水质总大肠菌群和粪大肠菌群纸片快速法检测方法确认表

1、方法名称水质总大肠菌群和粪大肠菌群的测定（纸片快速法）申请人项目负责人员制定原因验证检测方法符合实验室要求、确保数据准确性匕后效性方法适用范围适用于地表水、地下水及废水中的总大肠菌群和粪大肠菌群的快速测定。方法来源HJ755-2015水质总大肠菌群和粪大肠菌群的测定纸片快速法仪器、试剂和环境的要求1 .仪器和设备1.1 局压蒸汽灭菌器1.2 比养箱1.3 冰箱1.4 采样瓶1.5 试管1.6 水质总大肠菌群和粪大肠菌群测试纸片2 .试剂：2.1硫代硫酸钠2.2乙二胺四乙酸二钠采样和测试过程中，所用到的玻璃器皿需灭菌后方可使用。方法描述按MP法，将一定量的水样以无菌操作的方式接种到吸附有适量指示

2、剂（澳甲酚紫和2,3,5-氯化三苯四氮晚即TTQ以及乳糖等营养成分的无菌滤纸上，在特定的温度（37c或44.5C）培养24h,当细菌生长繁殖时，产酸使pH®降低，澳甲酚紫指示剂由紫色变黄色，同时，产气过程相当的脱氢酶在适宜的pH£围内，催化底物脱氢还原TT3成红色的不溶性二苯甲（TTF）。即可在产酸后的黄色背景下显示出红色斑点（或红晕）。通过上述旨示剂的颜色变化就口对是否产酸产气作出判断，从而确定是否启后大肠困群或窕大肠菌群存在，再通过查MP潴就可得出相应总大肠菌群或粪大肠菌群的浓度值。检测结果的判断1.结果判读：(1)制片上出现红斑或红晕且周围变黄，为阳性。(2)纸片全片

3、变黄，无红斑或红晕，为阳性。(3)纸片部分变黄，无红斑或红晕，为阴性。(4)纸片的紫色背景上出现红斑或红晕，而周围/、变黄，为阴性。(5)纸片无变化，为阴性。2 .结果计算：根据不同接种量的阳性纸片数量，查MPBft得到MP值，按公式换算并报告1L水样中总大肠菌群或粪大肠菌群数：C=100*M/Q式中：C-水样总大肠菌群或粪大肠菌群浓度(MPN/LM-查MPN!得到的MPN6(MPN/100ml)Q-实际水样最大接种量(ml)100为10*10ml,其中，10将MPN6的单位MPN/100R#换为MPN/L10ml为MPN!中最大接种量。3 .结果表小：测定结果保留二位:有效数字，大于等于10

4、0时以科学计数法表示，结果的单位为MPN/L平均值以儿何平均计算。附件说明表1运行说明经验证该方法符合我实验室使用。审批意见技术经理：日期：总经理：日期：表1附录B（法料性附录）最大可能数（MPN）哀（水悻接和量为5份10mL5份1ml.5UtO.Iml）备31种全阳性向散MPN100ml95、置信玉篙出种i阳性份故MPN100ml95。就信双10mlImi0.1ml下限±l«10m】Im)01ml下以上以000<230081190012<0.573011122500.4<0,573013331003530316004730420005930523010一

5、<0.57310112一250114<0.51131114434016<0,51531一175460I3731320660014931423015ll315270204<0.511320144340216<0,5153211754602273*22066002393一32402411324270一5133一5310306<0.5153301754603173312!7630329332240331133328034133343203515335360408340217630419341248720421134一280431334332多接种习住份数MPN.I

6、OOml9空。置信双各搔和量不住伤数MPN100ml95。置信基10n)l1ml0.1nd下限上限10ml1ml0.1ml下梁±R404415344360451734540050935025g75051II3512905213352320531535337054173544105519355451002<0.574001333110I4<0.511401175461026<0.51540221763103811940325875104104043010512405361104<0.511410175461116<0.5154112176311811941

7、269781I31041331114124143611514415421206<0,51542022一671I811942一1269781221022342232II91123124233812415424441251742550130R119430279SO13110一2343133II9313212433913IIO133154334513417434521351943559.冬接新量习性份数MPNlOOml95%置信期各接种量不性份数MPNlOOnl95%置信置10ml1ml0.1nil下限上阳10m)Imi0.1ml下限上陂1401122544034129314113441401

8、4110142154447143174435414419444621452244569150134504116120151154514R15217452561531945364154224547215524455812005<0.513500237700171175013111890292215024315IIO03123285035819140204145047624180205165059510711751033119311921511461612011232851一6321150131451;84262002141751411015195I513020922152049171301

9、123285217023170一22144345229428220231752312033280,2419544150383702522525180445203012328530792519023114434531IIO31250各接种量出性份数MPN100ml95。置信未2接种量田住伤数MPN100ml95%置信置10ml1ml0.1ml下IU±W10ml1ml0.1ml下双上段321753一14037340.3320533180445002342253421053670352553525077790X4015437540130353004117541170434902422054222057700X43235432809