(可研报告)淡水育珠蚌种质种苗培育基地建设可行性研究报告

1、淡水育珠蚌种质种苗培育基地建设项目可仃 性 研 究 报 土 口i军就而健I "lm . (二 tir /浙江山R湖后球集股份有限公司0 一一年六月一、立项的背景和意义 3二、国内外研究现状和发展趋势 5三、项目主要研究开发内容、技术关键及主要创新点71研究开发内容 72技术关键 93 主要创新点 9四、项目预期目标 91主要技术经济指标 92应用或产业化前景 10五、项目实施方案、技术路线、组织方式与课题分解111项目实施方案 112技术路线 113组织方式 124课题分解 12六、计划进度安排 12七、现有工作基础和条件 13八、经费预算 161经费概算 162经费概算说明 12一

2、、立项的背景和意义三角帆蚌(Hyriopsis cumjngii )是培育淡水珍珠的主要蚌种，也是我国的特有种，属淡水双壳类软体动物，瓣鳃纲、蚌科、帆蚌属。壳大而扁平，壳面黑色或棕褐色，厚而坚硬，成年蚌体长近20 厘米，后背缘向上伸出一帆状后翼，使蚌形呈三角状，因而得名。栖息于浅滩泥质底或浅水层中，营埋栖生活，靠斧足运动，喜欢生活在较清洁的水域，是我国特有的河蚌资源，广泛分布于湖南、湖北、安徽、江苏、浙江、江西等省，尤以我国洞庭湖以及中型湖泊较多。淡水珍珠的规模化人工养殖在我国已有30多年的历史，随着珍珠养殖在我国养殖规模的不断扩大，到2002年，我国淡水珍珠的产量已逾2000吨 /年，占全世

3、界珍珠产量的90%。带动了一大批养殖户富裕起来，为很多珍珠相关的企业赢得了丰厚的利润，也为出口创汇做出了积极的贡献。淡水珍珠产业的发展与水产其他产业一样，其产量与质量的提高也需要优质良种作为产业发展的物质基础。近年来，随着人工繁殖技术的推广与普及，三角帆蚌的自然资源减少，相当部分的珍珠养殖者受经济利益的驱动，只顾当前利益，无视种质遗传基因的因素，一是繁育多采用同一水体的蚌资源；二是亲本个体达不到标准，质量偏差；三是甚至采用F2-F 4“含珠蚌”采苗。导致三角帆蚌种质的优良经济性能退化，抗病能力下降。其结果是：仔蚌生长速度缓慢，个体差异性大，珍珠分泌能力差，性成熟年龄提前，育珠蚌病害频繁发生。优

4、质育珠蚌是生产优质珍珠的基础，培育出优质的种苗是解决上述问题的前提。因此，我们应该严把种苗质量关，推广良种养殖，并实施资源保护，建立主要育珠蚌的种质资源库，进行育珠蚌种质资源鉴定、检测与保种选育，并制定原、良种繁殖技术标准。利 用现代生物工程技术，结合传统的良种选育方法，并借鉴海水贝类育种的科技成果，将不同品种的优良经济性状进行重新组合，培育出优良的育珠 贝类（多倍体），开发育珠新蚌源，为淡水珍珠产业的发展提供多品种的、经济性状优良的高效种源。种质资源保护的方法主要有就地保护和异地保护，浙江是我国最大的 淡水珍珠生产省份，也建有我国最大的淡水珍珠交易市场，为了保护淡水珍珠产业，应在这我省建立相

5、应的淡水珍珠蚌良种场，特别是三角帆蚌良 种场，将国内比较优良的淡水养殖珍珠蚌种质引入这些良种场，建立淡水珍珠蚌种质资源库，对我国淡水养殖珍珠蚌种质资源进行异地保护。同时， 也要加快淡水珍珠蚌重要种类的良种选育进程，利用异地保护建立的种质资源库，构建育种基础群体，培育淡水养殖珍珠蚌新品种。现阶段，特别要加强三角帆蚌的良种选育进程，培育出具有自主知识 产权的三角帆蚌新品种，为我国淡水珍珠产业健康发展奠定物质基础。同 时，要进行池蝶蚌和褶纹冠蚌的选育，或直接作为育珠母蚌，或作为育种 材料，进一步丰富养殖珍珠蚌的种质资源。建立种质资源保护基地，开展珍珠蚌遗传、育种研究，取得淡水珍珠 蚌人工繁殖的实质性

6、突破，为淡水珍珠蚌地理种群间杂交、良种提纯复壮、 种间远缘杂交、多倍体育种等遗传育种操作提供可以实现的手段。它也将 结束几十年来淡水珍珠蚌的人工采苗历史，提高珍珠产品质量，提升我国 珍珠产品的国际竞争力。这是淡水珍珠生产能否实现突破的关键，也是事 关长期稳定、持续发展大陆淡水珍珠业的深刻问题。在此技术基础上，建立工厂化育苗基地，可以为全国提供足够数量优质高产的育珠蚌苗。二、国内外研究现状和发展趋势科技兴农，良种先行，良好的品种是企业的核心竞争力，在珍珠养殖企业，优良的育珠蚌是提高珍珠质量、降低珠蚌死亡率的基础，它是珍珠产业能稳定持续发展的保证。但是，目前国内主要淡水育珠蚌（三角帆蚌）的种质退化

7、现象却已十分严重。淡水育珠蚌的人工繁殖（实际是钩介幼虫的人工采集）生产已有几十年的历史，由于长期忽视品种选育工作，造成种质资源的退化，多年来经过人工采苗的褶纹冠蚌、三角帆蚌多次留种、近亲繁殖，导致育种生产种1 龄蚌成熟怀卵的现象十分突出（早熟是种质退化最明显的标志）。很多珍珠养殖方面的专家和学者都注意到了育珠蚌种质退化现象，并开展了一系列的研究，在种质资源的保护和利用上，他们都给出了自己的意见和建议，李家乐认为应繁育和应用优质育珠母蚌，近年来，国内外通过新技术的开发和应用，他们率先开展了品种间杂交，培育出了“康乐蚌”使得育珠母蚌育珠率提高、成珠颗粒加大，成活率、大规格珍珠产出率大幅度提高，带动

8、了整个淡水珍珠产业的发展。杨品红提出建立三角帆蚌的原、良种场的建议，保种供应我国淡水珍珠养殖主要蚌源- 三角帆蚌。行业行政主管部门应严把种苗质量关，推广良种养殖，并实行资源保护，建立种质资源库，进行三角帆蚌种质资源的鉴定、检测与保种选育，只有具备技术条件的才给发证，也才能经营。同时，利用现代生物工程技术，结合传统的良种选育方法，并借鉴海水贝类育种的科技成果，将不同品种的优良经济性状进行重新组合，培育出新的优良育珠贝种，开发育珠新蚌源。张根芳认为：应对珍珠资源退化，应进行珍珠蚌遗传、育种研究，应用科技进步推动种质资源的利用，建立专业的育珠蚌种苗繁育中心，大量繁殖推广，为珍珠养殖企业提供优质高产的

9、育珠蚌苗。唐必会认为：加强对三角帆蚌种苗的管理，强化质量监督、水质监测、疫病防治、技术推广等工作对三角帆蚌进行提纯换代工作，以控制近亲繁殖，提高种苗质量；建立珍珠养殖加工技术推广体系。组织珍珠养殖大户参与技术普及推广。强化疫病监测、防治工作；加强技术培训、质量监督、水质监测、疫病防治等工作，促进珍珠产业健康发展。罗玉敏认为：优良的育珠蚌是生产高质量珍珠的前提，针对我国三角帆蚌种质资源现状，要在保护好野生资源的基础上，利用生物技术进行系统地选育和复壮。我国在海水贝类中已展开了多倍体育种和现代生物学技术辅助育种工作，对提高贝类的生长速度、抗病力和育珠质量发挥了重要作用。在淡水育珠研究领域，要加强三

10、角帆蚌的遗传选育、品种改良、病害防治研究，采用多倍体育种等技术培育优质育珠蚌。同时，应在育珠蚌人工繁育过程中引入遗传多样性评价机制，避免多代近亲繁殖。王爱民等对马氏珠母贝的野生群体和养殖群体进行了RAP诉析，同样得出野生群体的遗传多样性高于养殖群体。遗传多样性的减少很可能影响贝类的繁殖与生长及对环境的适应性。所以，在进行三角帆蚌的人工繁殖时，应选取野生贝类作为亲本，以保证种质的优良性状。总的来说，目前对贝类的研究主要集中在资源开发、经济价值利用上，缺乏全国性的淡水贝类资源调查，淡水贝类总量、物种受危况、可行的保护措施等均不清楚。相关的研究报告也不多见，与陆地生态系统相比，淡水生态系统中的生物多

11、样性问题远远没有被人们所重视，至今只见极少数零星的研究报道（ 而且主要是关于鱼类） ，这与中国丰富的淡水贝类资源相比极不相称，与中国无脊椎动物的研究水平差距也很大，更远远落后于国际生物多样性研究、保护的水平，这是中国目前急需填补的空白。因此，我们应该尽快对育珠蚌进行种质资源普查，结合我国珍珠养殖业的实际情况，建立种质资源保护基地，进行育珠蚌种质资源保护、开发和利用。三、项目主要研究开发内容、技术关键及主要创新点利用现代分子生物学相关技术，对育珠蚌种质资源开展遗传调查，在此基础上建立淡水育珠蚌种质资源繁育基地，开展珍珠蚌遗传、育种研究，筛选原始优良品种, 并利用这些优良的种质资源培育新品种、新品

12、系，取得淡水珍珠蚌人工繁殖的实质性突破，为淡水珍珠蚌地理种群间杂交、良种提纯复壮、种间远缘杂交、多倍体育种等遗传育种操作提供可以实现的手段。1研究开发内容本项目的重点是建立淡水育珠蚌种质种苗培育基地，初步建设目标水域面积是100 亩，按照原种场种间隔离的要求，严格基础设施建设，选择水源、水质优良的地方建设淡水育珠蚌种质种苗培育基地，进行水质的日常检测，使其符合国家渔业用水标准，进、排水系统严格分设，在此基础上对淡水珍珠养殖目前面临的共性关键技术进行攻关，主要针对以下几个方面开展工作，为优化淡水育珠蚌苗种及新品种的开发利用创造条件。1）淡水育珠蚌种质资源及遗传背景的调查对育珠蚌野生种群的分布、资

13、源量、种质特征、遗传结构、纯洁性、生产性能等开展调查进行评估，并利用现代分子生物学手段如同工酶分析、随机扩增多态性片断 DNA(randomamplifiedpolymorp DNA,简称RAPD)限制性片断长度多态性(restrictionfragmentlengthpolymorphism, 简 RFLP)线粒体DNA(mtDNAt技术对育珠蚌遗传结构、种质资源的纯性、遗传稳定性等给以正确的评价，为苗种的复壮、新品种的培育及种质标准的建立提供科学依据。2)三角帆蚌种质资源的优化选育对目前普遍采用的淡水育珠蚌种三角帆蚌种质资源进行优化选育，通过地理种群间杂交、良种提纯复壮、种间远缘杂交等对三

14、角帆蚌种质资源进行优化筛选优良品种。3)淡水珍珠蚌引种驯化选育利用北方传统的淡水育珠蚌种，通过驯化移植到南方并进行育珠试验，以期获得新的淡水育珠蚌种，并通过种间杂交获得新品种，进一步丰富淡水育珠蚌种的种质资源。4)染色体倍性育种目前我们通过人工诱导三倍体技术，已经获得三倍体三角帆蚌，并利用三倍体三角帆蚌开展育珠试验，对三倍体三角帆蚌的生长速度、抗病能力、育珠的质量、性腺抑制发育的情况作进一步的检验。三角帆蚌三倍体人工诱导技术在前一个浙江省科技厅重点科研项目的资助下，已经顺利完成，并取得了预期目标，本项目组成员已掌握该项技术，为该项研究成果的转化促进推广应用奠定了基础。5）开展淡水育珠蚌种质资源

15、基础性研究利用现代分子生物学技术，对目前普遍采用的淡水育珠蚌种，建立 cDNA文库，在此基础上逐步建立淡水珍珠蚌种质资源库，为培育淡水珍珠蚌新品种提供理论依据。2技术关键一是建立淡水育珠蚌种质种苗培育基地；二是对淡水育珠蚌的种质资源进行评价，优化淡水育珠蚌的种质资源，获得优良品种；三是通过染色体组工程及人工诱导技术获得多倍体蚌，并开展育珠试验，推进淡水育珠 蚌三倍体育珠技术的成果转化。3 主要创新点1）在国内首次开展利用贝类分类学、形态学、繁殖发育生物学、分子生物学对淡水育珠蚌种质资源、遗传背景、种质优化进行全面系统的研究。2）首次利用染色体组及人工诱导技术，获得三倍体三角帆蚌，并开展的三倍体

16、淡水珍珠养殖育珠技术方面的研究。四、项目预期目标1主要技术经济指标（ 1）建成100 亩水域面积的淡水育珠蚌种质种苗培育基地及配套的基础设施。（ 2）研究淡水育珠蚌种质资源遗传背景及野生资源的主要分布和可利用状况。3）人工诱导三倍体稚蚌1000 万只，实现经济效益500 万元。（ 4）对现有的淡水珍珠蚌种质资源进行优化选育，获得性状优良的育珠蚌种12只。（ 5）申报国家发明专利1 项。2应用或产业化前景我国的淡水珍珠产量占世界的95%以上，但是销售额只占到了8%，这说明我国的淡水珍珠的质量还有待于提高，现在用于生产的育珠蚌种质资源退化严重，种苗的优化选育和通过三倍体技术培育淡水珍珠，是目前急需

17、解决的关键问题。优质育珠蚌是生产优质珍珠的基础，培育出优质的种苗是解决上述问题的前提，也是我国淡水珍珠养殖业可持续发展长期共同关注的关键问题。利用细胞染色体组工程技术培育水产养殖新品种，是近年来的研究热点，尤其是通过染色体组的操作技术培育多倍体的研究，是最活跃和最具应用潜力的研究领域。多倍体倍具有投入相对少、目的性强、见效快、效益高等特点，多倍体的研究主要是为生产不育的三倍体。由于三倍体的不育性，能够有效的抑制性成熟，从而提高其生长速度和抗病能力，提高珍珠养殖的品质，达到促进养殖业的发展，提高养殖的经济效益为主要目的。国外已有近70%的水产养殖利用该项技术，我国近几年这方面的研究工作也已取得了

18、较大的成果。我们在浙江省计划重点科研项目的资助下，2006 年通过人工诱导成功获得了三倍体的三角帆蚌，对促进该项技术的成果转化，并推广应用三倍体养殖育珠技术，对提升我国淡水珍珠养殖业的发展将起到重要的作用，产业化应用前景十分可观，进而增强我国在淡水珍珠养殖业的竞争优势。本项目的研究，对于挖掘我国特有淡水育珠蚌种质资源的开发利用，获得自主知识产权具有重要的意义和产业化前景。五、项目实施方案、技术路线、组织方式与课题分解1项目实施方案根据项目研究内容，本项目研究的重点是建立淡水育珠蚌种质种苗培育基地，包括基础设施的建设，初步建设目标是100 亩水域面积，在此基础上对淡水珍珠养殖目前面临的共性关键技

19、术进行攻关，特别是在淡水珍珠蚌种质种苗优化选育、苗种改良、新品种培育、三倍体诱导等方面取得突破。为我省乃至全国提供优质的淡水育珠蚌种苗，提高珍珠的品质及养殖的经济效益为主要目标。（ 1）根据设计方案初步建成100 亩水域面积的苗种基地及配套的基础设施。（ 2） 利用分类学、形态学、 繁殖发育生物学、分子生物学等相关技术，对我国淡水育珠蚌的种质资源进行调查评估，为苗种的选育提供科学依据。（ 3）对淡水育珠蚌野生种群，通过地理种群间杂交、种间远缘杂交、引种驯化等手段选育优良品种。（ 4）利用染色体组工程技术，对目前普遍采用的淡水育珠蚌三角帆蚌进行三倍体诱导，获得三倍体三角帆蚌，并进行养殖育珠实验。

20、2技术路线3 .组织方式本项目实施产学研联合攻关，项目攻关协作组以本单位为依托，由绍 兴文理学院和本公司的研究所（省级高新技术研究开发中心）共同组织实 施，在自主开发的同时，坚持与大专院校和科研院所相结合，开展本项目 研究，依托本企业综合经济实力和国家农业产业化重点龙头企业的带动作 用，形成产业化，同时通过示范向全省推广。4 .课题分解本单位负责基地建设、规划基础设施、成果转化、推广应用工作；该 高校负责项目实施方案的制定、育珠蚌种质资源及遗传背景的调查、品种 选育、分子生物学测定、数据测定、总结等工作；公司研究所承担配合育 珠蚌的收集、品种选育、三倍体诱导、苗种繁育方面的工作。六、计划进度安

21、排本项目计划年限4年，2011年1月至2014年12月计划进度安排如下：2011年1月2011年12月：完成育珠蚌种质资源苗种基地建设及配套的基础设施。2012年1月2012年6月：淡水育珠蚌种质资源及遗传背景的调查，查清育珠蚌野生种群的分布、资源量、种质特征、遗传结构、纯洁性、生产性能等开展调查进行评估。2012年7月2013年12月：通过种质资源的优化选育、引种驯化、杂交选育、染色体倍性育种，获得淡水育珠蚌优良品种。2013年1月2013年12月：对选育的稚蚌进行育珠实验，检测蚌的生长性能、抗病能力、性腺发育情况、育珠性能等方面进行比较。2014年1月2014年10月：总结上报材料，促进成

22、果转化及推广应用。七、现有工作基础和条件1、项目实施产学研联合攻关、技术力量雄厚：本项目组成员具有高级职称 6 人，博士3 人、研究生2 人。项目组成员均为多年从事水产种质分析、营养及水产的研究开发工作。技术力量强，人员配备合理，使项目实施有了强有力的技术保证。项目承担单位，浙江山下湖珍珠集团股份有限公司是一家集珍珠养殖、加工、设计、销售、进出口、科学研究、开发于一体的、经国家八部委认定的农业产业化国家重点龙头企业, 是目前珍珠行业规模最大企业，国内珍珠行业唯一的上市企业。公司拥有现代化厂房31700 平方米，装备了国内外先进的生产设备，形成了从珍珠养殖、优化处理、项链首饰加工、精深加工等多条

23、生产线，年加工珍珠能力稳居行业首位。公司一直非常重视科技开发和技术创新，在与各科研机构和高等院校密切合作的同时努力发展自主研发，并逐步形成了一支研发、检测能力较强的科技队伍。公司的研究所也具备了相当的科研实力，组建了一支70 多人 , 由博士、硕士和大学本科学历为主的科研开发队伍，主要从事珍珠养殖技术、珍珠深加工技术研究和珍珠系列产品的开发。并先后与浙江大学、天津科技大学、中科院纳米工程中心、绍兴文理学院等大专院校、科研院所建立了长期合作关系，为企业的高速发展提供强大的技术保证和支持。已经完成和正在研究的科技成果和项目共28 项，已经获得授权或受理的专利 41 项； 同时引进了先进的检测设备，

24、成为公司科学研究和产品检测中心。公司为 “省级高新技术研发中心”、 “浙江省淡水珍珠质量检测中心工作站”。目前公司在浙江、江苏、湖南、湖北等省建立了养殖基地规模已达5万余亩，带动农户2.2 万户。另外， 项目合作单位绍兴文理学院， 目前拥有教授138人， 博士 117人，该高校的生物学专业是国家级的特色专业，浙江省重点专业，主要从事的研究方向是水生生物学、环境生态学，现具有高级职称的教师与科研人员 16 人，博士15 人，近年来承担完成浙江省自然科学基金项目、浙江省计划重点科研项目13 项，获教育部科技成果二等奖1 项，省自然科学基金一等奖1 项。2. 科研设施、设备基本具备：浙江山下湖珍珠集

25、团股份有限公司建立了省级高新技术研发中心，拥有2250平米的研究场所和一个占地800亩的淡水珍珠养殖实验基地，仪器、设备等资产原值500 余万元；绍兴文理学院拥有 5000 多平米的专业实验室，校内水产养殖基地，温室养殖系统，分子生物学、细胞生物学、繁殖发育生物学实验室是浙江省实验教学示范中心，仪器设备资产1500 多万元，完全具备承担该项目实施的硬件条件。3、项目已具备了较好的前期工作基础：本单位与合作单位现已完成了三角帆蚌三倍体繁育试验，初步掌握了三倍体培育的整个流程，成功培育出一批试验蚌，成活率达到了75.8%。 至目前为止，本项目的合作单位先后主持完成与淡水珍珠养殖相关的科研项目及论文

26、如下：（ 1 ）三角帆蚌三倍体诱导技术的研究，绍兴市重点项目2001125，起止年月：2001.12 2004.12（ 2） 三倍体三角帆蚌育珠技术的研究，浙江省计划重点科研项目2003C22014， 起止年月： 2003.12 2005.12.（ 3） 三角帆蚌染色体组工程的研究，浙江省自然科学基金30230， 起止年月：2002.5 2005.12（ 4）三角帆蚌珍珠形成相关基因的克隆与表达研究，浙江省自然科学基金Y305002，起止年月：2006.1 2008.12.（ 5）稀土元素铈在三角帆蚌中的生物机体剂量效应及作用机理，浙江省自然科学基金 Y307489,起止年月：2008.1-2

27、010.12（ 6）钙的吸收和沉积对提高三角帆蚌育珠品质的研究，绍兴市农业项目2005179，起止年月：2005.9 2007.12（ 7）优化珍珠囊对钙的代谢以提高三角帆蚌育珠品质的研究，浙江省教育厅2008.09（ 8）三角帆蚌卵子超微结构的研究，电子显微学报2005， 24（ 4） ： 431 433.（ 9）贝类染色体组工程的研究, 水产科学，2004， 23（ 4） ： 38-40.（ 10）三角帆蚌卵子胚胎发育的扫描电镜研究, 海峡两岸交流文集，2004.7.（ 11）三角帆蚌精子超微结构的电镜研究, 电子显微学报，2002， 21（ 5）（12）育珠蚌基因组DNM取方法的研究，水

28、利渔业，2006, 26 （2）（ 13） 2 种育珠蚌遗传多样性分析，水生态学杂志，2008， 1（ 1）（ 14）三角帆蚌珍珠囊发育过程中钙调素结合蛋白在组织细胞中的分布，（ 15）抑制性差减杂交分离珍珠形成相关基因(16) Yankun Gao, Mei Jiang, Tao Yang, Jian Ni, Jiangye Chen. A Cdc2-related protein kinase hPFTAIRE1 from human brain interacting with 14-3-3 proteins.Cell Res. 2006, 16(6): 539-547.(17) Jia

29、n Ni, YankunGao, Haopin Liu, Jiangye Chen, Candida albicans Cdc37 interacts with the Crk1 kinase and is required for Crk1 production, FEBS Letters, 2004,561:223-230.(18)淡水育珠蚌的 RNA1取与RT-PC的析，水利渔业，2007, 27 (3)(19) 一种无液氮的育珠蚌基因组 DNAE取方法，水利渔业，2006, 26 (2)(20)三角帆蚌养殖水体微生物群落动态研究水利渔业2004年第3期(21)角帆蚌肠道菌群的研究浙江大

30、学学报(理学版)2006年第2期(22)光合细菌对三角帆蚌肠道菌群及对蚌体生长的影响浙江大学学报：农业与生命科学版2007年33卷3期(23)不同浓度C寸对三角帆蚌养殖水体微生物和浮游生物的影响安徽农业科学 2007年35卷26期八、经费预算1、经费概算本项目计划总投资235万元，其中企业自筹225万元，诸暨市现代农 业发展专项资金补助10万元。具体项目预算见下表：省（市）级科技计划项目经费概算表项目名称：淡水育珠蚌种质种苗培育基地建设项目金额单位： 万元厅P概算科目名称合计省财政拨款 经费地方部门 配套经费自筹经费(1)(2)(3)(4)(5)1一、经费支出（合计）2351022521、设备

31、费415363（1）购置设备费21.5318.54（2）试制（改造）设备费2.52.55（3）设备租赁费1721562、材料费102873、测试化验加工费384、燃料动力费4495、差旅费（调研）3030106、会议费117、合作、协作研究与交流费30327128、出版/文献/信息传播/知识产权事 务费22139、人员劳务费96961410、专家咨询费1511、管理费17171612、其他开支221二、经费来源（合计）2351022521、申请省财政经费32、地方、部门配套拨款101043、自筹经费2252255（1）单位自有货币资金2256（2）其他资金省市财政科技经费拨付进度申请第1年第2

32、年第3年第4年金额（万元）55比例（为50502、经费概算说明（ 1）设备费：41 万元项目实施所需要添加和改造的设备、设施费用主要由下面几个方面组成：100亩池塘租金430元/亩/年X 100亩X 4年=17.2万元池塘改造维护费用2.5 万元购买水质测定仪1.5 万元，荧光显微镜20万元，合计21.5 万元（ 2）材料费：10 万元购买种蚌（四龄五龄蚌）25元/只X 4000只= 100000元（ 3）测试化验加工费：3 万元项目研发过程中，对水质、染色体倍率、珍珠质量、种质鉴定等进行测试，并研究不同品种的选育和苗种繁育情况，计算依据：水质监测：20元/样品X 350个=0.7万元染色体倍

33、率检测：200元/样品X 50个=1万元种质鉴定：5000元/样品X 2个=1万元珍珠质量检测：20元/样品X 150个=0.3万元（ 4）燃料动力费：4 万元主要用于分析检测、养殖水流循环用电费及燃料费，计划4 年总计 4 万元（ 5）差旅费：30 万元主要用于项目组，进行三角帆蚌种质资源调查、收集的交通费用及补贴，计划每年针对该项目，去北方和南方一些环境污染较少、蚌种资源丰富的地区如吉林、四川、广西和福建泉州等地收集不同产地的三角帆蚌种源及其他育珠蚌种苗，费用为2.5 万元 /次X 3次/年X 4年=30万元。（ 6）合作、协作研究与交流费：30 万元主要用于支付与高校的合作费用30万元（ 7）出版/文献 /信息传播 /知识产权事务费：2万元主要用于三角帆蚌染色体倍率和种质资源研