第十一章-化学毒物危险度评价

1、第十一章第十一章 危险度评价危险度评价和安全性评价方法和安全性评价方法概述概述 在人类的生产和生活环境中存在着多种多在人类的生产和生活环境中存在着多种多样的化学物质样的化学物质, ,既有天然生成的既有天然生成的, ,也有人工合成也有人工合成的。的。据估计据估计,目前常用的目前常用的7万多种化学物质中约万多种化学物质中约有有10%左右为致突变物。左右为致突变物。国际癌症研究机构国际癌症研究机构(IARC)(IARC)颁布的文集中确定约有颁布的文集中确定约有102102种种( (至至20072007年年) )化学毒物或生产过程对人类有致癌性。化学毒物或生产过程对人类有致癌性。 对特定化学物质产生毒

2、害的可能性作出作出准确的评价准确的评价,在此基础上制定相关的法律、法在此基础上制定相关的法律、法规、标准和条例规、标准和条例,作为国家行政部门监督执法作为国家行政部门监督执法的依据的依据,对化学品实施有效的管理以保护人民的身体健康和生产生活环境,显得十分重要。为适应此种需要,管理毒理学应运而生并迅速地发展起来。 管理毒理学管理毒理学(regulatory toxicology)是毒是毒理学的一个分支理学的一个分支,是将毒理学的原理、技术和是将毒理学的原理、技术和研究结果应用于化学物质管理研究结果应用于化学物质管理,以期达到保障以期达到保障人类健康和保护生态环境免遭破坏的目的。人类健康和保护生态

3、环境免遭破坏的目的。 管理毒理学管理毒理学需要行政管理人员和毒理学需要行政管理人员和毒理学工作者的共同参与和密切合作工作者的共同参与和密切合作。 毒理学工作者毒理学工作者:提供毒理学原理和实验数据。毒提供毒理学原理和实验数据。毒理学实验室获得的毒性资料是行政管理部门制定理学实验室获得的毒性资料是行政管理部门制定防治法规和卫生标准时不可缺少的科学根据。防治法规和卫生标准时不可缺少的科学根据。行政管理部门行政管理部门:通过制定规范、程序、准则对毒通过制定规范、程序、准则对毒理学研究的设计和执行施加重要的影响。针对不理学研究的设计和执行施加重要的影响。针对不同类别的化学物质提出了相应的毒性鉴定要求和

4、同类别的化学物质提出了相应的毒性鉴定要求和试验程序试验程序,规定了从事毒理学鉴定的合格实验室规定了从事毒理学鉴定的合格实验室条件和工作准则条件和工作准则如良好实验室规范如良好实验室规范(good laboratory practice,GLP),以保证毒理学实验以保证毒理学实验数据的质量。数据的质量。毒理学毒理学对于化学物质毒性及其作用机制的认识对于化学物质毒性及其作用机制的认识是逐步深化、不断完善的。新技术的使用和研是逐步深化、不断完善的。新技术的使用和研究的深入究的深入,人们对于化学物质本质的认识也越人们对于化学物质本质的认识也越来越深刻。确定人类致癌物、生产过程来越深刻。确定人类致癌物、

5、生产过程:1987年年IARC公布的为公布的为50种种,1995年为年为60种种,1999年为年为75种种,2002年为年为88种种, 2004年为年为97种种,2007年为年为102种种, 2008年为年为105种种。对于一些新的发现、新的进展会有不同的看法对于一些新的发现、新的进展会有不同的看法,以至于以至于产生争论产生争论。 行政管理行政管理目的是为了规范人们的行为目的是为了规范人们的行为,使之在已使之在已制定的法规和标准的允许范围内活动制定的法规和标准的允许范围内活动,具有权威具有权威性和强制性性和强制性。故行政管理机构在制定管理文件。故行政管理机构在制定管理文件时时,只接受毒理学的基

6、本原理、普遍规律及公认只接受毒理学的基本原理、普遍规律及公认的观点的观点,而不纳入学术上尚存在争议的内容。而不纳入学术上尚存在争议的内容。这这使得现有的法规、标准具有相对的稳定性使得现有的法规、标准具有相对的稳定性,可以可以阶段性的、圆满地解决有关化学物质方面的问阶段性的、圆满地解决有关化学物质方面的问题题,而不致经常改动。而不致经常改动。 我国行政管理部门对化学物质我国行政管理部门对化学物质采用分类分级管采用分类分级管理的办法理的办法。对不同类别、不同毒性级别的化学对不同类别、不同毒性级别的化学物质采用不同的管理尺度物质采用不同的管理尺度,决定其能否使用及使决定其能否使用及使用的范围、数量和

7、条件用的范围、数量和条件。确定化学物质的毒性大小与性质是首先需要解确定化学物质的毒性大小与性质是首先需要解决的问题决的问题,也是进行管理的基础。也是进行管理的基础。毒理学安全性评价毒理学安全性评价及近些年发展起来的及近些年发展起来的危险度危险度评价评价是行政管理部门获得化学物质毒性资料的是行政管理部门获得化学物质毒性资料的主要来源主要来源,起着关键的作用。起着关键的作用。第一节 危险度评价 长期以来长期以来,安全性评价的结果是政府部门安全性评价的结果是政府部门管理化学物质的主要依据管理化学物质的主要依据,通常是用通常是用由动物试由动物试验获得的验获得的NOAEL除以安全系数除以安全系数(saf

8、ety factor,SF)来估测人的来估测人的NOAEL,并在此基础上并在此基础上制订人的每日容许摄入量制订人的每日容许摄入量(acceptable daily intake,ADI)等安全限值。等安全限值。当人接触某种化学当人接触某种化学物质的量低于其安全限值时物质的量低于其安全限值时,即认为是安全的。即认为是安全的。如高于其安全限值时如高于其安全限值时,就要采取措施进行干预就要采取措施进行干预,以保证接触者的健康。以保证接触者的健康。 人们发现致突变物和致癌物的效应表现人们发现致突变物和致癌物的效应表现为为“零零”阈值阈值,即在零以上的任何剂量都可以即在零以上的任何剂量都可以产生效应。对

9、于这样的物质产生效应。对于这样的物质找不到安全限值找不到安全限值,不能用原有的化学物质管理模式进行管理。不能用原有的化学物质管理模式进行管理。 具有致癌潜力的化学毒物越来越多具有致癌潜力的化学毒物越来越多,而且而且其中有一些是难以完全消除或经权衡利弊后其中有一些是难以完全消除或经权衡利弊后尚需应用的。发展了危险度评价的方法尚需应用的。发展了危险度评价的方法,提出提出了了“可接受危险度可接受危险度”的概念。的概念。 1976年,美国环境保护局(Environmental Protection Agency, EPA)首先提出并推荐了危险度评价系统,公布了致癌物评价指南,并成立了致癌物评价小组。

10、1983年,美国国家科学研究顾问委员会(National Research council,NRC)任命专门小组制订颁发了危险度评价的程序,将其主要内容和步骤分为四个部分,危害认定、剂量-反应关系评价、接触评定和危险度特征分析,总称为危险度评价。 在危险度评价的基础上进一步对危险因素进行利弊权衡,作出决策并制订标准和措施的过程称为危险度管理。 近些年来,危险度评价的方法发展得很快,不断完善。由于该方法具有可定量、有预测性等优点,其应用范围不断扩大,如美国EPA先后颁布了有关致癌物、致突变物、发育毒物和生殖毒物等一系列危险度评价指南。 危险度评价已成为许多国家对各类化学毒物进行管理的重要手段。一

11、、基本概念一、基本概念:1、毒性（毒性（toxicity）:指化学物质造成机体损指化学物质造成机体损害的能力。害的能力。2、危险性（危险性（risk）即危险度）即危险度:指在特定条件下指在特定条件下,因接触某种水平的化学毒物而造成机体损伤、因接触某种水平的化学毒物而造成机体损伤、发生疾病甚至导致死亡的预期概率。发生疾病甚至导致死亡的预期概率。3、安全性安全性 (safety):安全性是指化学毒物在特安全性是指化学毒物在特定条件下不引起机体出现损害效应的概率。定条件下不引起机体出现损害效应的概率。危险度与安全性的关系危险度与安全性的关系: : 危险度危险度 安全性安全性化学毒物化学毒物 造成机体

12、损害造成机体损害 不引起机体出现损不引起机体出现损害害 效应效应 效应效应 的概率的概率 的概率的概率条条 件件 特定特定 特定特定 4、可接受的危险度（、可接受的危险度（acceptable risk）:是指公是指公众和社会在精神、心理等各方面均能承受的危众和社会在精神、心理等各方面均能承受的危险度。险度。5、实际安全剂量实际安全剂量(virtual safe dose,VSD)是指是指与可接受的危险度相对应的化学毒物的接触剂与可接受的危险度相对应的化学毒物的接触剂量。量。 表11-1 美国社会引起死亡率增加10-6的某些活动 活动 死 因 吸烟(1.4支/d) 肺 癌 饮酒(0.5l/d)

13、 肝硬化 煤矿井下劳动(lh/d) 煤尘肺 驾车旅行24Okm 车祸 空中旅行9600km 飞机失事 在纽约市居住2天 大气污染 6、危险度评价危险度评价(risk assessment)是在综合分是在综合分析人群流行病学调查、毒理学试验、环境监测析人群流行病学调查、毒理学试验、环境监测和健康监护等多方面研究资料的基础上和健康监护等多方面研究资料的基础上,对化学对化学毒物损害人类健康的毒物损害人类健康的潜在能力做定性和定量的潜在能力做定性和定量的评估评估,对评价过程中存在的不确定性进行描述与对评价过程中存在的不确定性进行描述与分析分析,进而判断损害可能发生的概率和严重程度。进而判断损害可能发生

14、的概率和严重程度。 目的目的是是确定可接受的危险度和确定可接受的危险度和VSD,为政府为政府管理部门正确地作出卫生和环保决策、制订相管理部门正确地作出卫生和环保决策、制订相应的管理法规和卫生标准提供科学依据。应的管理法规和卫生标准提供科学依据。 二、危险度评价二、危险度评价:危险度评价由四个部分组成危险度评价由四个部分组成: 危害认定、危害认定、 剂量剂量-反应关系评价、反应关系评价、 接触评定、接触评定、 危险度特征分析危险度特征分析(一一)、危害认定、危害认定 危害认定危害认定(hazard identification)是危险度是危险度评价的第一阶段评价的第一阶段,为定性评价阶段。为定性

15、评价阶段。目的目的:确定待评化学毒物在一定条件下与机确定待评化学毒物在一定条件下与机体接触后体接触后,能否产生损害效应能否产生损害效应;效应的性质、效应的性质、特点和强度如何特点和强度如何;化学毒物与损害效应之间化学毒物与损害效应之间有无因果关系。有无因果关系。1、危害性认定的科学依据、危害性认定的科学依据（1 1）、待评化学毒物的资料）、待评化学毒物的资料 化学结构与理化特性方面的资料化学结构与理化特性方面的资料; ; 用途、使用方式和范围等方面的资料用途、使用方式和范围等方面的资料; ; 在环境中的稳定性如何在环境中的稳定性如何, ,能否发生化学反应能否发生化学反应或转化为毒性更强或较弱的

16、衍生物的资料。或转化为毒性更强或较弱的衍生物的资料。结构结构-活性关系活性关系(structure-activity relationship,SAR)的研究对于危害认定可能具的研究对于危害认定可能具有重要意义。有重要意义。 通过分析化学物质的结构和含有的某些特通过分析化学物质的结构和含有的某些特殊基团常可估测其引起危害的潜力。如殊基团常可估测其引起危害的潜力。如N-亚硝亚硝基、芳香胺基、氨基偶氮和菲核结构等与致癌基、芳香胺基、氨基偶氮和菲核结构等与致癌活性有着密切的关联活性有着密切的关联,对于具有这些组成的化学对于具有这些组成的化学物质需高度重视其致癌能力的评价。物质需高度重视其致癌能力的评

17、价。 （2 2）、人群流行病学调查资料）、人群流行病学调查资料 优点优点: :资料直接反映损害作用资料直接反映损害作用, ,无须外推无须外推; ;可以获得接触者的主观感受以及精神和心理可以获得接触者的主观感受以及精神和心理状态方面的资料状态方面的资料; ;不确定因素少不确定因素少, ,易于确定因果关系易于确定因果关系; ;在危害性认定中具有决定性意义。在危害性认定中具有决定性意义。缺点缺点: :难以找到污染水平稳定难以找到污染水平稳定, ,且含有几个不同污且含有几个不同污染水平的现场染水平的现场; ;接触剂量难以准确估计。接触剂量难以准确估计。 环境中往往是多种有害因素同时存在环境中往往是多种

18、有害因素同时存在, ,不易不易控制控制; ;对于新合成的化学物质对于新合成的化学物质, ,因找不到接触人群因找不到接触人群而无法调查。而无法调查。 人类基因组计划的进展使人类基因组计划的进展使分子生物学标记分子生物学标记越来越多的应用于流行病学调查之中越来越多的应用于流行病学调查之中,把疾病把疾病与机体细胞内的分子改变紧密地联系起来与机体细胞内的分子改变紧密地联系起来,为为阐明其发生机制、探索危害的因果关系提供了阐明其发生机制、探索危害的因果关系提供了有效的手段。有效的手段。接触、效应和敏感性分子生物学接触、效应和敏感性分子生物学标记的应用不仅大大增加了人群调查资料的可标记的应用不仅大大增加了

19、人群调查资料的可靠性靠性,而且有助于减少人群之间、实验动物与而且有助于减少人群之间、实验动物与人之间资料外推的不确定性。人之间资料外推的不确定性。 资料来源资料来源:在职业性接触人群或环境污染区居民中进行在职业性接触人群或环境污染区居民中进行的调查的调查; 药物毒性的临床观察药物毒性的临床观察; 意外事故的原因追查意外事故的原因追查;对志愿人员的试验与检测等对志愿人员的试验与检测等 （3 3）、毒理学试验资料）、毒理学试验资料危险度评价的主危险度评价的主要依据。要依据。优点优点: :可以人为地控制实验条件可以人为地控制实验条件, ,排除许多混杂干排除许多混杂干扰因素的影响扰因素的影响; ;获得

20、比较确定的受试物与机体损害效应之间获得比较确定的受试物与机体损害效应之间的剂量反应关系和因果关系的剂量反应关系和因果关系; ;在以上基础上评价和预测对人体造成危害的在以上基础上评价和预测对人体造成危害的可能性。可能性。 体外试验体外试验: :常被用来筛检待评物质在致突变常被用来筛检待评物质在致突变和致癌方面的特殊毒性。和致癌方面的特殊毒性。 毒理学资料用于危险度评价的主要问题毒理学资料用于危险度评价的主要问题是是: :种属差异带来的不确定性。在把动物实种属差异带来的不确定性。在把动物实验结果外推至人时验结果外推至人时, ,必须十分慎重。必须十分慎重。 急性毒性试验: 体内 局部作用试验:毒 试

21、验 长期毒性试验:理 特殊毒性试验:学 代谢动力学:试验 体外 哺乳动物的组织、器官和细胞,微生 试验 物、植物和非哺乳动物等各种层次的多 种生物材料 2 2、危害性效应的分类、危害性效应的分类（1 1）、有阈值效应）、有阈值效应 有阈值效应有阈值效应: :化学物质对于机体产生的一般化学物质对于机体产生的一般毒效应毒效应, ,如引起生理生化过程的异常改变、病理如引起生理生化过程的异常改变、病理组织学的变化等组织学的变化等, ,只有达到某一剂量水平时才能只有达到某一剂量水平时才能发生发生, ,低于此剂量即检测不到。低于此剂量即检测不到。 对于有阈值效应评价时要注意选择最敏感的对于有阈值效应评价时

22、要注意选择最敏感的指标指标, ,特别是应该重视对于中枢神经等系统和肝、特别是应该重视对于中枢神经等系统和肝、肾等重要器官的损害作用。肾等重要器官的损害作用。 化学毒物作用于生殖细胞、胚胎或胎儿化学毒物作用于生殖细胞、胚胎或胎儿,导导致细胞死亡、生物合成减少、分化程度改变、致细胞死亡、生物合成减少、分化程度改变、形态发育障碍形态发育障碍,最终表现为胚胎死亡、生长迟缓、最终表现为胚胎死亡、生长迟缓、畸形和功能不全畸形和功能不全,视为发育毒性或胚胎毒性。对视为发育毒性或胚胎毒性。对于此类毒物目前尚缺少权重分类标准于此类毒物目前尚缺少权重分类标准,但一般认但一般认为有阈剂量存在为有阈剂量存在,故也应按

23、有阈值毒物进行评价。故也应按有阈值毒物进行评价。 （2 2）、无阈值效应）、无阈值效应无阈值效应无阈值效应: :化学毒物的致癌作用以及致体细胞化学毒物的致癌作用以及致体细胞和生殖细胞突变和生殖细胞突变的作用在零以上的任何剂量均的作用在零以上的任何剂量均可发生可发生, ,即具有零阈剂量即具有零阈剂量- -反应关系。反应关系。IARC IARC 分类标准中分类标准中2B2B组以上或组以上或EPAEPA分级标准中分级标准中C C级级以上的化学毒物可以认为是致癌物以上的化学毒物可以认为是致癌物; ;EPAEPA凡能引凡能引起生殖细胞基因点突变和或染色体结构重排起生殖细胞基因点突变和或染色体结构重排的化

24、学毒物都具有零阈值。对于的化学毒物都具有零阈值。对于IARC or EPAIARC or EPA提提出的物质都应按照无阈值毒物进行危险度评价。出的物质都应按照无阈值毒物进行危险度评价。（二）、剂量二）、剂量- -反应关系评价反应关系评价 剂量反应关系评价剂量反应关系评价（dosedoseresponse response assessmentassessment）是危险度评价的第二阶段）是危险度评价的第二阶段, ,又是定又是定量危险度评价（量危险度评价（quantitative risk quantitative risk assessmentassessment）的第一步。）的第一步。目的目

25、的: :在认定待评物质具有危害性的基础上在认定待评物质具有危害性的基础上, ,阐阐明不同剂量水平的待评物质与接触群体中出现明不同剂量水平的待评物质与接触群体中出现的最为敏感的关键性的有害效应发生率之间的的最为敏感的关键性的有害效应发生率之间的定量关系定量关系, ,确定特定接触剂量下评价人群危险度确定特定接触剂量下评价人群危险度的基准值的基准值(criteria)(criteria)。1 1、有阈值化学毒物的剂量、有阈值化学毒物的剂量反应关系评价反应关系评价有阈值化学毒物的剂量一反应评价方法即有阈值化学毒物的剂量一反应评价方法即安全安全评价法评价法。通过评价确定待评物质不引起机体出现任何有通过评

26、价确定待评物质不引起机体出现任何有害效应的最高剂量（害效应的最高剂量（NOAELNOAEL）或出现有害效应的）或出现有害效应的最低剂量（最低剂量（LOAELLOAEL）, ,作为基准值来评价危险人作为基准值来评价危险人群在某种接触剂量下的危险度群在某种接触剂量下的危险度, ,并估算该物质在并估算该物质在各种环境介质中的最高容许浓度。各种环境介质中的最高容许浓度。（1 1）、参考剂量（）、参考剂量（reference dosereference dose, ,RfDRfD） RfDRfD在概念在概念上类似于每日容许摄入量（上类似于每日容许摄入量（ADIADI）, ,为日平均接触剂量的为日平均接触

27、剂量的估计值。估计值。RfDRfD的单位为的单位为mgmg(kgd(kgd）。）。（2 2）、不确定系数（）、不确定系数（uncertainty factoruncertainty factor, ,UFUF）即安全即安全系数（系数（SFSF）。在计算）。在计算RfDRfD时时, ,应把实验动物的应把实验动物的NOAELNOAEL或或LOAELLOAEL缩小一定倍数缩小一定倍数来校正误差来校正误差, ,确保安全。确保安全。（3 3）、确定）、确定RfDRfD时需要考虑的问题时需要考虑的问题首先对人群流行病学调查资料与毒理学动物实验结果首先对人群流行病学调查资料与毒理学动物实验结果进行分析进行分

28、析, ,明确剂量反应关系明确剂量反应关系, ,确定确定NOAELNOAEL或或LOAELLOAEL; ;用用NOAELNOAEL或或LOAELLOAEL除以不确定系数除以不确定系数UFUF（可分为标准化不（可分为标准化不确定系数确定系数UFsUFs和修正系数和修正系数MFMF）。）。计算公式如下计算公式如下:RfD=NOAEL:RfD=NOAEL或或LOAEL/LOAEL/UfsUfsMFMF影响UFs数值的因素:1)人群中个体敏感性的变异带来的不确定性,取10倍系数。2)从实验动物资料外推到人的不确定性,取10倍系数。3)从亚慢性毒性试验资料推导慢性毒性试验结果的不确定性,最大可取10倍系数

29、。4)当以LOAEL替代NOAFT计算RfD时,最大可取10倍系数。5)当用于推导的资料库不完整(如受试物种太少,缺乏生殖毒性资料等),最大可取10倍系数。修正系数: MF取值为10,主要考虑研究的科学性以及上面各项未能包括的不确定因素,如有无作用机制方面的资料、待测物质所致实验动物的损害作用是否与人类相似等。当研究中的不确定因素可由UFS予以充分估计时,MF取值为1。 如果以上各项均取最大值10的话,其乘积将达到1,000,000,即100万倍。 美国EPA发表的有阈值化学毒物的RfD中,大多数UFs为21000。UFs太大,说明毒性资料收集的不完全,不确定因素过多,因而计算所得的RfD的精

30、确性也差,缺乏可信度。 （4 4）、基准剂量（）、基准剂量（benchmark dosebenchmark dose, ,BMDBMD） BMDBMD是一个可使化学毒物有害效应的反应率是一个可使化学毒物有害效应的反应率稍有升高的剂量的稍有升高的剂量的9595可信限下限值。该反应可信限下限值。该反应率可以人为确定率可以人为确定, ,通常选择通常选择1%1%、5%5%或或10%10%。计算计算RfDRfD的公式为的公式为: : RfD = BMD / UFs RfD = BMD / UFs MF MF优点优点: 它是依据剂量它是依据剂量-反应关系曲线的所有数据计反应关系曲线的所有数据计算获得的算获

31、得的,而不是仅仅依据一个点值而不是仅仅依据一个点值,在可靠性与在可靠性与准确性上都大大提高了准确性上都大大提高了; BMD要计算反应剂量要计算反应剂量95%可信限的下限值。可信限的下限值。就需要把试验组数、每组实验动物数以及终点指就需要把试验组数、每组实验动物数以及终点指标观察值的离散度等均考虑在内。如果资料的质标观察值的离散度等均考虑在内。如果资料的质量不高量不高(每组受试对象少或反应的变异大每组受试对象少或反应的变异大),则可信则可信限会很宽限会很宽,BMD也相应降低也相应降低,反映出有较大的不确反映出有较大的不确定性存在定性存在,反之亦然。反之亦然。 对于未直接观察到对于未直接观察到NO

32、AEL的试验结果的试验结果,仍可仍可通过计算求出通过计算求出BMD。 BMD既可通过分组的计数资料获得既可通过分组的计数资料获得,也可通也可通过连续的计量资料获得过连续的计量资料获得,故应用范围更为广泛。故应用范围更为广泛。 2 2、无阈值化学毒物的剂量、无阈值化学毒物的剂量- -反应关系评价（复反应关系评价（复杂杂） 进行评价的关键问题是确定低剂量范围内进行评价的关键问题是确定低剂量范围内的剂量的剂量反应关系反应关系, ,在此基础上预测危险人群在在此基础上预测危险人群在特定接触水平下发生癌症的危险度。特定接触水平下发生癌症的危险度。 化学毒物的致突变和致癌作用主要靠毒理化学毒物的致突变和致癌

33、作用主要靠毒理学鉴定程序来认定学鉴定程序来认定,在把动物实验结果应用于人在把动物实验结果应用于人时时,不仅存在种属差异不仅存在种属差异,而且存在高剂量向低剂量而且存在高剂量向低剂量外推的问题。许多化学毒物在高、低剂量下的外推的问题。许多化学毒物在高、低剂量下的毒效应是不一样的。毒效应是不一样的。 毒效应性质相同的化毒效应性质相同的化学毒物学毒物,在低剂量区的剂在低剂量区的剂量量-反应曲线也有不同形反应曲线也有不同形式式,如超线性、线性、次如超线性、线性、次线性等线性等,而毒理学研究往而毒理学研究往往不能提供这部分资料往不能提供这部分资料,只能通过外推模型予以估只能通过外推模型予以估测。但在使用

34、不同外推模测。但在使用不同外推模型对同一试验资料进行估型对同一试验资料进行估测时测时,常有很大差异。常有很大差异。模型模型:(1)概率分布模型概率分布模型(Probability distribution models):这类模型包括概率单位模型这类模型包括概率单位模型(Probit model)、Logistic模型和模型和Weibull模型。模型。(2)机制模型机制模型(mechanistic models):是基于是基于人们对于化学毒物致癌机制的认识而建立的。人们对于化学毒物致癌机制的认识而建立的。 一次打击模型一次打击模型(one-hit model) 多次打击模型多次打击模型(mul

35、ti-hit model) 线性多阶段模型线性多阶段模型(linear multi-stage model)(3)以生理学为基础的毒物动力学模型以生理学为基础的毒物动力学模型(Physiologically based toxicokinetic model,PB-TK):各各种数学模型都是在接触剂量的基础上进行外推种数学模型都是在接触剂量的基础上进行外推,但真正引起效应的却是作用部位处化学毒物的但真正引起效应的却是作用部位处化学毒物的水平水平(靶剂量靶剂量)。由于机体吸收、分布、代谢、排。由于机体吸收、分布、代谢、排泄诸过程的影响泄诸过程的影响,靶剂量与接触剂量并不总是平靶剂量与接触剂量并不

36、总是平行的行的,这样以后者为基础作外推势必造成较大的这样以后者为基础作外推势必造成较大的不确定性。不确定性。 (4)以生物学为基础的剂量以生物学为基础的剂量-反应模型反应模型(biologically based dose-response model,BBDR): 该模型通过把细胞的某些生物学特征该模型通过把细胞的某些生物学特征,如如细胞周期动力学、细胞的生成和死亡率、细细胞周期动力学、细胞的生成和死亡率、细胞的克隆扩增、代谢酶的活性、受体结合水胞的克隆扩增、代谢酶的活性、受体结合水平等参数结合于机制模型中平等参数结合于机制模型中,使之替代原有模使之替代原有模型中的缺省值和计算机求出的模拟值

37、型中的缺省值和计算机求出的模拟值,以求更以求更准确地反映特定肿瘤形成过程中的生物学变准确地反映特定肿瘤形成过程中的生物学变化。化。 ( (三三) )、接触评定、接触评定接触评定（接触评定（exposure assessmentexposure assessment）是危险度评价是危险度评价的的第三个阶段第三个阶段。目的目的: :是确定危险人群接触待评化学毒物的总量并是确定危险人群接触待评化学毒物的总量并阐明接触特征阐明接触特征, ,为危险度评价提供可靠的接触数据为危险度评价提供可靠的接触数据或估测值。如经此阶段认定待评化学毒物与人群或估测值。如经此阶段认定待评化学毒物与人群无接触或虽有接触但不

38、能引起健康危害无接触或虽有接触但不能引起健康危害, ,则危险度则危险度评价可不再向下进行。评价可不再向下进行。接触评定接触评定涉及到环境有害物质与接触人群两方面涉及到环境有害物质与接触人群两方面: :对于待评物质对于待评物质: :要弄清它的来源、在环境中存在要弄清它的来源、在环境中存在的总量以及在不同介质（空气、水体、土壤和食的总量以及在不同介质（空气、水体、土壤和食物）中的分布、转运、转化的情况和消长规律。物）中的分布、转运、转化的情况和消长规律。对于接触人群对于接触人群: :不仅要掌握人数、构成、范围等不仅要掌握人数、构成、范围等资料资料, ,而且要特别注意抽样的代表性问题。而且要特别注意

39、抽样的代表性问题。 人群接触剂量的估测人群接触剂量的估测应考虑到不同途径应考虑到不同途径的吸收系数的影响及多途径进入机体的吸收系数的影响及多途径进入机体的问题。的问题。 对于对于无阈值化学毒物无阈值化学毒物: :一般假设为人群一般假设为人群或动物短期内接触高剂量的致癌物与终生持或动物短期内接触高剂量的致癌物与终生持续接触低剂量的致癌物结果相同续接触低剂量的致癌物结果相同, ,基于这种基于这种假设就可以用公式来计算人群或动物终生日假设就可以用公式来计算人群或动物终生日均接触剂量率。均接触剂量率。 接触剂量与靶器官剂量并非总是平行接触剂量与靶器官剂量并非总是平行, ,而而只有后者才能引起损害效应只

40、有后者才能引起损害效应, ,故估测接触剂量故估测接触剂量时要结合健康效应进行。生物学标记的监测时要结合健康效应进行。生物学标记的监测对于接触水平的准确评价常具有重要的意义。对于接触水平的准确评价常具有重要的意义。 （四）、危险度特征分析（四）、危险度特征分析危险度特征分析（危险度特征分析（risk characterizationrisk characterization）是危）是危险度评价的险度评价的最后总结阶段最后总结阶段。目的目的: :通过对前三个阶段的评定结果进行综合、分通过对前三个阶段的评定结果进行综合、分析、判断析、判断, ,估算待评化学毒物在接触人群中引起危估算待评化学毒物在接触

41、人群中引起危害概率（即危险度）的估计值害概率（即危险度）的估计值, ,并以文件的形式阐并以文件的形式阐明该物质可能引起的公众健康问题明该物质可能引起的公众健康问题, ,为政府管理机为政府管理机构决策提供科学依据。构决策提供科学依据。 （五）、危险度评价中的不确定因素（五）、危险度评价中的不确定因素较多较多1 1、危害性认定与剂量、危害性认定与剂量反应关系评价阶段反应关系评价阶段 将动物实验结果应用于人的危险度评价时将动物实验结果应用于人的危险度评价时, ,存存在实验动物资料向人外推、高剂量向低剂量外推、在实验动物资料向人外推、高剂量向低剂量外推、较短染毒时间向长期持续接触外推、毒代动力学较短染

42、毒时间向长期持续接触外推、毒代动力学和毒效动力学资料不足等不确定因素。和毒效动力学资料不足等不确定因素。2 2、在接触评定阶段、在接触评定阶段 在接触评定阶段在接触评定阶段,由于人体可经由多个途由于人体可经由多个途径接触化学毒物径接触化学毒物,在一生中的不同阶段接触化在一生中的不同阶段接触化学毒物的数量与种类也不相同学毒物的数量与种类也不相同,会给接触总量会给接触总量的估测带来很大的不确定性。另外的估测带来很大的不确定性。另外,如果样本如果样本抽取的大小和代表性不合适抽取的大小和代表性不合适,也会产生不确定也会产生不确定性。性。 如何处理: 对于这些不确定因素,在进行危险度评价之前就应予以充分

43、的估计,并采取积极可靠的措施尽量将其控制到最小程度。对于无法消除的不确定因素要在报告中明确提出并进行分析讨论,使政府管理机构对于评价结果的有效性能做出正确的判断,以便进行公共卫生决策。三三 、危险度管理、危险度管理 危险度管理危险度管理: :是以危险度评价的结果为依据是以危险度评价的结果为依据, ,综合考虑社会发展的实际需要以及公共卫生、经综合考虑社会发展的实际需要以及公共卫生、经济、工程、法律、政治等多方面因素济、工程、法律、政治等多方面因素, ,进行费用进行费用效益分析效益分析, ,确定可接受的危险度确定可接受的危险度, ,制订有效的法规制订有效的法规条例和管理措施并予以实施条例和管理措施

44、并予以实施, ,以达到保护人民群众以达到保护人民群众身体健康的目的。身体健康的目的。停用化学物停用化学物 毒性较高毒性较高, ,易于造成环境污染和危害人易于造成环境污染和危害人体健康体健康, ,又并非工农业生产所必须（如有替又并非工农业生产所必须（如有替代品）的化学毒物代品）的化学毒物, ,可认为弊大于利可认为弊大于利, ,禁止禁止其继续使用。其继续使用。控制化学物控制化学物 虽然对于人体可能造成一定的危害虽然对于人体可能造成一定的危害, ,但由但由于是重要的工业原料于是重要的工业原料, ,在国民经济建设中具有在国民经济建设中具有多种用途多种用途, ,可以产生很大的社会和经济效益可以产生很大的

45、社会和经济效益, ,又没有其它适宜的物质可以取代又没有其它适宜的物质可以取代, ,经过综合分经过综合分析之后可认为利大于弊析之后可认为利大于弊, ,可以继续使用可以继续使用, ,但但必必须建立相应的控制和管理措施须建立相应的控制和管理措施, ,使其对环境与使其对环境与健康的危害低于可接受的危险度水平如铅、健康的危害低于可接受的危险度水平如铅、汞、锰等重金属。汞、锰等重金属。 这些措施包括制订和执行特定化学毒物这些措施包括制订和执行特定化学毒物的卫生标准的卫生标准,对生活和生产环境进行监测对生活和生产环境进行监测,对接对接触人群进行观察监护以及为控制危害发生将触人群进行观察监护以及为控制危害发生

46、将要采取的工程技术措施等。要采取的工程技术措施等。 在制订措施的时候在制订措施的时候,要密切结合国情要密切结合国情,抱着抱着科学、严谨、实事求是的态度科学、严谨、实事求是的态度,充分考虑社会充分考虑社会各方面的承受能力各方面的承受能力,把危险度控制在一个合理把危险度控制在一个合理的水平上。的水平上。 第二节第二节 毒理学安全性评价毒理学安全性评价的概念及意义的概念及意义 进行安全性毒理学评价的必要性和紧迫性进行安全性毒理学评价的必要性和紧迫性:1、20世纪以来人类在日常生活和生产中接触世纪以来人类在日常生活和生产中接触和使用的新化学品与日俱增和使用的新化学品与日俱增;2、新化学品和已登记的化学

47、品之比为、新化学品和已登记的化学品之比为500万万:10万（其中万（其中7万种常用）万种常用）;3、新化学品正以每年、新化学品正以每年1000种的速度不断涌现种的速度不断涌现,直接威胁到人们的身体健康。直接威胁到人们的身体健康。一、基本概念: 毒理学安全性评价毒理学安全性评价(toxicological safety evaluation):是通过动物试验和对人群的观察,阐明待评物质的毒性及潜在的危害,决定其能否进入市场或阐明安全使用的条件,以达到最大限度的减小其危害作用、保护人民身体健康的目的。 安全性评价需按一定的程序进行,通过一系列的毒理学试验,获得NOAEL或LOAEL。在此基础上,根

48、据待评物质的毒作用性质、特点、剂量-反应关系及人群实际接触情况等,进行综合分析,确定安全系数。用NOAEL或LOAEL除以安全系数,可以制定安全限值,即化学物的卫生标准。二、安全性评价程序的概况及意义二、安全性评价程序的概况及意义 国内外安全性评价概况国内外安全性评价概况国外国外 公元前公元前18世纪世纪 汉谟拉比法典汉谟拉比法典20世纪初叶以来世纪初叶以来 美、法、德等国制订和颁布了关于美、法、德等国制订和颁布了关于有毒化学品的管理法规有毒化学品的管理法规第二次世界大战后第二次世界大战后 许多国家和组织先后制订了有毒化许多国家和组织先后制订了有毒化学品的管理法学品的管理法FDA 1979年年

49、 联邦食品、药物和化妆品法案联邦食品、药物和化妆品法案OECD 1982年年 颁布了化学物品管理法颁布了化学物品管理法 国内国内 五六十年代五六十年代 食品、药品等曾作过初步的法律规定食品、药品等曾作过初步的法律规定80年代后年代后 迅速发展迅速发展（1）1994.8.10 食品安全性毒理学评价程序食品安全性毒理学评价程序（83）2003（2）1995.8.17 农药登记毒理学试验方法农药登记毒理学试验方法 （91）（3）1994. 新药（西药）毒理学研究指导原则新药（西药）毒理学研究指导原则（85）（4）1987.5.28 化妆品安全性评价程序和方法化妆品安全性评价程序和方法（5）1993.

50、5 食品功能毒理学评价程序和检验方法食品功能毒理学评价程序和检验方法(试行试行)（6）1987 化学危险品安全管理条例化学危险品安全管理条例 1999.3 制定了关于健康相关产品的审批工作程序制定了关于健康相关产品的审批工作程序 (8) 2003. 食品功能毒理学评价程序和检验方法食品功能毒理学评价程序和检验方法（9）2000. 化学毒性鉴定管理规范化学毒性鉴定管理规范 卫生法规是卫生行政管理部门执法的依据,而毒理学安全性评价又是制定卫生法规的重要根据与基础。尽管世界各国因各自的国情不同,制定卫生法规的原则与标准会有所差异,但对化学物质的安全性评价无一例外地成为卫生法规中的基本内容。 毒理学安

51、全性评价的程序与内容并非一成不变,而是随着社会、经济和科技的发展逐渐得以完善。 进行毒理学测试和研究的要求进行毒理学测试和研究的要求:1、动物、动物 合格动物（须在二级以上动物房饲合格动物（须在二级以上动物房饲 养、繁殖并取得动物合格证）养、繁殖并取得动物合格证）2、环境、环境 二、三、四级动物房（已取得环境合二、三、四级动物房（已取得环境合 格证）格证）3、实验、实验 按按GLP标准进行标准进行4、程序、程序 不同化学物质按相应的测试程序进行不同化学物质按相应的测试程序进行5、评价、评价 根据实验结果结合其它各方面情况进根据实验结果结合其它各方面情况进 行行二、二、 毒理学安全性评价程序的内

52、容毒理学安全性评价程序的内容 (一一)、毒理学安全性评价程序的选用原则毒理学安全性评价程序的选用原则1、根据化学物的种类和用途来、根据化学物的种类和用途来选择相应的程序选择相应的程序;2、采用分阶段进行的原则采用分阶段进行的原则,优先安排试验周期优先安排试验周期短、费用低、预测价值高的试验短、费用低、预测价值高的试验;3、在最短的时间内、在最短的时间内,用最经济的办法用最经济的办法,取得最可取得最可靠的结果。靠的结果。 （二）、试验前的准备工作（二）、试验前的准备工作 1、收集化学物质有关的基本资料收集化学物质有关的基本资料 化学结构化学结构 组成成分和杂质理化性质组成成分和杂质理化性质化学物

53、的定量分析方法原料和中间体化学物的定量分析方法原料和中间体2、了解化学物质的使用情况了解化学物质的使用情况 包括使用方式及人体接触途径、用途及包括使用方式及人体接触途径、用途及使用范围、使用量使用范围、使用量,化学物质所产生的社会效化学物质所产生的社会效益、经济效益和人群健康效益等。益、经济效益和人群健康效益等。3、试验选用人类实际接触和应用的产品试验选用人类实际接触和应用的产品:受试物受试物用用工业品或市售商品工业品或市售商品,而不是纯化学品。而不是纯化学品。4、选择实验动物的要求选择实验动物的要求实验动物选择原则实验动物选择原则:(1)对受试物的代谢方式应尽可能与人类相近对受试物的代谢方式

54、应尽可能与人类相近;(2)优先考虑哺乳类的杂食动物优先考虑哺乳类的杂食动物;(3)兼顾敏感、体小、寿短、价廉、易养的可能兼顾敏感、体小、寿短、价廉、易养的可能;(4)最好采用纯系动物或杂交动物。最好采用纯系动物或杂交动物。2021/3/2369(三三)、不同阶段安全性评价的毒理学项目、不同阶段安全性评价的毒理学项目1.第一阶段第一阶段 包括急性毒性试验和局部毒性试验。包括急性毒性试验和局部毒性试验。主要是测定主要是测定LD50或或LC50,对受试物的急性毒性进对受试物的急性毒性进行分级行分级,为其他试验的剂量设计提供参数为其他试验的剂量设计提供参数,根据毒根据毒作用的性质、特点推测靶器官。作用

55、的性质、特点推测靶器官。 试验通常要求使用两种动物试验通常要求使用两种动物,染毒途径应为染毒途径应为受试物与人体的可能接触途径。受试物与人体的可能接触途径。 农药、化妆品等可能与皮肤或眼接触的化农药、化妆品等可能与皮肤或眼接触的化学物质还要求进行皮肤、粘膜刺激试验、眼刺学物质还要求进行皮肤、粘膜刺激试验、眼刺激试验、皮肤致敏试验、皮肤光毒和光变态反激试验、皮肤致敏试验、皮肤光毒和光变态反应试验等。应试验等。 2.第二阶段第二阶段 一般包括一般包括蓄积试验和致突变试验蓄积试验和致突变试验。 试验目的试验目的:是了解受试物与机体多次接触是了解受试物与机体多次接触后在体内的蓄积情况及可能造成的潜在危

56、害后在体内的蓄积情况及可能造成的潜在危害,并并判断受试物是否具有致突变性判断受试物是否具有致突变性,进而估测其致癌进而估测其致癌危险性。危险性。 致突变试验包括原核细胞基因突变试验、致突变试验包括原核细胞基因突变试验、真核细胞染色体畸变试验、微核试验或骨髓细真核细胞染色体畸变试验、微核试验或骨髓细胞染色体畸变分析等胞染色体畸变分析等,需要几个试验组联合使用需要几个试验组联合使用,以观察不同的以观察不同的遗传学终点遗传学终点。常选的致突变试验组合常选的致突变试验组合 Ames试验、试验、 小鼠骨髓多染红细胞微核试验（或骨髓小鼠骨髓多染红细胞微核试验（或骨髓 细胞染色体畸变分析）、细胞染色体畸变分

57、析）、 显性致死试验（或睾丸生殖细胞染色体显性致死试验（或睾丸生殖细胞染色体 畸变分析）畸变分析） 3.第三阶段第三阶段 一般包括亚慢性毒性试验、生殖与一般包括亚慢性毒性试验、生殖与发育毒性试验和代谢试验。发育毒性试验和代谢试验。 亚慢性毒性试验是为了确定较长时间内反亚慢性毒性试验是为了确定较长时间内反复接触受试物所引起的毒效应强度、性质和靶器复接触受试物所引起的毒效应强度、性质和靶器官官,初步估计初步估计LOAEL和和NOAEL,预测对人体健康预测对人体健康的危害性的危害性,并为慢性毒性试验和致癌试验的剂量并为慢性毒性试验和致癌试验的剂量设计和指标选择提供参考依据。设计和指标选择提供参考依据。