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文档简介
1、实验三实验三 细胞形态多样性及细胞计数细胞形态多样性及细胞计数 一一. . 实验原理实验原理 应用显微镜的成像原理,并借助血细胞计数板,计算单位体积的细胞应用显微镜的成像原理,并借助血细胞计数板,计算单位体积的细胞或微小生物的数量。或微小生物的数量。二二. .试剂与器械试剂与器械 器材器材 : :光学显微镜、血细胞计数板。光学显微镜、血细胞计数板。三实验步骤三实验步骤取血细胞计数板,加盖玻片盖住两边的小槽。取血细胞计数板,加盖玻片盖住两边的小槽。充液:用小滴管将一小滴稀释血液滴在盖玻片边缘的玻片上,使稀充液:用小滴管将一小滴稀释血液滴在盖玻片边缘的玻片上,使稀释血液借毛细管现象自动渗透入计数室
2、中。如滴入过多,溢出并流释血液借毛细管现象自动渗透入计数室中。如滴入过多,溢出并流入两侧槽内,使盖玻片浮起,体积改变,会影响计数结果,需用滤入两侧槽内,使盖玻片浮起,体积改变,会影响计数结果,需用滤纸把多余的溶液吸出,以槽内没有溶液为宜。如滴入溶液过少,经纸把多余的溶液吸出,以槽内没有溶液为宜。如滴入溶液过少,经多次充液,易产生气泡,应洗净计数室,干燥后重做多次充液,易产生气泡,应洗净计数室,干燥后重做。1.1. 计数:充液后静止计数:充液后静止1-21-2分钟,待红细胞下沉后,方可进行计数。计数分钟,待红细胞下沉后,方可进行计数。计数四角及中央共四角及中央共5 5个中方格内的个中方格内的20
3、20个小方格中所有红细胞数,计数时为个小方格中所有红细胞数,计数时为了防止重复和遗漏,应按一定的顺序,先自左向右数到最后一格,了防止重复和遗漏,应按一定的顺序,先自左向右数到最后一格,下一行格子则自右向左,再下一行又自左向右,即呈下一行格子则自右向左,再下一行又自左向右,即呈S S形计数。对于形计数。对于分布在刻线上的红细胞,依照分布在刻线上的红细胞,依照“数上不数下,数左不数右数上不数下,数左不数右“的原则的原则进行计数。计数时,如发现各中方格的红细胞数目相差进行计数。计数时,如发现各中方格的红细胞数目相差2020个以上,个以上,表示血细胞分布不均匀,必须重新计数。表示血细胞分布不均匀,必须重新计数。4. 4. 求出细胞分布平均数求出细胞分布平均数= d= d0 0 + d + d1 1+d+d1010 / 20 / 20 细胞密度细胞密度 = =细胞分布平均数细胞分布平均数稀释倍数稀释倍数4000/mm4000/mm3 3四四. . 注意事项注意事项 防止液体滴入过多,否则溢出并流入两侧槽内,会使盖防止液体滴入过多,否则溢出并流入两侧槽内,会使盖玻片浮起,体积改变,会影响计数结果玻片浮起,体积改变,会影响计数结果。五五. . 实验结果实验结果 细胞密度应在细胞密度应在10107 7左右。左右。六六. . 思考题思考题 1.1.计算每立方毫米兔血中红细胞的数
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