血膜 取洁净的载玻片取洁净的载玻片2张，张，1张平置在桌上，以左

8、张平置在桌上，以左手拇指，食指夹持载玻片两手拇指，食指夹持载玻片两端（手指切勿接触玻片表端（手指切勿接触玻片表面），用另一张边缘平滑面），用另一张边缘平滑（最好为磨口边缘）的载玻（最好为磨口边缘）的载玻片做推片，用推片一端边缘片做推片，用推片一端边缘的中点从取血部分刮取约的中点从取血部分刮取约11.5微升的血量（相当于微升的血量（相当于1/4火柴头大小），使血滴火柴头大小），使血滴与平置的载玻片接触，并形与平置的载玻片接触，并形成成2535度夹角，待血液度夹角，待血液向两侧扩展约向两侧扩展约2厘米宽度时，厘米宽度时，均匀而迅速地轻轻向左推出均匀而迅速地轻轻向左推出（约（约2.5厘米长）且边缘带

9、厘米长）且边缘带有有“舌状舌状”的薄血膜。的薄血膜。厚血膜厚血膜 用推片的一角，从取血用推片的一角，从取血部位刮取约部位刮取约4 -5微升血量微升血量（相当于火柴头大小），（相当于火柴头大小），使血滴与平置的载玻片接使血滴与平置的载玻片接触，再由里向外一个方向触，再由里向外一个方向旋转，转旋转，转24圈，涂成直径圈，涂成直径0.81厘米大小圆形厚血膜厘米大小圆形厚血膜薄血膜薄血膜再取一小滴血再取一小滴血.将血置于将血置于离厚血膜适当的距离离厚血膜适当的距离（0.5cm0.7cm），将推片），将推片的边缘紧贴载玻片，轻轻的边缘紧贴载玻片，轻轻上下移动，使血液沿边缘上下移动，使血液沿边缘散开，然后

10、匀速地向前推散开，然后匀速地向前推进，形成薄而平铺的薄血进，形成薄而平铺的薄血膜。膜。血片制作图示血片制作图示厚血膜厚血膜薄血膜薄血膜制片流程图示制片流程图示图图1. 取血取血图图2. 涂制厚血膜涂制厚血膜图图3. 涂制薄血膜涂制薄血膜图图4. 推片沿玻片两侧向前推进推片沿玻片两侧向前推进图图5. 正确的推片姿势正确的推片姿势2022-5-311涂制厚、薄血膜的位置涂制厚、薄血膜的位置n通常是将厚、薄血膜涂在一张载玻片上。方法通常是将厚、薄血膜涂在一张载玻片上。方法是将载玻片分为是将载玻片分为3等分（留出标签或磨砂面位等分（留出标签或磨砂面位置后的置后的3等分）。厚血膜涂在载玻片靠近标签等分）

11、。厚血膜涂在载玻片靠近标签或磨砂面方向的右或磨砂面方向的右1/3中央处，圆形、厚薄均中央处，圆形、厚薄均匀、边缘整齐。薄血膜涂在载玻片匀、边缘整齐。薄血膜涂在载玻片1/2至左至左1/3的中部位置，舌状、厚薄均匀。的中部位置，舌状、厚薄均匀。标准的疟疾厚薄血膜片标准的疟疾厚薄血膜片丁板丁板湖北湖北2015.4 厚血膜厚血膜 血量：血量：4-5微升微升 位置：玻片右位置：玻片右1/3处处 外形：圆形，直径外形：圆形，直径0.81.0cm 薄薄血膜血膜 血量：血量：1-1.51-1.5微升，微升， 位置：玻片位置：玻片1/21/2 外形：薄度均匀、无划痕、舌状外形：薄度均匀、无划痕、舌状, , 长约

12、长约2.0-2.5cm2.0-2.5cm 显微镜下：红细胞单层排列显微镜下：红细胞单层排列2022-5-313血片编号血片编号n血膜制成后，立即将受检者的个人编血膜制成后，立即将受检者的个人编号写在玻片磨砂面上（血片的编号要号写在玻片磨砂面上（血片的编号要与血检登记本上编号一致）以防差错。与血检登记本上编号一致）以防差错。2022-5-314 制作制作血膜血膜的注意事项的注意事项 1. 玻片清洗时，避免玻片碰撞、玻片清洗时，避免玻片碰撞、磨损。制作血膜的载玻片必须完磨损。制作血膜的载玻片必须完全清洁而毫无油渍或污垢。制片全清洁而毫无油渍或污垢。制片时，手指只能持载片的边缘，不时，手指只能持载片

13、的边缘，不能接触玻片表面，以免油污使薄能接触玻片表面，以免油污使薄血膜产生空白区以及厚血膜脱落。血膜产生空白区以及厚血膜脱落。作为推片的玻片边缘一定要平滑，作为推片的玻片边缘一定要平滑，才能使推出的血膜均匀一致。才能使推出的血膜均匀一致。2022-5-315制作制作血膜血膜的注意事项的注意事项n 2. 刚涂制的血膜要平放在标本盒内或者刚涂制的血膜要平放在标本盒内或者实验台面上。厚血膜未干前勿使标本片倾实验台面上。厚血膜未干前勿使标本片倾斜，以免未干的血膜倾向一侧，造成血膜斜，以免未干的血膜倾向一侧，造成血膜厚薄不均，厚处不易溶血和着色而影响检厚薄不均，厚处不易溶血和着色而影响检查结果；晾干血膜

14、时应注意防尘、防止苍查结果；晾干血膜时应注意防尘、防止苍蝇、蟑螂等昆虫吮吸血膜，干后应及时装蝇、蟑螂等昆虫吮吸血膜，干后应及时装入标本盒内。新木制标本盒需敞开放置一入标本盒内。新木制标本盒需敞开放置一段时间，让木醇挥发后才能使用，以免厚段时间，让木醇挥发后才能使用，以免厚血膜血红蛋白被其固定，不能溶血或染色血膜血红蛋白被其固定，不能溶血或染色效果不佳。效果不佳。2022-5-316制作制作血膜血膜的注意事项的注意事项n 3. 血膜让其自然干燥，切忌用太阳晒或火烤，血膜让其自然干燥，切忌用太阳晒或火烤，干透后才能用甲醇固定薄血膜。夏天标本尽可干透后才能用甲醇固定薄血膜。夏天标本尽可能能2448小

15、时内固定染色；冬天也不能超过小时内固定染色；冬天也不能超过72小时。放置时间越久，厚血膜越不易溶血，小时。放置时间越久，厚血膜越不易溶血，染色效果也差。若不能及时染色，薄血膜宜先染色效果也差。若不能及时染色，薄血膜宜先用甲醇固定（用甲醇固定（13分钟）然后用过滤清水或自分钟）然后用过滤清水或自来水对厚血膜溶血，晾干后包好置干燥器于冰来水对厚血膜溶血，晾干后包好置干燥器于冰箱内保存，用时将干燥器置室温中箱内保存，用时将干燥器置室温中12小时后小时后取出染色。取出染色。血片的染色血片的染色（一）染液的种类及染色原理（一）染液的种类及染色原理染液种类染液种类：目前所用的血片染色液，虽然名称目前所用的

16、血片染色液，虽然名称很多，但都是从罗门诺夫斯基氏创造的染液很多，但都是从罗门诺夫斯基氏创造的染液变化过来的。总的可分为水溶液和酒精溶液变化过来的。总的可分为水溶液和酒精溶液两大类，前者包括罗氏、西氏（两大类，前者包括罗氏、西氏（Simon)、J.S.B氏染液等，后者包括利氏氏染液等，后者包括利氏(Leishman)、瑞氏和瑞氏和吉氏染液（被国家推吉氏染液（被国家推荐使用）荐使用）等。这些染液中的主要染剂都包含等。这些染液中的主要染剂都包含美兰、伊红和由美兰氧化所成的天青，所以美兰、伊红和由美兰氧化所成的天青，所以称为多色性染剂。称为多色性染剂。2022-5-318血片的染色血片的染色（一）染液

17、的种类及染色原理（一）染液的种类及染色原理染色原理：染色原理：伊红是伊红是酸性酸性水溶性钠盐，美兰是水溶性钠盐，美兰是碱性碱性水溶性盐酸盐，当它们各自溶化水中时，就离水溶性盐酸盐，当它们各自溶化水中时，就离解为带阳电和阴电的离子。伊红主要离解为酸解为带阳电和阴电的离子。伊红主要离解为酸性的阳离子，在遇到碱性的蛋白质如血红蛋白、性的阳离子，在遇到碱性的蛋白质如血红蛋白、嗜伊红白血球颗粒等即可结合成不易溶于水的嗜伊红白血球颗粒等即可结合成不易溶于水的沉淀物染成红色。美兰主要离解为碱性的美兰沉淀物染成红色。美兰主要离解为碱性的美兰离子，美兰就与疟原虫、淋巴和大单核细胞的离子，美兰就与疟原虫、淋巴和大

18、单核细胞的胞浆、嗜碱性白细胞的颗粒等酸性蛋白质结合胞浆、嗜碱性白细胞的颗粒等酸性蛋白质结合染成兰色。染成兰色。2022-5-319血片的染色血片的染色（一）染液的种类及染色原理（一）染液的种类及染色原理染色原理染色原理：美兰与伊红都不能使原虫和白细胞：美兰与伊红都不能使原虫和白细胞的核着色，必须由天青作为媒介（染媒）才的核着色，必须由天青作为媒介（染媒）才能使其着色。天青虽然也是碱性染剂，但又能使其着色。天青虽然也是碱性染剂，但又具有染媒作用，使原虫核和白细胞核等原来具有染媒作用，使原虫核和白细胞核等原来只能染上极淡兰色的结构染上显著的酸性染只能染上极淡兰色的结构染上显著的酸性染剂伊红，这样，

19、就使白细胞粗大的核染成显剂伊红，这样，就使白细胞粗大的核染成显著的既兰又红的紫兰色，而较小或菲薄的原著的既兰又红的紫兰色，而较小或菲薄的原虫核和淋巴细胞原浆中的颗粒染成紫红色。虫核和淋巴细胞原浆中的颗粒染成紫红色。2022-5-320血片的染色血片的染色（一）染液的种类及染色原理（一）染液的种类及染色原理注意注意：蛋白质是：蛋白质是二性二性电解质，当其处于较电解质，当其处于较等电点等电点为酸的溶液中时，为酸的溶液中时，便呈碱的作用，即与酸或阴离子结合，这就说明为何在染液偏便呈碱的作用，即与酸或阴离子结合，这就说明为何在染液偏酸时，伊红的着色力强，使红细胞着色鲜艳而淋巴细胞和原虫酸时，伊红的着色

20、力强，使红细胞着色鲜艳而淋巴细胞和原虫的胞浆着色不显著；反之，蛋白质在偏碱的溶液中呈酸的作用的胞浆着色不显著；反之，蛋白质在偏碱的溶液中呈酸的作用而中和碱基，也就说明为何染液偏碱时，红细胞和嗜伊红白细而中和碱基，也就说明为何染液偏碱时，红细胞和嗜伊红白细胞的颗粒等被染成紫兰色。胞的颗粒等被染成紫兰色。 伊红在水溶液内遇到美兰或天青，即可互相化合而产生沉伊红在水溶液内遇到美兰或天青，即可互相化合而产生沉淀从而失去染色力，因此，吉氏染液的母液绝对不能进水。淀从而失去染色力，因此，吉氏染液的母液绝对不能进水。2022-5-321血片的染色血片的染色（二）吉氏染液母液配置方法（二）吉氏染液母液配置方法

21、 取吉氏粉取吉氏粉0.5克置于研钵中，克置于研钵中，加少量甘油充分研磨，再加再磨，加少量甘油充分研磨，再加再磨，至至25毫升加完为止，倒入毫升加完为止，倒入60或或100毫升带有玻塞的有色玻瓶中。毫升带有玻塞的有色玻瓶中。在研钵中加少量甲醇，洗去甘油在研钵中加少量甲醇，洗去甘油染液混入瓶内，至染液混入瓶内，至25毫升甲醇毫升甲醇洗净钵中甘油染液为止，塞紧瓶洗净钵中甘油染液为止，塞紧瓶塞，充分摇匀，置于塞，充分摇匀，置于5560水浴中或温箱内水浴中或温箱内24小时或室温小时或室温内内35天，多加摇动，即成原天，多加摇动，即成原液。吉氏染液是目前较优良的血液。吉氏染液是目前较优良的血膜染剂，即使在

22、炎热天气中，亦膜染剂，即使在炎热天气中，亦可经久不变。可经久不变。 材料：材料： 1、吉氏粉、吉氏粉0.5克克 2、甘油、甘油25毫升毫升 3、甲醇、甲醇25毫升毫升染色前薄血膜甲醇固定染色前薄血膜甲醇固定用甲醇固定用甲醇固定薄血膜，平薄血膜，平放，等待厚放，等待厚血膜血膜充分干充分干燥燥（要点：载要点：载玻片略向下玻片略向下倾斜。甲醇倾斜。甲醇不能触碰到不能触碰到厚血膜厚血膜）丁板丁板湖北湖北2015.4甲醇固定薄片甲醇固定薄片完成甲醇固定完成甲醇固定厚血膜厚血膜PBS或清水溶血或清水溶血 染色之前，厚血膜用染色之前，厚血膜用PBS或清水进行溶血。抽取静脉加了抗或清水进行溶血。抽取静脉加了抗

23、凝剂的全血制作的血片须放置凝剂的全血制作的血片须放置1-2天溶血，天溶血，清水漂洗晾干后清水漂洗晾干后再染色，再染色，以防血膜脱落。采集不加抗凝剂的血液，新制作以防血膜脱落。采集不加抗凝剂的血液，新制作的厚血膜，血膜干燥后可直接采用边溶血边染色或先溶血的厚血膜，血膜干燥后可直接采用边溶血边染色或先溶血后染色的方法染色，血膜不易脱落。但后种方法染色出的后染色的方法染色，血膜不易脱落。但后种方法染色出的血片，镜检时视野里厚血膜干净清晰，疟原虫和血细胞形血片，镜检时视野里厚血膜干净清晰，疟原虫和血细胞形态清楚。态清楚。图图1. 在厚血膜滴加在厚血膜滴加PBS或清水或清水图图2. 静置静置510，弃去

24、溶解水，弃去溶解水2022-5-324血片的染色血片的染色（三）吉氏染液血片染色方法（三）吉氏染液血片染色方法 血膜干燥后，用甲醇或无水酒精固定薄血膜，用清水血膜干燥后，用甲醇或无水酒精固定薄血膜，用清水或或PBS水对厚血膜溶血，然后再进行染色。水对厚血膜溶血，然后再进行染色。 成批血片染色成批血片染色：将已固定薄血膜的血片插入染色缸，：将已固定薄血膜的血片插入染色缸，倒入倒入2%吉氏染液稀释液（吉氏染液稀释液（2毫升吉氏染液原液加中毫升吉氏染液原液加中性蒸馏水或缓冲液性蒸馏水或缓冲液98毫升稀释均匀即成），毫升稀释均匀即成）， 同时对同时对厚薄血膜染色厚薄血膜染色30分钟（如染液不合标准时，

25、得酌情分钟（如染液不合标准时，得酌情增减染色时间），然后用清水轻轻将染液冲去，再用增减染色时间），然后用清水轻轻将染液冲去，再用清水轻轻冲洗一次，干净后将血片标本（血膜面朝内、清水轻轻冲洗一次，干净后将血片标本（血膜面朝内、厚血膜方向朝下）插于晾片板上，待干镜检。厚血膜方向朝下）插于晾片板上，待干镜检。2022-5-325血片的染色血片的染色（三）吉氏染液血片染色方法（三）吉氏染液血片染色方法单张血片染色单张血片染色：薄血膜经甲醇固定干燥后，：薄血膜经甲醇固定干燥后，用用2%吉氏染液的稀释液吉氏染液的稀释液12毫升，可毫升，可用中性蒸馏水或缓冲液用中性蒸馏水或缓冲液12毫升，加吉毫升，加吉氏染

26、液原液氏染液原液12滴，混合均匀后滴入血滴，混合均匀后滴入血片标本血膜上，染色片标本血膜上，染色2030分钟，然后分钟，然后用清水轻轻将片上的染液冲洗干净，晾用清水轻轻将片上的染液冲洗干净，晾干镜检。干镜检。 将已固定薄血膜的血片插入染色缸，倒入将已固定薄血膜的血片插入染色缸，倒入2%吉氏染吉氏染液（液（98毫升的缓冲液或净水中加入毫升的缓冲液或净水中加入2毫升吉氏染液原液，毫升吉氏染液原液，混匀）浸没血片，染色混匀）浸没血片，染色30分钟。然后用清水轻轻将染液分钟。然后用清水轻轻将染液漂洗干净，将染色片插于晾片板上晾干，包装，待镜检漂洗干净，将染色片插于晾片板上晾干，包装，待镜检（如果染色效

27、果不理想时，得酌情增减染色时间和浓（如果染色效果不理想时，得酌情增减染色时间和浓度）。度）。 血片染色图示血片染色图示 单片染色在量筒内先加入单片染色在量筒内先加入1-2mlPBS缓冲液或净水，然缓冲液或净水，然后加入吉氏染液原液后加入吉氏染液原液1-2滴滴（或按要求滴加）（或按要求滴加），混匀后，混匀后，均匀覆盖在已充分干躁的厚均匀覆盖在已充分干躁的厚薄血膜上，染色薄血膜上，染色20-30min。清水缓缓冲洗，晾干（血膜清水缓缓冲洗，晾干（血膜面朝内、厚血膜方向朝下），面朝内、厚血膜方向朝下），等待镜检。等待镜检。要点：要点：1.量筒内先加入量筒内先加入PBS，再加入，再加入吉氏染液原液吉氏

28、染液原液2.稀释好的染色液必须在稀释好的染色液必须在60分分钟内用完，超时重新配制钟内用完，超时重新配制血片染色图示血片染色图示黎莉莉黎莉莉湖北湖北2012011 1.7.7染色质量标准染色质量标准 显微镜下：显微镜下：疟原虫核呈红色疟原虫核呈红色, 胞浆呈蓝色，薄血膜的红细胞浆呈蓝色，薄血膜的红细 胞单层排列，视野干净。胞单层排列，视野干净。 外观：外观：标准颜色应为：血膜蓝中带紫色。如果血膜颜色偏红色标准颜色应为：血膜蓝中带紫色。如果血膜颜色偏红色, 说明染色偏酸性；血膜偏蓝色说明染色偏酸性；血膜偏蓝色, 则为偏碱性。则为偏碱性。外观吉氏染色血片外观吉氏染色血片偏偏 酸酸偏偏 碱碱标标 准

29、准显微镜下显微镜下2022-5-329影响染色效果的因素影响染色效果的因素n血片染色好坏除了与玻片是否清洁，血片血片染色好坏除了与玻片是否清洁，血片制作质量好坏等有关外，还受到以下几个制作质量好坏等有关外，还受到以下几个因素的影响：因素的影响：n（1）染料溶剂的质量）染料溶剂的质量 染料、甲醇和甘油染料、甲醇和甘油如果不纯，常使配制的染液偏酸或偏碱而如果不纯，常使配制的染液偏酸或偏碱而影响染色效果。因此必须用分析纯的甲醇影响染色效果。因此必须用分析纯的甲醇和中性甘油，而且在配制时所用的器具必和中性甘油，而且在配制时所用的器具必须干净而无水份。须干净而无水份。2022-5-330影响染色效果的因素影响染色效果的因素n（2）染液的新旧）染液的新旧 新配制的染液因色素尚新配制的染液因色素尚未充分溶解，染色力较弱且常呈现偏碱性。未充分溶解，染色力较弱且常呈现偏碱性。染液存放时间越久，染色力越强。通常在染液存放时间越久，染色力越强。通常在染液配制染液配制12周后才使用，盛装染液的瓶周后才使用，盛装染液的瓶子应加塞盖密。以防吸潮而影响染液质量。子应加塞盖密。以防吸潮而影响染液质量。2022-5-331影响染色效果的因素影响染色效果的因素n（3）染液稀释后使用时间）染液稀释后使用时间 吉氏和瑞氏染吉氏和瑞氏染液的主要