上海生物沪教等级考动物细胞工程学习教案

1、上海生物沪教等级考动物细胞工程上海生物沪教等级考动物细胞工程第一页，编辑于星期一：九点 二十五分。植物细胞工程动物细胞工程植物体细胞杂交/细胞融合技术植物组织培养技术1、动物组织和细胞培养技术 2、动物细胞融合技术3、动物细胞核移植技术4、动物胚胎移植技术5、干细胞技术细胞工程类型 6、动物克隆技术第1页/共25页第二页，编辑于星期一：九点 二十五分。去核卵细胞细胞核移植技术体细胞的核重组细胞早期胚胎代孕羊子宫克隆羊动物组织和细胞培养技术胚胎移植技术动物克隆过程：证明动物的体细胞的核具有全能性采用卵细胞的原因：卵细胞体积大易操作；可能含有促进分化的物质如何把体细胞的核移植到去核卵细胞中？显微注

2、射法第2页/共25页第三页，编辑于星期一：九点 二十五分。一、动物组织和细胞培养1、概念：动物组织和细胞培养是从动物体内分离出组织或细胞，在无菌、适宜的温度和营养条件下，使组织或细胞生长和繁殖的一门技术。第3页/共25页第四页，编辑于星期一：九点 二十五分。2、过程：动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液胰蛋白酶细胞培养单个细胞加培养液动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。（分解弹性纤维）细胞或细胞产物第4页/共25页第五页，编辑于星期一：九点 二十五分。3. 应用 （1）培养健康细胞，用于临床治疗如：皮肤移植（2）生产蛋白质等生物

3、制品如：病毒疫苗、抗体、酶等（3）细胞的生理、药理、病理研究如：体外培养的癌细胞进行 实验，提取抗癌药物 第5页/共25页第六页，编辑于星期一：九点 二十五分。4. 条件（1）无菌环境（2）营养:（3）温度和PH（4）有氧环境 葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清第6页/共25页第七页，编辑于星期一：九点 二十五分。二、动物细胞融合思考：动物正常的生命活动中有细胞融合的过程吗？ 受精作用第7页/共25页第八页，编辑于星期一：九点 二十五分。细胞A细胞B杂种细胞生物法物理法化学法灭活的仙台病毒电刺激等聚乙二醇第8页/共25页第九页，编辑于星期一：九点 二十五分。三、单克隆抗体 （动物细胞融合

4、最有价值的成就）B淋巴细胞特点:骨髓瘤细胞特点:能产生特异性抗体,但不能在体外无限增殖能无限增殖,但不能产生特异性抗体杂交瘤细胞特点：既能产生单一抗体，又能在体外无限增殖第9页/共25页第十页，编辑于星期一：九点 二十五分。 1、单克隆抗体(可特异性消灭某种抗原)制备过程 注射某一种抗原B淋巴细胞骨髓瘤细胞细胞融合、筛选杂交瘤细胞细胞培养筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞体外培养单克隆抗体为什么要注射某抗原？为获得能产生某特异性抗体的B淋巴细胞为什么筛选？细胞融合后培养液中有几种细胞？B BB B瘤 瘤瘤 瘤因为老鼠体内不可能只有一种B淋巴细胞第10页/共25页第十一页，编辑于星期一：九点 二十五

5、分。2、单克隆抗体的概念：由单个杂交瘤细胞增殖产生的杂交瘤细胞群持续分泌的成分单一的特异性抗体。3、单克隆抗体的特点：特异性强；灵敏度高（纯度高）第11页/共25页第十二页，编辑于星期一：九点 二十五分。4、单克隆抗体的应用：用于疾病的诊断和治疗如：鉴定和区分各种抗原； 制成“生物导弹(单克隆抗体+药物)”， 治疗癌症。第12页/共25页第十三页，编辑于星期一：九点 二十五分。1. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ ） 淋巴细胞小鼠骨髓瘤细胞B淋巴细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞杂交瘤细胞A

6、BC D C第13页/共25页第十四页，编辑于星期一：九点 二十五分。 下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌的实验方案2、该方案能达到预期效果吗？为什么？4、图中B为_过程，该细胞继承_的遗传特性，既能_,又能_。1、该实验方案的目的是_3、A是从小鼠的脾脏中取得_,该细胞能够产生_制备单克隆抗体B淋巴细胞抗体细胞融合双亲细胞分泌抗体无限增殖B体外培养骨髓瘤细胞杂交瘤细胞足够数量的细胞群注射到小鼠腹腔AC不能没有预先注射某一种抗原第14页/共25页第十五页，编辑于星期一：九点 二十五分。四、细胞核移植1、概念将一种细胞的细胞核移植另一种去核的细胞中的技术。 2、过程体细胞核去

7、核卵细胞移植重组细胞组织培养胚胎移植幼体如何把细胞核移植到去核卵细胞中呢？P106：显微注射法第15页/共25页第十六页，编辑于星期一：九点 二十五分。3、应用创造出无性杂交的生物新品种。如：克隆羊、牛如：鲤鲫核质杂交鱼四、细胞核移植第16页/共25页第十七页，编辑于星期一：九点 二十五分。2、过程动物排卵体外受精胚胎母体子宫新个体培育移植超数排卵技术：五.动物胚胎移植注射促激素第17页/共25页第十八页，编辑于星期一：九点 二十五分。胚胎分割移植：采用机械方法将早期胚胎切割成2等份,4等份或8等份等,经移植获得同卵双胎或多胎的技术.五.动物胚胎移植第18页/共25页第十九页，编辑于星期一：九

8、点 二十五分。4.类型胚胎干细胞成体干细胞多能干细胞单能干细胞如:造血干细胞如:神经干细胞六. 干细胞技术第19页/共25页第二十页，编辑于星期一：九点 二十五分。是胚胎干细胞早期胚胎具有全能性，胚胎干细胞不同的培养条件分化成不同类型的细胞第20页/共25页第二十一页，编辑于星期一：九点 二十五分。六. 干细胞技术第21页/共25页第二十二页，编辑于星期一：九点 二十五分。卵细胞母绵羊母绵羊乳腺细胞细胞质细胞核细胞核移植早期胚胎C母绵羊子宫胚胎移植多莉羊分娩妊娠动物克隆过程融合后的细胞动物组织细胞培养技术第22页/共25页第二十三页，编辑于星期一：九点 二十五分。细胞的全能性细胞株、细胞系植物体培养结果获得细胞或细胞产物快速繁殖、培育无病毒植株等培养目的葡萄糖、动物血清蔗糖、植物激素培养基特有成分液体培养基固体培养基培养基性质细胞增殖原理动物细胞培养植物组织培养比较项目5、植物组织培养和动物组织细胞培养的比较第23页/共25页第二十四页，编辑于星期一：九点 二十五分。比较项目比较项目植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞融合动物细胞融合细胞融合原理细胞融合原理细胞膜的流动性、细胞膜的流动性、 细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞融合的方法细胞融合的方法 去除细胞壁后诱导去除细胞壁后诱导原生质体融合原生质体融合使细胞分散后诱使细胞分散后诱导细胞融合导细胞融合诱