注射液有关物质及含量测定方法学验证方案

1、注射用XX有关物质及含量测定方法学验证方案样品：自制XX供试品：批号：市售品：进口XX批号：国产XX批号：对照品：XX对照品：自制，批号：xxxxxx,XX含量：51.27%水分：1.34%A对照品：来源：批号：B对照品：来源：批号：C对照品：来源：批号：1、方法验证注射用XX是以XX为原料通过复溶并重新冻干获得，制品期间未加入任何辅料，同时注射用XX有关物质及含量测定方法与原料测定方法完全一致，因此注射用XX有关物质及含量测定方法学验证可与XX原料方法学一致，此次方法学验证使用的样品用原料（批号：xxxxxx）代替。2、检测方法含量测定照高效液相色谱法（中国药典2015年版四部通则0512）

2、测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以水相-甲醇-乙睛（800:160:16）为流动相；柱温：30C；检测波长为260nm。取对照品溶液作为系统适用性试验溶液，量取20M注入液相色谱仪，各杂质峰之间及主成分峰与相邻杂质峰之间的分离度应符合规定，理论板数按XX峰计算应不低于3000。测定法取本品适量，精密称定，加水溶解制成每1ml中约含XX0.2mg的溶液，作为供试品溶液。精密量取供试品溶液20小注入液相色谱仪，记录色谱图；另取XX对照品适量，同法测定。按外标法以峰面积计算，按无水物计算，含XX阳离子应为50.0%54.0%。有关物质照高效液相色谱法（中国药典2015年

3、版四部通则0512）测定。取本品，精密称定，加水溶解并稀释制成每1ml中约含XX0.5mg的溶液，作为供试品溶液；另分别取A、B、XX、C对照品适量，精密称定，加水溶解并定量制成每1ml中约含A2.5gB2.5g、XX5.0闻、C5.0g的混合溶液，作为对照品溶液。取对照品溶液20口，注入液相色谱仪，出峰顺序依次为A、B、XX、C,调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的10%30%;再精密量取对照品溶液和供试品溶液各20出分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的6倍。供试品溶液色谱图中如显杂质峰，按外标法以峰面积计算，A峰面积不得大于对照品溶液中A的主峰面积（0.5%）,B

4、峰面积不得大于对照品溶液中B的主峰面积（0.5%）,C峰面积不得大于对照品溶液中C的峰面积（1.0%）,其它单个杂质峰面积不得大于对照品溶液中XX主峰面积的0.1倍（0.1%）,其它杂质峰面积的和不得大于对照品溶液中XX主峰面积的0.5倍（0.5%）。3、方法学验证项目采用自制品（批号：xxxxxx）按照确定的检测方法进行详细的方法学验证。项目验证要求专属性（1）空白溶剂水应不十扰测定；供试品溶液色谙图中主成分峰与对照品溶液色谙图中主成分峰保留时间应一致；系统适用性溶液中各成分峰保留时间与其单独进样的保留时间基本一致，各已知杂质峰之间、主成分峰与相邻杂质峰之间分离度均应大于2.0,主成分峰理论

5、板数应3000专属性（2）供试品破坏试验（包括酸破坏试验，碱破坏试验，氧化破坏试验，高温破坏试验，光照破坏试验）中主成分峰与相邻杂质峰应能完全分离，主成分峰纯度因子应大于980，物料基本守恒，破坏前后峰面积和基本一致。系统适用性（1）有美物质方法学配制6份相同浓度的杂质对照品混合溶液（系统适用性试验溶液）进行分析，各杂质峰峰面积的RSD应W2.0%保留时间的RSD应W1.0%主峰拖尾因子应不大于2.0,理论板数应3000各已知杂质峰与相邻峰分离度应2.0系统适用性（2）含量测定方法学配制6份相同浓度的0.2mg/ml对照品溶液进行分析，主峰峰面积的RSD应2.0%主峰保留时间的RSD应w1.0

6、%主峰拖尾因子应&2.0主峰的理论板数应3000线性与范围（1）有美物质方法学A在定量限-200%限度（定量限-5.0gg/m®浓度范围内配制6份浓度不同的各组分对照品溶液，分别测定主峰面积，以浓度（C）为横坐标，以相应的峰面积（A）为纵坐标，进行线性回归分析。B在定量限-200%限度（定量限-5科g/ml的浓度范围内配制6份浓度不同的各组分对照品溶液，分别测定主峰面积，以浓度C）为横坐标，以相应的峰面积（A）为纵坐标，进行线性回归分析。XX在定量限-200%限度（定量限-10科g/m的浓度范围内配制6份浓度不同的各组分对照品溶液，分别测定主峰面积，以浓度C）为横坐标，以相应

7、的峰面积（A）为纵坐标，进行线性回归分析。C在定量限-200%限度（定量限-10gg/m的浓度范围内配制6份浓度不同的各组分对照品溶液，分别测定主峰面积，以浓度（C）为横坐标，以相应的峰面积（A）为纵坐标，进行线性回归分析。可接受标准：回归方程的相关系数（R2）应0.990丫轴截距应在100%响应值白225%以内，响应因子的RSD应W10%线性与范围（2）含量测定方法学在50%-300%（0.1mg/ml-0.6mg/ml）的浓度范围内配制5份浓度不同的对照品溶液，分别测定主峰面积，以浓度（C）为横坐标，以相应的峰面积（A）为纵坐标，进行线性回归分析。回归方程的相关系数（R2）应0.993Y轴

8、截距应在100%响应值的2%以内，响应因子的RSD应W2.0%检测限LOD主峰与噪音峰信号比3时的各已知杂质和主成分对照品溶液浓度（量）。定量限LOQ主峰与噪音峰信号比10时的各已知杂质和主成分对照品溶液浓度（量）；配制6份各已知杂质和主成分定量限浓度溶液，所测6份溶液各已知杂质和主成分主峰保留时间的RSD应词,所测6份各已知杂质和主成分溶液主峰面积的RSD应磴。精密度（1）有美物质方法学包括重复性和中间精密度。重复性：配制6份同一浓度（相当于100%浓度水平）的供试品溶液，由1人在尽可能相同的条件下进行杂质含量测定，所得6份杂质含量数据的RSD应02%中间精密度：配制6份相同浓度供试品溶液，

9、由另一分析人员用另一台仪器十/、同日期进行杂质含量测定，所得12份杂质含量数据的RSD应w2%精密度（2）含量测定方法学包括重复性和中间精密度。重复性：配制6份相同浓度的供13t品溶液，由1人在尽可能相同的条件下进行含量测定，所得6份含量数据的RSD应w1%中间精密度：配制6份相同浓度供试品溶液，由另1人用另一台仪器进行含量测定，所得12份含量数据的RSD应W1%准确度（1）有美物质方法学分别配制含已知杂质浓度为各自限度浓度50%、100%、150%的供试品溶液各3份，分别测定已知杂质含量，将实测值与理论值比较，计算回收率，各浓度下的平均回收率均应在92%-105%,9个回收率数据的RSD应W

10、10%准确度（2）含量测定方法学分别配制含XX浓度为80%、100%、120%的供试品溶液各3份，分别测定含量，将实测值与理论值比较，计算回收率，各浓”的平均回收率均应在98%-101%,9个回收率数据的RSD应W2.0%耐用性（1）（浓0.5mg/ml）有美物质方法学溶液稳定性：供试品溶液分别在室温和冰箱冷藏室（4C）中放置12h,分别在0、4、8、12h测定杂质含量，各已知杂质含量的绝对值在10.1%以内，并不得出现新的大于报告限度的杂质视为溶液稳定，否则为不稳定。流速耐用性：供试品溶液在0.8ml/min、1.0ml/min、1.2ml/min条件下测定杂质含量，各已知杂质峰的拖尾因子不

11、大于2.0,各已知杂质和相邻峰应达到基线分离，各杂质含量数据的RSD应不大于2.0%,杂质含量与1.0ml/min测定数值相比变化值在M.1%以内，视为耐用性好，否则为不好。柱温耐用性：供试品溶液在25C、30C、35c条件下测定杂质含量，各已知杂质峰的拖尾因子不大于2.0,各已知杂质和相邻峰应达到基线分离，杂质含量数据的RSD应不大于2.0%,杂质含量与30c测定数值相比变化值在3.1%以内，视为耐用性好，否则为不好。流动相pH值耐用性：供试品溶液在pH值为3.3、3.5、3.7条件下测定杂质含量，各已知杂质峰的拖尾因子不大于2.0,各已知杂质和相邻峰应达到基线分离，杂质含量数据的RSD应不

12、大于2.0%,杂质含量与pH3.5测定数值相比变化值在10.1%以内，视为耐用性好，否则为不好。流动相比例耐用性：供试品溶液在流动相（水相：甲醇：乙睛）比例分别为750:200:20;800:160:16;850:120:12条件下测定杂质含量，各已知杂质峰的拖尾因子不大于2.0,各已知杂质和相邻峰应达到基线分离，杂质含量数据的相对标准偏差应不大于20%,杂质含量与800:160:16测定数值相比变化值在10.1%以内视为耐用性好，否则为不好。耐用性（2）（浓度0.2mg/ml）含量测定方法学溶液稳定性：供试品溶液分别在室温和冰箱冷藏室（4C）中放置12h,分别在0、4、8、12h测定含量，与

13、0时比较，各放置时间含量变化的绝对值不大于2.0%,视为溶液稳定，否则为不稳定。流速耐用性：供试品溶液在0.8ml/min、1.0ml/min、1.2ml/min条件下测定含量，主峰的拖尾因子应不大于2.0,主峰与相邻杂质峰应达到基线分离，含量数据的相对标准偏差应不大于2.0%视为耐用性好，否则为不好。柱温耐用性：供试品溶液在25C、30C、35c条件下测定，主峰的拖尾因子应不大于2.0,主峰与相邻杂质峰应达到基线分离，含量数据的相对标准偏差应不大于2.0%视为耐用性好，否则为不好。流动相pH值耐用性：供试品溶液在pH值为3.3、3.5、3.7条件下测定，主峰的拖尾因子应不大于2.0,主峰与相

14、邻杂质峰应达到基线分离，含量数据的相对标准偏差应不大于2.0%视为耐用性好，否则为不好。流动相比例耐用性：供试品溶液在流动相（水相：甲醇：乙睛）比例分别为750:200:20;800:160:16;850:120:12条件下测定，主峰的拖尾因子应不大于2.0,主峰与相邻杂质峰应达到基线分离，含量数据的相对标准偏差应不大于2.0%视为耐用性好，否则为不好。4.1溶液配制A对照品储备液：精密称取A对照品适量，加水稀释制成约0.1mg/ml的对照品储备液B对照品储备液：精密称取B对照品适量，加水稀释制成0.1mg/ml的对照品储备液。有关物质检查XX对照品储备液：精密称取XX对照品适量，加水稀释制成

15、约0.5mg/ml的对照品储备液。C对照品储备液：精密称取C对照品适量，力口水稀释制成约0.2mg/ml的对照品储备液。A杂质定位溶液：精密量取A对照品储备液适量，加水稀释制成约2.5科g/m对照品溶液。B杂质定位溶液：精密量取B对照品储备液适量，加水稀释制成约2.5g/ml溶液。5.0g/mlj溶液XX定位溶液：精密量取XX对照品储备液适量，加水稀释制成约C杂质定位溶液：精密量取C对照品储备液适量，加水稀释制成约5.0g/m溶液B对照品储备液、XX对照品杂质对照品溶液（系统适用性溶液）：精密量取A对照品储备液、储备?C对照品储备液适量，加水稀释制成含A约2.5科g/m,lB约2.5科g/m,

16、lXX约5.0科g/mlC约5.0科g/m的混合溶液，同时作为系统适用性溶液。含量测定对照品储备液：精密量取XX对照品（批号xxxxxx）适量，加水溶解并稀释制成约含XX1.0mg/ml的溶液。供试品储备液：精密称取XX（批号xxxxxx、市售样品1批号xxxxxx、市售样品2批号xxxxxx）样品适量，加水溶解稀释制成约含XX5.0mg/ml的溶液。供试品溶液（1）:精密称取各来源XX样品适量，加水溶解稀释制成约含XX0.5mg/ml的溶液作为供试品溶液（有关物质检测）。供试品溶液（2）：精密称取各来源XX样品适量，加水溶解稀释制成约含XX0.2mg/ml的溶液作为供试品溶液（含量测定）。对

17、照品溶液：精密量取XX对照品（批号xxxxxx）适量，加水溶解并稀释制成约含XX0.2mg/ml的溶液（含量测定）。4.2方法学验证4.2.1 专属性（1）（1）空白溶剂干扰试验：取水溶液20dl注入液相色谱仪中，记录色谱图，在主成分峰及各已知杂质峰位置应不出现色谱峰，以此确定空白溶剂无干扰。(2)杂质定位试验(DAD检测器)精密量取A杂质定位溶液、B杂质定位溶液、C杂质定位溶液、XX定位溶液、杂质对照品溶液各203，依次注入色谱仪中，记录色谱图。杂质对照溶液中理论板数按XX峰计算应3000各杂质峰之间及主成分峰与相邻杂质峰之间的分离度应符合规定，各已知杂质定位溶液保留时间与杂质对照品溶液各峰

18、保留时间应一致，各杂质对照峰纯度因子应大于980。(3)供试品溶液与对照品溶液对比试验(DAD检测器)精密量取XX自制供试品溶液(1),供试品溶液(2)和对照品溶液(0.2mg/ml)各20dl分别注入色谱仪中，记录色谱图。供试品溶液色谱图中主成分峰与对照品溶液色谱图中主成分峰保留时间应一致，主成分峰与相邻杂质峰应能完全分离，主成分峰的纯度因子应大于980。专属性(1)试验结果名称杂质定位溶液杂质对照溶液主峰保留时间(min)主峰保留时间(min)理论板数与相邻杂质峰之间分离度纯度因子ABCXX样品主峰保留时间(min)理论板数与相邻杂质峰之间分离度纯度因子对照品溶液(0.2mg/ml)供试品

19、溶液(1)-自制品(0.5mg/ml)供试品溶液(2)-自制品(0.2mg/ml)可接受标准空白溶剂应不干扰测定；供试品溶液色谱图中主成分峰与对照品溶液色谱图中主成分峰保留时间应一致，各已知杂质峰之间、主成分峰与相邻杂质峰之间分离度均应大于2.0,理论板数按XX计算应3000各已知杂质及主成分峰纯度因子均应大于980。4.2.2 专属性(2)强制降解试验4.2.2.1 未破坏样品有关物质检测(DAD检测器)6/20以水为空白：精密量取超纯水20科注入液相色谱仪中，记录色谱图，应不干扰检测。分别精密量取供试品储备液各1ml,分别置于3个10ml量瓶中，加水稀释至刻度，精密量取20d注入液相色谱仪

20、中，记录色谱图，列表总结杂质情况，并对比自家样品与市售品的质量。4.2.2.2 氧化破坏(DAD检测器)(1)氧化破坏空白试验量取1ml30%过氧化氢置于10ml量瓶中，在室温放置48h后，加水定容至刻度，精密量取此溶液20dl注入液相色谱仪中，记录色谱图。(2)分别量取3个供试品储备液各1ml置10ml容量瓶中，加入1ml30%过氧化氢，在室温放置48h后，加水定容至刻度，分别精密量取此溶液20d注入液相色谱仪中，记录色谱图，计算样品破坏前后的总峰面积比值、统计3个供试液破坏后产生的杂质个数及所占比例情况，列表进行对比分析。4.2.2.3 碱破坏试验(DAD检测器)(1)碱破坏空白试验量取1

21、ml0.05mol/L氢氧化钠溶?夜,置于10ml量瓶中，在室温放置1h后，力口1ml0.05mol/lHCl溶液，加水定容至刻度，精密量取此溶液20dl注入液相色谱仪中，记录色谱图。(2)分别量取3个供试品储备液各1ml置10ml容量瓶中，加入1ml0.05mol/L氢氧化钠溶液，在室温放置1h后，加1ml0.05mol/lHCl溶液，加水定容至刻度，精密量取此溶液20dl注入液相色谱仪中，记录色谱图，计算样品破坏前后的总峰面积比值、统计3个供试液破坏后产生的杂质个数及所占比例情况，列表进行对比分析。4.2.2.4 酸破坏13t验(DAD检测器)(1)酸破坏空白试验量取1ml1mol/LHC

22、L溶液，置于10ml量瓶中，在室温放置24h后，力口1ml1mol/L氢氧化钠溶液，加水定容至刻度，精密量取此溶液20科注入液相色谱仪中，记录色谱图。(2)分别量取3个供试品储备液各1ml置10ml容量瓶中，加入1ml1mol/LHCL溶液，在室温放置24h后，力口1ml1mol/LNaOH溶液，加水定容至刻度，精密量取此溶液20"注入液相色谱仪中，记录色谱图，计算样品破坏前后的总峰面积比值、统计3个供试液破坏后产生的杂质个数及所占比例情况，列表进行对比分析。4.2.2.5 高温破坏试验(DAD检测器)(1)高温破坏空白试验以水为空白：精密量取超纯水20科注入液相色谱仪中，记录色谱图

23、，应不干扰检测。(2)量取3个供试品储备液各1ml置10ml容量并S中，加水定容，在50c恒温放置2h后，精密量取此溶液20科注入液相色谱仪中，记录色谱图，计算样品破坏前后的总峰面积比值、统at3个供试液破坏后产生的杂质个数及所占比例情况，列表进行对比分析。4.2.2.6 光照破坏试验（DAD检测器）（1）光照破坏空白试验以水为空白：精密量取超纯水20科注入液相色谱仪中，记录色谱图，应不干扰检测。（2）分别量取3个供试品溶液于光强为4500Lux（最高光强），室温放置48h后，精密量取此溶液20dl注入液相色谱仪中，记录色谱图，计算样品破坏前后的总峰面积比值、统计3个供试液破坏后产生的杂质个数

24、及所占比例情况，列表进行对比分析。可接受标准：1 .各降解条件空白试验不干扰测定。2 .主峰纯度因子应大于980,主峰与相邻杂质峰分离度应R2.0。3 .破坏前后物质应守恒：破坏前后的总峰面积比应在90.0-110.0%范围内。4 .自家产品破坏后杂质个数及杂质总量不应多于其他两种对比样品。4.2.3 系统适用性试验（1）（有关物质）（1）做空白溶剂干扰试验以水为空白：精密量取超纯水20科注入液相色谱仪中，记录色谱图，应不干扰检测。（2）配制6份相同浓度的杂质对照品溶液，分别精密量取20d注入液相色谱仪中，记录色谱图，各杂质峰峰面积的RSD应W2.0%保留时间的RSD应W1.0%主峰拖尾因子应

25、不大于2.0,理论板数应>3000各已知杂质峰与相邻峰分离度应>2.04.2.4 系统适用性试验（2）（含量测定）（1）做空白溶剂干扰试验以水为空白：精密量取超纯水20科注入液相色谱仪中，记录色谱图，应不干扰检测。（2）配制6份相同浓度的0.2mg/ml对照品溶液，分别精密量取20d注入液相色谱仪中，记录色谱图，主峰峰面积的RSD应W2.0%主峰保留时间的RSD应W1.0%主峰拖尾因子应<2.0主峰的理论板数应R3000主峰与相邻杂质峰分离度应>2.04.2.5 检测限分别量取各已知杂质和主成分对照品储备液，加水逐步稀释成一定浓度的溶液，精密量取20M注入液相色谱仪中，

26、记录色谱图，信噪比约为3:1时的各成分浓度及进样量，为检测限浓度及量。4.2.6 定量限分别量取各已知杂质和主成分对照品溶液，加水逐步稀释成一定浓度的溶液，精密量取20d注入液相色谱仪中，记录色谱图，信噪比约为10:1时的各成分浓度及进样量，为定量限浓度及量。分别配制6份各已知杂质和主成分的定量限浓度溶液，分别精密量取203注入液相色谱仪中，记录色谱图，所测6份各已知杂质和主成分的定量限溶液主峰的保留时间的RSD应=1%,所测6份各已知杂质和主成分溶液主峰面积的RSD应您%。4.2.7 线性与范围（1）（有关物质）4.2.7.1 A线性与范围(储备液浓度为0.1mg/ml)精密量取A对照品储备

27、液适量配制成定量限浓度、1ml(40%)、2ml(80%)、2.5ml(100%)、3ml(120%)、4ml(160%)、5ml(200%),分别置100ml容量瓶中，置于100ml量瓶中，加水稀释至刻度。分别精密量取20dL注入液相色谱仪中，记录色谱图。以A浓度(C,mg/ml)为横坐标，以峰面积(A)为纵坐标，进行线性回归，回归方程的相关系数(R)应0.9如，Y轴截距应在100%响应值的25%以内，响应因子的RSD应W10%结果见下表。A线性与范围试验结果表浓度（C,mg/ml）峰面积(A)响应因子(A/C)响应因子RSD%应司0%Y轴截距/100%响应值应<25%回归方程A=KC

28、+b相关系数(R2)应0.9904.2.7.2B线性与范围(储备液浓度为0.1mg/ml)精密量取B对照品储备液适量配制成定量限溶液、1ml(40%)、2ml(80%)、2.5ml(100%)、3ml(120%)、4ml(160%)、5ml(200%),置于100ml量瓶中，加水稀释至刻度。分别精密量取20dL注入液相色谱仪中，记录色谱图。以B浓度(C,mg/ml)为横坐标，以峰面积(A)为纵坐标，进行线性回归，回归方程的相关系数(R)应0.90,Y轴截距应在100%响应值的25%以内，响应因子的RSD应40%。结果见下表。B线性与范围试验结果表浓度（C,mg/ml）峰面积(A)响应因子(A/

29、C)响应因子RSD%应司0%Y轴截距/100%响应值应<25%回归方程A=KC+b相关系数(R2)应0.9904.2.7.3XX线性与范围(有关物质检查对照品储备液浓度为0.5mg/ml)精密量取XX对照品储备液适量配制成定量限溶液、0.4ml(40%)、0.8ml(80%)、1ml(100%)、1.2ml(120%)、1.6ml(160%)、2ml(200%),置于100ml量瓶中,加水稀释至刻度。分别精密量取20dL注入液相色谱仪中，记录色谱图。以XX浓度(C,mg/ml)为横坐标，以峰面积(A)为纵坐标，进行线性回归，回归方程的相关系数(R)应0.90丫轴截距应在100%响应值的2

30、5%以内，响应因子的RSD应得0.0%。结果见下表。XX线性与范围试验结果表浓度（C,mg/ml）峰面积（A）响应因子（A/C）响应因子RSD%应司0%Y轴截距/100%响应值应<25%回归方程A=KC+b相关系数（R2）应0.9904.2.7.4C线性与范围（储备液浓度为0.2mg/ml）精密量取C对照品储备液适量配制成定量限溶液、1ml（40%）、2ml（80%）、2.5ml（100%）、3ml（120%）、4ml（160%）、5ml（200%）,置于100ml量瓶中，加水稀释至刻度。分别精密量取20始注入液相色谱仪中，记录色谱图。以线性回归，回归方程的相关系数（C浓度（C,mg/m

31、l）为横坐标，以峰面积（A）为纵坐标，进行R）应0.90,丫轴截距应在100%响应值的25%以内，响应因子的RSD应得0%。结果见下表。C线性与范围试验结果表浓度（C,mg/ml）峰面积（A）响应因子（A/C）响应因子RSD%应司0%Y轴截距/100%响应值应<25%回归方程A=KC+b相关系数（R2）应0.9904.2.8线性与范围（2）（含量测定）4.2.8.1XX线性与范围（含量测定对照品储备液浓度为1.0mg/ml）精密量取XX对照品贮备液1.0ml（50%）、2ml（100%）、3ml（150%）、5ml（300%）分别置10ml容量瓶中，加水稀释至刻度。分别精密量取20dL注

32、入液相色谱仪中，记录色谱图。以XX浓度（C,mg/ml）为横坐标，以峰面积（A）为纵坐标，进行线性回归，回归方程的相关系数（R2）应0.9%丫轴截距应在100%响应值的2%以内，响应因子的RSD应W2.0%结果见下表。XX线性与范围试验结果表浓度（C,mg/ml）峰面积（A）响应因子（A/C）响应因子RSD%应2.0%Y轴截距/100%响应值应2%回归方程A=KC+b相关系数（R2）应0.9984.2.9精密度（1）（有关物质）4.2.9.1重复性取XX样品适量，精密称定，加水溶解并稀释制成每1ml约含XX0.5mg的溶液，摇匀，得供试品溶液，同法配制6份，分别精密量取20口注入液相色谱仪中，

33、记录色谱图；另取杂质对照品溶液同法测定，计算有关物质，所测6份供试品溶液的有关物质的RSD应V%。有关物质检查重复性试验结果表样品123456A%平均值%RSD%应2%B%平均值%RSD%应2%C%平均值%RSD%应V%最大未知单杂%平均值%RSD%应V%未知杂质和%平均值%RSD%应V%总杂平均值%RSD%应V%由另一QC人员用另一台液相，同法测定6份供试品溶液有关物质，12份杂质含量数据的RSD应V%。有关物质检查中间精密度试验结果表样品123456789101112A%平均值%RSD%应w2%B%平均值%RSD%应W%C%平均值%RSD%应w2%最大未知单杂%平均值%RSD%应w2%未知

34、杂质和%平均值%RSD%应w2%总杂平均值%RSD%应w2%4.2.10精密度（2）（含量测定）4.2.10.1重复性取XX样品适量，精密称定，加水溶解并稀释制成每1ml约含XX0.2mg的溶液，摇匀，得供试品溶液，同法配制6份，分别精密量取20口注入液相色谱仪中，记录色谱图；另取含量测定对照品溶液同法测定，计算含量，所测6份供试品溶液的含量测定的RSD应W%。含量测定重复性试验结果表样品123456含量%平均值%RSD%应得4.2.10.2中间精密度由另一分析人员于不同日期用不同仪器同法测定6份含量，12份含量数据的RSD应得。含量测定中间精密度试验结果表样品123456789101112含

35、量%平均值%RSD%应得备注：将重复性项下的含量测定结果作为准确度试验的已知含量。4.2.11准确度(1)(有关物质)(1)配制供试品储备液：精密称取XX样品适量，加水溶解并定量稀释制成约含XX5.0mg/ml的溶液，配制250ml,4c冰箱中保存。(2)配制供试品溶液：精密量取供试品储备液1ml,置于10ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。(3)配制加标供试液：分别精密量取A对照品储备?夜(浓度0.1mg/ml)、B对照品储备液(浓度0.1mg/ml)、C各杂质对照品储备液对口品储备液(浓度0.2mg/ml)2.5、5.0、7.5ml,分别置于3个200ml量瓶中，分别加入供试品储备液2

36、0ml,加水稀释至刻度，摇匀，制成分别含50%、100%、3份，共9份。加水稀释制成每1ml中约含A150%已知杂质的含XX样品0.5mg/ml的供试液，每个浓度分别制备(4)配制杂质对照品溶液：精密量取各杂质对照品储备液适量,2.5闵、B2.5囚、C5.0四的混合溶液。20W注入液相色谱仪，记录92%-105%,9个回(5)分别精密量取供试品溶液、杂质对照品溶液、各浓度供试液色谱图，分别测定已知杂质含量，计算回收率，各浓度下的平均回收率均应在收率数据的RSD应2%。有关物质检查准确度试验结果表编p加入量(mg)测得量(mg)回收率(%)平均回收率(%)RSD(%)杂质ABCABCABCABC

37、ABC50%1-11-21-31002-1精密称取XX样品适量，加水溶解并定量稀释分别制成每1ml中约含XX0.16mg(80%)、0.2mg(100%)和0.24mg(120%)的溶液，各浓度分别制备3份，共9份，分别精密量取20口注入液相色谱仪中，记录色谱图；另取含量测定对照品溶液20dL注入液相色谱仪中，记录色谱图，分别计算回收率。结果见下表。各浓度回收率均应98%-101%,9个回收率数据的RSD应W2.0%含量测定准确度试验结果表编R已知量(mg)测得量(mg)回收率(%)平均回收率(%)RSD(%)80%1-1应98%-101%应W2.0%1-21-3100%2-1应98%-101

38、%2-22-3120%3-1应98%-101%3-23-34.2.13耐用性(1)(有关物质)4.2.13.1溶液稳定性精密称取供试品适量，加水溶解并稀释制成每1ml约含XX0.5mg的溶液，分别置室温和4c冰箱各放置12h,分别在0、4、8、12h测定杂质含量，各已知杂质含量的绝对值在M.1%以内，并不得出现新的大于报告限度(0.05%)的杂质视为溶液稳定，否则为不稳定。有关物质检查溶液稳定性试验结果表放置时间0h4h8h12h杂质变化杂质杂质与0h差杂质与0卜差杂质与0卜差ABC新增大于0.05%的杂质一4.2.13.2流速耐用性精密称取供试品适量，加水溶解并稀释制成每1ml中约含XX0.

39、5mg的溶液，作为供试品溶液。分别在流速0.8ml/min、1.0ml/min、1.2ml/min条件下测定杂质含量，各已知杂质峰的拖尾因子不大于2.0,各已知杂质和相邻峰应达到基线分离，杂质含量数据的相对标准偏差应不大于2.0%,杂质含量与1.0ml/min数值相比变化的绝对值在划1%以内，视为耐用性好，否则为不好。有关物质检查流速耐用性试验结果表流速(ml/min)0.81.01.2杂质含量RSD%A含量%与1.0ml/min结果差值与相邻峰分离度拖尾因子B含量%与1.0ml/min结果差值与相邻峰分离度拖尾因子C含量%与1.0ml/min结果差值与相邻峰分离度拖尾因子最大未知单杂含量%未

40、知总杂含量%总杂含量%4.2.13.3柱温耐用性精密称取供试品适量，加水溶解并稀释制成每1ml中约含XX0.5mg的溶液，作为供试品溶液。分别在柱温25C、30C、35c条件下测定，各已知杂质峰的拖尾因子不大于2.0,各已知杂质和相邻峰应达到基线分离，杂质含量数据的相对标准偏差应不大于2.0%,杂质含量与30c测定数值相比变化的绝对值在M.1%以内，视为耐用性好，否则为不好。有关物质检查柱温耐用性试验结果表柱温C253035杂质含量RSD%A含量%与30C差值与相邻峰分离度拖尾因子B含量%与30C差值与相邻峰分离度拖尾因子C含量%与30C差值与相邻峰分离度拖尾因子最大未知单杂含量%未知总杂含量

41、%总杂含量%4.2.13.4流动相pH值耐用性精密称取供试品适量，加水溶解并稀释制成每1ml中约含XX0.5mg的溶液，作为供试品溶液。分别在pH值为3.3、3.5、3.7条件下测定杂质含量，各已知杂质峰的拖尾因子不大于2.0,各已知杂质和相邻峰应达到基线分离，杂质含量数据的相对标准偏差应不大于2.0%,杂质含量与pH值3.5测定数值相比变化的绝对值在M.1%以内，视为耐用性好，否则为不好。有关物质检查流动相pH值耐用性试验结果表PH值3.33.53.7杂质含量RSD%A含量%与pH3.5差值与相邻峰分离度拖尾因子B含量%与pH3.5差值与相邻峰分离度拖尾因子C含量%与pH3.5差值与相邻峰分离度拖尾因子最大未知单杂含量%未知总杂含量%总杂含量%4.2.13.5流动相比例耐用性精密称取供试品适量，加水溶解并稀释制成每1ml中约含XX0.5mg的溶