黄酮类化合物

1、第五章第五章 黄酮类化合物黄酮类化合物FLAVONOIDS第一节第一节 黄酮类化合物的结构分类与生物活性黄酮类化合物的结构分类与生物活性第二节第二节 黄酮类化合物的理化性质及显色反应黄酮类化合物的理化性质及显色反应第三节第三节 黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离第四节第四节 黄酮类化合物的检识与结构鉴定黄酮类化合物的检识与结构鉴定（一）基本结构：（一）基本结构：19521952年以前，黄酮类化合物主要年以前，黄酮类化合物主要是指基本母核为是指基本母核为2-2-苯基色原酮的一系列化合物。苯基色原酮的一系列化合物。OO12345678OO12345786123456第一节第一节 黄酮

2、类化合物的结构分类与生物活性黄酮类化合物的结构分类与生物活性一、黄酮类化合物的结构及分类一、黄酮类化合物的结构及分类 现在的黄酮类化合物则泛指两个苯环（现在的黄酮类化合物则泛指两个苯环（A与与B环）通环）通过中央三碳原子相互连接而成的一类化合物。过中央三碳原子相互连接而成的一类化合物。 天然黄酮类化合物母核上常连接有酚羟基、甲氧基、天然黄酮类化合物母核上常连接有酚羟基、甲氧基、甲基、异戊烯基等助色官能团，此外，还常与糖结甲基、异戊烯基等助色官能团，此外，还常与糖结合成苷。合成苷。OCCCACB（二）黄酮类化合物的分类（二）黄酮类化合物的分类 黄酮类化合物的苷元的结构类型根据黄酮类化合物的苷元的

3、结构类型根据三碳链氧化三碳链氧化程度、程度、B B环（苯基）连接位置（环（苯基）连接位置（2-2-位或位或3-3-位）以及三位）以及三碳链是否构成环状碳链是否构成环状等特点，可将主要的天然黄酮类化等特点，可将主要的天然黄酮类化合物分类：合物分类：OO12345678123456ABC1) C环是否饱和环是否饱和：不饱和：黄酮类不饱和：黄酮类饱和：二氢黄酮类饱和：二氢黄酮类OOOO黄酮黄酮OO二氢黄酮二氢黄酮2）中间三碳是否成环中间三碳是否成环 开环：开环： 查耳酮查耳酮 成环：成环： 六元环：大多六元环：大多 五元环：如橙酮五元环：如橙酮OO3）B环连接位置环连接位置C2连接：黄酮连接：黄酮C

4、3连接：异黄酮连接：异黄酮OOHOO异黄酮异黄酮OHO2345623456查耳酮查耳酮 OHC123456412O3567橙酮橙酮 4）C3有无羟基取代：有无羟基取代： 有有 C环不饱和：黄酮醇环不饱和：黄酮醇 C环饱和：二氢黄酮醇环饱和：二氢黄酮醇OOOHOOOH5）有无酮基：有无酮基：无无 黄烷黄烷(儿茶素儿茶素) 花色素花色素+OOHOOHOOOH二氢黄酮醇二氢黄酮醇黄酮醇黄酮醇OOHHOOHOHOH儿茶素儿茶素6）其它其它：双黄酮(biflavonoids) (三三)、常见取代基、常见取代基 OH，OCH3，CH3，异戊烯基，异戊烯基(四四)、取代位置、取代位置OH，OCH3等含氧基团

5、：等含氧基团：A环：环：5，7位位 B环：环：3，4位位 非含氧基团：非含氧基团： A环：环：6，8位位 B环：环：2，3位位OO C H3OO HO HH OH3C OO HOO银杏素具有具有解痉、降压、扩冠解痉、降压、扩冠作用。作用。 二氢查耳酮类二氢查耳酮类（Dihydrochalcones）黄烷黄烷-3-3，4-4-二醇类二醇类（Flavan-3,4-diols） 查耳酮类查耳酮类（Chalcones）二氢黄酮醇类二氢黄酮醇类（Flavanonols） 二氢异黄酮类二氢异黄酮类（ Isoflavanones ）二氢黄酮类二氢黄酮类（Flavanones） 异黄酮类异黄酮类（Isofla

6、vones）黄酮醇类黄酮醇类（Flavonol）黄酮类（黄酮类（Flavones）OOOOOHOOOOOHOOHOH 黄烷黄烷-3-3-醇类醇类（Flavan-3-ols）OOHOHOOHO 橙酮类橙酮类（Aurones) ) 双苯吡酮类双苯吡酮类（Xanthones) )OOOCHOOOOO黄酮类化合物的主要结构类型黄酮类化合物的主要结构类型 天然黄酮类化合物多以苷类形式存在，天然黄酮类化合物多以苷类形式存在， 组成黄酮苷的糖类主要有单糖、双糖、三糖、组成黄酮苷的糖类主要有单糖、双糖、三糖、酰化糖。酰化糖。 单糖类：单糖类：DGlu ， D半乳糖，半乳糖， D木糖，木糖， LRha， L阿拉

7、伯糖，阿拉伯糖， D葡萄糖醛酸等。葡萄糖醛酸等。 双糖类：槐糖类（双糖类：槐糖类（glc1-2glc） 龙胆二糖龙胆二糖(glc1-6glc) 芸香糖芸香糖(rha1-6glc) 新橙皮糖新橙皮糖(rha1-2glc) 刺槐二糖刺槐二糖(rha1-6glc三糖类：龙胆三糖三糖类：龙胆三糖(glc1-6 glc1- 2fru) 槐三糖槐三糖(glc1-2 glu1-2glc)酰化糖：酰化糖：2乙酰葡萄糖乙酰葡萄糖 咖啡酰基葡萄糖咖啡酰基葡萄糖 分布广泛分布广泛多种生理活性多种生理活性黄酮广泛存在自然界的某些植物和浆果中，黄酮广泛存在自然界的某些植物和浆果中，19741974年为止，年为止，已发表

8、的黄酮类化合物共已发表的黄酮类化合物共16741674个（主要是天然黄酮类，也个（主要是天然黄酮类，也有少部分为合成品，其中苷元有少部分为合成品，其中苷元902902个，苷个，苷722722个），并以个），并以黄黄酮醇类最为常见，约占总数的三分之一，其次为黄酮类，酮醇类最为常见，约占总数的三分之一，其次为黄酮类，占总数的四分之一以上，其余则较少见。占总数的四分之一以上，其余则较少见。至于至于双黄酮类多局限分布于裸子植物双黄酮类多局限分布于裸子植物，尤其松柏纲，银杏，尤其松柏纲，银杏纲和凤尾纲等植物中。纲和凤尾纲等植物中。至至19801980年，黄酮类化合物总数已达到年，黄酮类化合物总数已达到2

9、7212721个。个。二、黄酮类化合物的生物活性二、黄酮类化合物的生物活性 目前，总数大约有目前，总数大约有4 4千多种，其分子结构不尽千多种，其分子结构不尽相同，如芸香苷、橘皮苷、栎素、绿茶多酚、相同，如芸香苷、橘皮苷、栎素、绿茶多酚、花色糖苷、花色苷酸等都属黄酮。不同分子结花色糖苷、花色苷酸等都属黄酮。不同分子结构的黄酮可作用于身体不同的器官，如银杏山构的黄酮可作用于身体不同的器官，如银杏山楂楂-心血管系统，蓝梅心血管系统，蓝梅-眼睛，酸果眼睛，酸果-尿路系尿路系统，葡萄统，葡萄-淋巴、肝脏，接骨木果淋巴、肝脏，接骨木果-免疫系统，免疫系统，平时我们可以通过多食葡萄、洋葱、花椰莱、平时我们

10、可以通过多食葡萄、洋葱、花椰莱、喝红酒、多饮绿茶等方式来获得黄酮，作为身喝红酒、多饮绿茶等方式来获得黄酮，作为身体的一种补充。体的一种补充。 1. 对心血管系统的作用对心血管系统的作用 VpVp样作用样作用：芦丁、橙皮苷等有：芦丁、橙皮苷等有VpVp样作用，能降低血样作用，能降低血管脆性及异常通透性，可用作防治高血压及动脉硬管脆性及异常通透性，可用作防治高血压及动脉硬化的辅助治疗剂。化的辅助治疗剂。 扩冠作用扩冠作用：芦丁、槲皮素、葛根素、人工合成的力：芦丁、槲皮素、葛根素、人工合成的力可定。可定。 降血脂及胆固醇降血脂及胆固醇：木樨草素：木樨草素 2. 抗肝脏毒作用抗肝脏毒作用 从水飞蓟种子

11、中得到的水飞蓟素具有保肝作用，从水飞蓟种子中得到的水飞蓟素具有保肝作用，用于治疗急、慢性肝炎、肝硬化及多种中毒性用于治疗急、慢性肝炎、肝硬化及多种中毒性肝损伤。肝损伤。 （+ +）- -儿茶素儿茶素(catergen(catergen) )也可抗肝脏毒作用，也可抗肝脏毒作用，治疗脂肪肝及因半乳糖胺或四氯化碳等引起的治疗脂肪肝及因半乳糖胺或四氯化碳等引起的中毒性肝损伤。中毒性肝损伤。水水飞飞蓟蓟 3. 抗炎抗炎 芦丁及其衍生物羟乙基芦丁、二氢槲皮素等具抗芦丁及其衍生物羟乙基芦丁、二氢槲皮素等具抗炎作用。炎作用。 4. 抗菌及抗病毒作用抗菌及抗病毒作用 如木樨草素、黄芩苷、黄芩素如木樨草素、黄芩苷

12、、黄芩素 5. 解痉作用解痉作用 异甘草素、大豆素：解除平滑肌痉挛；异甘草素、大豆素：解除平滑肌痉挛； 大豆苷、葛根素及葛根总黄酮可缓解高血压患者大豆苷、葛根素及葛根总黄酮可缓解高血压患者的头痛等症状；的头痛等症状； 杜鹃素、川陈皮素、槲皮素、山奈酚、芫花素、杜鹃素、川陈皮素、槲皮素、山奈酚、芫花素、羟基芫花素：止咳祛痰。羟基芫花素：止咳祛痰。 6. 雌性激素样作用雌性激素样作用 大豆素大豆素(daidzein)等异黄酮具有雌性激素样作等异黄酮具有雌性激素样作用，可能与它们与己烯雌酚结构类似用，可能与它们与己烯雌酚结构类似。己烯雌酚HOOH大豆素(dadzein)OOHOOH7. 清除人体自由

13、基及清除人体自由基及抗肿瘤作用抗肿瘤作用 黄酮的功效是多方面的，它是一种很强的抗氧黄酮的功效是多方面的，它是一种很强的抗氧剂，可有效清除体内的氧自由基，如花青素、花剂，可有效清除体内的氧自由基，如花青素、花色素可以抑制油脂性过氧化物的全阶段溢出，这色素可以抑制油脂性过氧化物的全阶段溢出，这种阻止氧化的能力是维生素种阻止氧化的能力是维生素E E的十倍以上，这种抗的十倍以上，这种抗氧化作用可以阻止细胞的退化、衰老，也可阻止氧化作用可以阻止细胞的退化、衰老，也可阻止癌症的发生。癌症的发生。 第二节第二节 黄酮类化合物的理化性质及显色反应黄酮类化合物的理化性质及显色反应 一、性状一、性状 1. 1.

14、状态：状态：多为结晶性固体，少为（如黄酮苷类）无定多为结晶性固体，少为（如黄酮苷类）无定形粉末。形粉末。 2. 2. 旋光性：旋光性：游离苷元中，除二氢黄酮、二氢黄酮醇、黄游离苷元中，除二氢黄酮、二氢黄酮醇、黄烷、黄烷醇及双黄酮有旋光外，其余无旋光性。烷、黄烷醇及双黄酮有旋光外，其余无旋光性。 苷类由于结构中引入糖的分子，均有旋光性，且多为苷类由于结构中引入糖的分子，均有旋光性，且多为左旋。左旋。 3. 3. 颜色：颜色：与分子中是否存在交叉共轭体系、助与分子中是否存在交叉共轭体系、助色团的类型、数目及取代基的位置有关。色团的类型、数目及取代基的位置有关。 以黄酮为例，色原酮部分原本无色，但在

15、以黄酮为例，色原酮部分原本无色，但在2 2位引入苯环后，即形成交叉共轭体系，且通过电位引入苯环后，即形成交叉共轭体系，且通过电子的转移，重排，使共轭链延长，而表现出颜色。子的转移，重排，使共轭链延长，而表现出颜色。OOOOOO 黄酮、黄酮醇及苷类黄酮、黄酮醇及苷类 灰黄灰黄-黄色黄色 查耳酮查耳酮 黄黄-橙黄色橙黄色 二氢黄酮、二氢黄酮醇二氢黄酮、二氢黄酮醇 无色无色 异黄酮异黄酮 微黄色微黄色 其中，黄酮、黄酮醇及苷类、查耳酮等因分子中存其中，黄酮、黄酮醇及苷类、查耳酮等因分子中存在交叉共轭体系，在交叉共轭体系，在在7,4位引入位引入OH、OCH3等供电子等供电子基团则促进电子移位、重排，使

16、化合物颜色加深。基团则促进电子移位、重排，使化合物颜色加深。但在但在其它位置引入其它位置引入OH、OCH3等供电基影响较小。等供电基影响较小。 花色素及其苷元的颜色随花色素及其苷元的颜色随pH的不同而改变：呈现红的不同而改变：呈现红（pH8.5） 二、溶解性二、溶解性 1. 1. 一般游离苷元难溶或不溶于水，易溶于一般游离苷元难溶或不溶于水，易溶于MeOH, MeOH, EtOH, EtOAcEtOH, EtOAc, Et, Et2 2O O等有机溶剂等有机溶剂 黄酮、黄酮醇及查耳酮是平面型分子，分子堆黄酮、黄酮醇及查耳酮是平面型分子，分子堆砌紧密，分子间引力较大，更难溶于水。砌紧密，分子间引

17、力较大，更难溶于水。 二氢黄酮、二氢黄酮醇是非平面型分子，分子二氢黄酮、二氢黄酮醇是非平面型分子，分子排列不紧密，分子间引力降低，对水的溶解度稍排列不紧密，分子间引力降低，对水的溶解度稍大。大。 花色苷元（花青素）类虽系平面型分子，但因以花色苷元（花青素）类虽系平面型分子，但因以离子形式存在，具有盐的通性，故亲水性较强，离子形式存在，具有盐的通性，故亲水性较强，水溶度较大。水溶度较大。花青素二氢黄酮X -或OH -OORHOH 2. 黄酮苷元分子中引入羟基，水溶性将增大；羟黄酮苷元分子中引入羟基，水溶性将增大；羟基甲基化后，则增加在有机溶剂中的溶解度。基甲基化后，则增加在有机溶剂中的溶解度。

18、如一般黄酮类化合物不溶于石油醚中，可与如一般黄酮类化合物不溶于石油醚中，可与脂 溶 性 杂 质 分 开 ， 但 川 陈 皮 素脂 溶 性 杂 质 分 开 ， 但 川 陈 皮 素（5,6,7,8,3,4-5,6,7,8,3,4-六甲氧基黄酮）却可溶于石六甲氧基黄酮）却可溶于石油醚。油醚。 3. 3. 黄酮类化合物的羟基糖苷化后，水溶性相应黄酮类化合物的羟基糖苷化后，水溶性相应增大，而在有机溶剂中的溶解度相应减小。而增大，而在有机溶剂中的溶解度相应减小。而且糖链越长，水溶度越大。且糖链越长，水溶度越大。 黄酮苷一般易溶于黄酮苷一般易溶于H H2 2O, MeOH, EtOHO, MeOH, EtO

19、H等，难溶等，难溶或不溶于苯，氯仿等有机溶剂。或不溶于苯，氯仿等有机溶剂。三、酸碱性三、酸碱性 1. 酸性酸性 黄 酮 类 化 合 物 多 具 有 酚 羟 基 而 呈 酸 性 ， 可黄 酮 类 化 合 物 多 具 有 酚 羟 基 而 呈 酸 性 ， 可 溶于碱性水溶液，吡啶，甲酰胺及二甲基甲酰胺。溶于碱性水溶液，吡啶，甲酰胺及二甲基甲酰胺。 酸性强弱顺序：酸性强弱顺序：7, 4-7, 4-二羟基二羟基 7, 7, 或或44羟羟基基 一般酚羟基一般酚羟基5-5-羟基羟基 此性质可用于提取、分离及鉴定工作。此性质可用于提取、分离及鉴定工作。 2. 碱性碱性 - -吡喃酮环上的吡喃酮环上的1-1-位

20、氧原子上有未共用电子对，表现微弱位氧原子上有未共用电子对，表现微弱的碱性，可与强无机酸如浓硫酸，盐酸生成盐，但极不的碱性，可与强无机酸如浓硫酸，盐酸生成盐，但极不稳定，加水即可分解。稳定，加水即可分解。 黄酮类化合物溶于浓硫酸中生成的盐常表性特殊的颜色，黄酮类化合物溶于浓硫酸中生成的盐常表性特殊的颜色，可用于鉴别。可用于鉴别。H2OHClClOOHOO四、显色反应四、显色反应(一一) 还原反应还原反应 1. 盐酸盐酸-镁粉（盐酸镁粉（盐酸-锌粉）锌粉）反应反应 黄酮、黄酮醇及二氢黄酮、二氢黄酮醇类在盐酸黄酮、黄酮醇及二氢黄酮、二氢黄酮醇类在盐酸- -镁粉镁粉作用下，易被氢化还原，迅速生成橙红作

21、用下，易被氢化还原，迅速生成橙红- -紫红（个别有紫紫红（个别有紫- -兰色）。兰色）。 将样品溶于甲醇或乙醇，加少量镁粉振摇，滴加几滴将样品溶于甲醇或乙醇，加少量镁粉振摇，滴加几滴浓盐酸，浓盐酸，1-21-2分钟内（必要时微热）即可出现颜色。分钟内（必要时微热）即可出现颜色。 B B环有环有-OH-OH或或OCHOCH3 3取代时，颜色随之加深，查耳酮、橙酮、取代时，颜色随之加深，查耳酮、橙酮、儿茶素类则不反应。儿茶素类则不反应。 2. 四氢硼钠反应四氢硼钠反应 是对是对二氢黄酮类化合物专属性较强的一种二氢黄酮类化合物专属性较强的一种还原剂，与二氢黄酮类化合物产生红还原剂，与二氢黄酮类化合物

22、产生红- -紫色。紫色。其它黄酮类化合物均不显色。可与之区别。其它黄酮类化合物均不显色。可与之区别。 （二）金属盐类试剂的络合反应（二）金属盐类试剂的络合反应 黄酮类化合物分子结构中多有黄酮类化合物分子结构中多有3-OH, 4=O; 5-OH, 3-OH, 4=O; 5-OH, 4=O; 4=O; 邻二酚羟基，常可与铝盐、铅盐、锆盐、邻二酚羟基，常可与铝盐、铅盐、锆盐、镁盐等试剂生成有色络合物。镁盐等试剂生成有色络合物。1. 1. 铝盐铝盐 1%AlCl1%AlCl3 3或或Al(NOAl(NO3 3) )3 3： 生成络合物为黄色生成络合物为黄色( ( max=415nm)max=415nm

23、)，并有荧光。，并有荧光。2. 铅盐铅盐 1%PbAc1%PbAc2 2或碱式醋酸铅水液。生成黄或碱式醋酸铅水液。生成黄- -红色沉红色沉淀。淀。 醋酸铅可沉淀具有邻二酚羟基或兼有醋酸铅可沉淀具有邻二酚羟基或兼有3-OH, 3-OH, 4=O4=O或或5-OH, 4=O5-OH, 4=O者。者。 碱式醋酸铅沉淀能力大，一般酚类化合物均碱式醋酸铅沉淀能力大，一般酚类化合物均可为之沉淀。可为之沉淀。 3. 锆盐锆盐: 2%二二氯氧化锆甲醇液氯氧化锆甲醇液观察颜色2%枸橼酸甲醇液黄色1ml2% ZrOCl210ml甲醇溶样品0.5-1mg黄色不褪黄色褪去2%枸橼酸黄色锆络合物 锆盐3-OH, 4=O

24、5-OH, 4=O 4. 镁盐镁盐 醋酸镁甲醇液作显色剂，可在纸上进行。醋酸镁甲醇液作显色剂，可在纸上进行。 二氢黄酮（醇）类显天蓝色荧光，若具有二氢黄酮（醇）类显天蓝色荧光，若具有C C5 5-OH-OH，色泽更明显。色泽更明显。 而黄酮、黄酮醇及异黄酮类则显黄而黄酮、黄酮醇及异黄酮类则显黄- -橙黄橙黄- -褐色。褐色。 5. 氯化锶氯化锶(SrCl2) 使具有邻二酚羟基的黄酮显绿使具有邻二酚羟基的黄酮显绿- -棕色棕色- -黑色沉淀。黑色沉淀。 6. 三三氯化铁氯化铁(FeCl3) 检查酚羟基。检查酚羟基。 多数黄酮类化合物具有酚羟基，可产生正多数黄酮类化合物具有酚羟基，可产生正 反应，

25、生成绿、蓝、黑、紫等颜色。反应，生成绿、蓝、黑、紫等颜色。（三）硼酸显色反应（三）硼酸显色反应 条件：条件：1 具有下列结构（具有下列结构（5-羟基黄酮，羟基黄酮，2-羟基查耳酮）羟基查耳酮） 2 有无机酸或有机酸存在有无机酸或有机酸存在下，可与硼酸反应显亮黄色下，可与硼酸反应显亮黄色CCCOOH5-5-羟基黄羟基黄酮酮 2-2-羟基查羟基查耳酮耳酮 OOOHOHOOH（四）碱性试剂显色反应（四）碱性试剂显色反应 日光及紫外光下，通过纸斑反应，观察样品用碱日光及紫外光下，通过纸斑反应，观察样品用碱性试剂处理后的色变情况。性试剂处理后的色变情况。 1. 1. 二氢黄酮类易在碱液中开环，转变成相应

26、异二氢黄酮类易在碱液中开环，转变成相应异构体构体查耳酮类化合物，显橙查耳酮类化合物，显橙- -黄色黄色。HOHOHOOO 2. 2. 黄酮醇类在碱液中先呈黄色，通入空气后变黄酮醇类在碱液中先呈黄色，通入空气后变为棕色，据此可与黄酮类区别。为棕色，据此可与黄酮类区别。 3. 3. 黄酮类化合物当分子中有邻二酚羟基取代或黄酮类化合物当分子中有邻二酚羟基取代或3,4-3,4-二羟基取代时，在碱液中不安定，很快氧二羟基取代时，在碱液中不安定，很快氧化，由黄色化，由黄色深红色深红色绿棕色沉淀。绿棕色沉淀。小结小结黄酮的基本母核黄酮的结构和分类物理性质形态、颜色、旋光性、溶解度化学性质酸性碱性显色反应还原

27、反应盐的反应硼酸反应OOABC1.饱和程度2.B环位置3.是否成环第三节第三节 黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离 一、提取一、提取 黄酮类化合物在花、叶、果等组织中，多以苷的黄酮类化合物在花、叶、果等组织中，多以苷的形式存在；形式存在； 在木部坚硬组织中，多以游离苷元形式存在；在木部坚硬组织中，多以游离苷元形式存在； 根据化合物极性不同，溶解性不同，采用不同溶根据化合物极性不同，溶解性不同，采用不同溶剂提取。剂提取。1. 大多数黄酮大多数黄酮苷元苷元 多用多用CHCl3、Et2O、EtOAc等极性较小溶剂等极性较小溶剂提取；提取； 对于多对于多OCH3化的游离黄酮苷元，用苯、石

28、油化的游离黄酮苷元，用苯、石油醚提取；醚提取； 2. 苷类苷类 对于黄酮苷及极性稍大的苷元，如查耳酮、橙酮、对于黄酮苷及极性稍大的苷元，如查耳酮、橙酮、双黄酮、羟基黄酮等，用双黄酮、羟基黄酮等，用EtOAc、EtOH、Me2CO、MeOH:H2O(1:1)等极性较大溶剂提取。等极性较大溶剂提取。 3. 多糖苷类多糖苷类：沸水提取。：沸水提取。 4. 含羟基的苷或苷元含羟基的苷或苷元：可用碱水提取。：可用碱水提取。 二、粗提物的精制处理二、粗提物的精制处理 1 溶剂萃取法去杂溶剂萃取法去杂 植物叶子的醇浸液植物叶子的醇浸液-石油醚处理，除去叶绿素、石油醚处理，除去叶绿素、胡萝卜素等脂溶性色素。胡

29、萝卜素等脂溶性色素。 药材水溶液药材水溶液-加入多倍量浓醇，以沉淀除去蛋加入多倍量浓醇，以沉淀除去蛋白质、多糖类等水溶性杂质。（水溶醇沉法）白质、多糖类等水溶性杂质。（水溶醇沉法） 在萃取除杂的同时，可使不同极性或极性相差在萃取除杂的同时，可使不同极性或极性相差较大者分离，如极性不同的苷和苷元，极性苷较大者分离，如极性不同的苷和苷元，极性苷元和非极性苷元。元和非极性苷元。药材药材碱水液碱水液 H H+ + OHOH- - 沉淀沉淀（黄酮苷，苷元）（黄酮苷，苷元） 水水 （水杂，（水杂，M M+ +） 碱提取酸沉淀法碱提取酸沉淀法适合酸性成分适合酸性成分具有具有ArAr-OH-OH的黄酮的黄酮2

30、 碱提取酸沉淀法碱提取酸沉淀法适用于含酚羟基的化合物，如槐米中芦丁的提取。适用于含酚羟基的化合物，如槐米中芦丁的提取。3 炭粉吸附法炭粉吸附法 适用于苷类的精制工作。适用于苷类的精制工作。 植物的甲醇提取液加活性炭至吸附完全，过滤植物的甲醇提取液加活性炭至吸附完全，过滤得吸附苷的活性炭粉末。得吸附苷的活性炭粉末。 依次用沸水、沸甲醇、依次用沸水、沸甲醇、7%7%酚酚/ /水、水、15%15%酚酚/ /醇洗醇洗脱，分步收集、检查、合并。脱，分步收集、检查、合并。 大部分苷类可用大部分苷类可用7%7%酚酚/ /水洗下，经减压浓缩至水洗下，经减压浓缩至小体积，乙醚除酚，余下水层经减压浓缩得较小体积，

31、乙醚除酚，余下水层经减压浓缩得较纯黄酮苷。纯黄酮苷。适于苷类的精制适于苷类的精制 4. 树脂吸附法树脂吸附法 吸附树脂的特点：多孔性吸附树脂的特点：多孔性（有满足不同要求的（有满足不同要求的品种规格）；品种规格）；比表面积大比表面积大（具有良好吸附能力（具有良好吸附能力的基础）。的基础）。 吸附树脂按其化学结构，可分两类：吸附树脂按其化学结构，可分两类：非极性吸非极性吸附树脂；极性吸附树脂。附树脂；极性吸附树脂。 吸附树脂的使用：吸附树脂的使用：要在树脂柱中进行预处理后要在树脂柱中进行预处理后才能使用。才能使用。5 离子交换法离子交换法 用阳、阴离子交换树脂从水提液中吸附用阳、阴离子交换树脂从

32、水提液中吸附黄酮类化合物，与不被吸附的杂质分离，黄酮类化合物，与不被吸附的杂质分离，再用甲醇将黄酮类化合物洗脱。再用甲醇将黄酮类化合物洗脱。 分离依据：分离依据： 1 1极性不同极性不同- - 色谱法（吸附、分配）色谱法（吸附、分配） 2 2、分子大小不同、分子大小不同- -葡聚糖凝胶分子筛或膜技术分离。葡聚糖凝胶分子筛或膜技术分离。 3 3、酸性不同、酸性不同-pH-pH梯度萃取法。梯度萃取法。 4 4、含特殊官能团如邻二酚羟基等、含特殊官能团如邻二酚羟基等, ,可用金属盐配位可用金属盐配位化合能力不同等特点进行分离。化合能力不同等特点进行分离。三、分离三、分离 1. 极性大小不同，利用吸附

33、或分配原理进行色极性大小不同，利用吸附或分配原理进行色谱分离谱分离 常用吸附剂有聚酰胺、硅胶、纤维素粉。常用吸附剂有聚酰胺、硅胶、纤维素粉。 ）聚酰胺色谱：）聚酰胺色谱： 其原理是酰胺羰基与黄酮酚羟基形成氢键缔其原理是酰胺羰基与黄酮酚羟基形成氢键缔合而吸附，吸附能力与酚羟基多少、位置及氢合而吸附，吸附能力与酚羟基多少、位置及氢键缔合力大小有关。键缔合力大小有关。 原理：通过聚酰胺分子上的酰胺基（原理：通过聚酰胺分子上的酰胺基（ ）与黄酮）与黄酮分子上的分子上的ArAr-OH-OH形成氢键缔合而产生吸附。形成氢键缔合而产生吸附。NHCO黄酮类化合物从聚酰胺柱洗脱时有下列规律黄酮类化合物从聚酰胺柱

34、洗脱时有下列规律：苷元相同，洗脱先后顺序一般为：苷元相同，洗脱先后顺序一般为： 三糖苷三糖苷 双糖苷双糖苷 单糖苷单糖苷 苷元苷元母核上增加羟基，洗脱速度相应减慢母核上增加羟基，洗脱速度相应减慢 羟基位置的影响：具有邻位羟基黄酮羟基位置的影响：具有邻位羟基黄酮 具有对位（或具有对位（或间位）羟基黄酮间位）羟基黄酮不同类型的黄酮类化合物，先后流出顺序一般是：不同类型的黄酮类化合物，先后流出顺序一般是： 异黄酮异黄酮 二氢黄酮醇二氢黄酮醇 黄酮黄酮 黄酮醇黄酮醇分子中芳香核、共轭双键多者吸附力强，故查耳酮往分子中芳香核、共轭双键多者吸附力强，故查耳酮往往较相应的二氢黄酮难于洗脱。往较相应的二氢黄酮

35、难于洗脱。）硅胶色谱）硅胶色谱 主要适用于分离如异黄酮、二氢黄酮、二氢黄酮醇、甲主要适用于分离如异黄酮、二氢黄酮、二氢黄酮醇、甲基化、乙酰化黄酮及黄酮醇类。基化、乙酰化黄酮及黄酮醇类。（1 1）分离）分离苷元苷元时：时：用用氯仿氯仿- -甲醇甲醇混合溶剂洗脱。混合溶剂洗脱。（2 2）分离）分离苷苷时：用时：用氯仿氯仿- -甲醇甲醇- -水水或或乙酸乙酯乙酸乙酯- -丙酮丙酮- -水水洗脱。洗脱。2. 利用分子大小不同，用葡聚糖凝胶分子筛分离利用分子大小不同，用葡聚糖凝胶分子筛分离 主要用两种型号的凝胶主要用两种型号的凝胶SephadexSephadex-G-G和和Sephadex-LH20Se

36、phadex-LH20型型 （1 1）用）用SephadexSephadex LH-20 LH-20分离游离的黄酮，主要是靠吸分离游离的黄酮，主要是靠吸附作用，附作用，ArAr-OH-OH多的化合物极性强，吸附力强，难洗脱。多的化合物极性强，吸附力强，难洗脱。 （2 2）分离黄酮苷，分子筛起主导作用，按分子量由大）分离黄酮苷，分子筛起主导作用，按分子量由大到小的顺序流出柱体。到小的顺序流出柱体。 常用洗脱剂：常用洗脱剂：碱性水溶液，含盐水溶液碱性水溶液，含盐水溶液 醇及含水醇醇及含水醇 含水丙酮，甲醇氯仿含水丙酮，甲醇氯仿 利用酸性强弱，采用利用酸性强弱，采用pH梯度萃取法梯度萃取法 混合物溶

37、于有机溶剂，依次用混合物溶于有机溶剂，依次用NaHCO3、Na2CO3、0.2%NaOH、4%NaOH萃取，相应的黄酮类萃取，相应的黄酮类化合物洗脱顺序：化合物洗脱顺序：7,4二羟基二羟基7或或4羟基羟基一般酚一般酚羟基羟基 羟基黄酮羟基黄酮样品醚溶样品醚溶液液5%NaHCO5%NaHCO3 37,47,4二二OHOH5%Na5%Na2 2COCO3 37 7或或4-OH4-OH0.2%NaOH0.2%NaOH一般一般ArAr-OH-OH5%NaOH5%NaOH5-OH5-OH水油根据分子中某些特定官能团进行分离根据分子中某些特定官能团进行分离 醋酸铅沉淀法：具有邻二酚羟基的成分可被醋酸铅沉淀

38、。醋酸铅沉淀法：具有邻二酚羟基的成分可被醋酸铅沉淀。 具邻二具邻二ArOH： 中性中性Pb(AC)2可沉淀可沉淀 不具邻二不具邻二ArOH：碱式：碱式Pb(AC)2 可沉淀可沉淀 脱铅方法脱铅方法硫化氢（硫化氢（PbSPbS 具吸附性，现在多不用）具吸附性，现在多不用）硫酸盐或磷酸盐硫酸盐或磷酸盐阳离子交换树脂阳离子交换树脂 硼酸络合法：根据具有邻二酚羟基的黄酮与硼酸络合，硼酸络合法：根据具有邻二酚羟基的黄酮与硼酸络合，生成物易溶于水的性质与其它类型黄酮分离。生成物易溶于水的性质与其它类型黄酮分离。 通常在不与水混溶的有机溶剂如乙醚中，用硼酸液萃通常在不与水混溶的有机溶剂如乙醚中，用硼酸液萃取

39、，水相即为邻二酚羟基类黄酮。取，水相即为邻二酚羟基类黄酮。第四节第四节 黄酮类化合物的检识与结构测定黄酮类化合物的检识与结构测定目前主要采用的方法有：目前主要采用的方法有： 与标准品或与文献对照与标准品或与文献对照PPC或或TLC得到的得到的Rf或或hRf值值（Rf 100） 分析对比样品在甲醇溶液中及加入酸、碱或金属盐分析对比样品在甲醇溶液中及加入酸、碱或金属盐类试剂后得到的类试剂后得到的UV光谱光谱 1H-NMR 13C-NMR MS一、色谱法在黄酮类化合物鉴定中的应用一、色谱法在黄酮类化合物鉴定中的应用 1. 纸色谱纸色谱(PPC) 适用于分离各种天然黄酮类化合物及其苷类的混合物。适用于

40、分离各种天然黄酮类化合物及其苷类的混合物。 纸层析在本质上是纸层析在本质上是液液分配层析液液分配层析，利用不同的物质在固定，利用不同的物质在固定相与流动相之间的分配系数不同而进行分离。相与流动相之间的分配系数不同而进行分离。 纸色谱法纸色谱法 支持剂：纤维素支持剂：纤维素 固定相：纤维素上吸附的水固定相：纤维素上吸附的水 展开剂：与水不相混溶的有机溶剂或水饱和的有机溶剂展开剂：与水不相混溶的有机溶剂或水饱和的有机溶剂 Rf 值：极性大，值：极性大，Rf 值小；极性小，值小；极性小，Rf 值大。值大。 应用：适合于亲水性较强的物质。应用：适合于亲水性较强的物质。（1）常用溶剂系统）常用溶剂系统苷

41、类成分苷类成分可采用双向色谱法展开，第一相展开采用醇性溶可采用双向色谱法展开，第一相展开采用醇性溶剂，如剂，如BAW系统（正丁醇：醋酸：水系统（正丁醇：醋酸：水4：1：5上层）；第上层）；第二相展开用水性溶剂，如二相展开用水性溶剂，如2-6%醋酸等。醋酸等。 黄酮类化合物黄酮类化合物苷元苷元则多采用醇性溶剂。则多采用醇性溶剂。 花色苷及其苷元花色苷及其苷元，可用含盐酸或醋酸的溶剂作展开剂。，可用含盐酸或醋酸的溶剂作展开剂。（2）检测）检测 1）UV灯检查：灯检查： 有色斑点，氨蒸汽处理后产生明显颜色有色斑点，氨蒸汽处理后产生明显颜色变化。变化。 2）喷显色剂：）喷显色剂： 2AlCl3甲醇液（

42、甲醇液（UV灯下检查）。灯下检查）。 2. 薄层色谱薄层色谱(TLC)注意：注意： Rf值是化合物的一种物理常数，值是化合物的一种物理常数，即在即在 特定的色谱条件下，同一化合物应特定的色谱条件下，同一化合物应具有同具有同 Rf值。值。常用常用薄层色谱薄层色谱(TLC) ）硅胶薄层色谱）硅胶薄层色谱 用于分离和鉴定弱极性黄酮类化合物较好。用于分离和鉴定弱极性黄酮类化合物较好。 常用甲苯：甲酸甲酯：甲酸（常用甲苯：甲酸甲酯：甲酸（5：4：1）；苯：甲醇（）；苯：甲醇（95：5）或苯：甲醇：冰醋酸（）或苯：甲醇：冰醋酸（35：5：5）等作为展开剂。）等作为展开剂。 ）聚酰胺薄层色谱）聚酰胺薄层色谱

43、 适用范围广，可分离含游离酚羟基的黄酮及其苷类。适用范围广，可分离含游离酚羟基的黄酮及其苷类。 常用展开系统：乙醇：水（常用展开系统：乙醇：水（3：2）；丙酮：水（）；丙酮：水（1：1）等。等。 二、紫外及可见光谱在黄酮类化合物鉴定中的应用二、紫外及可见光谱在黄酮类化合物鉴定中的应用可用于确定黄酮母核类型及确定某些位置是否含有羟基。可用于确定黄酮母核类型及确定某些位置是否含有羟基。一般程序：一般程序：1.测定样品在甲醇溶液中的测定样品在甲醇溶液中的UV光光谱以了解母核类型；谱以了解母核类型；2.在甲醇溶液中分别加入各种诊断试剂后测在甲醇溶液中分别加入各种诊断试剂后测UV谱和可见谱和可见光谱以了

44、解光谱以了解3,5,7,3,4有无羟基及邻二酚羟基；有无羟基及邻二酚羟基；3.苷类可水解后（或先甲基化再水解），再用上法测苷元苷类可水解后（或先甲基化再水解），再用上法测苷元的的UV谱以了解糖的连接位置。谱以了解糖的连接位置。1、黄酮类化合物在甲醇溶液中的紫外光谱、黄酮类化合物在甲醇溶液中的紫外光谱 多数黄酮类化合物由两个主要吸收带组成：多数黄酮类化合物由两个主要吸收带组成： 带带I在在300-400nm区间，由区间，由B环桂皮酰系统的电子环桂皮酰系统的电子跃迁所引起；跃迁所引起；OOOO带带II在在220-280nm区间，由区间，由A环苯甲酰系统的电子环苯甲酰系统的电子跃迁所引起。跃迁所引起

45、。OOOO 带带II(240-II(240-285nm)285nm)（苯甲（苯甲酰系统）酰系统）带带I(300-I(300-400nm)400nm)桂皮酰系统桂皮酰系统类类 型型说说 明明 250-285304-350黄酮类黄酮类-OH-OH越多，带越多，带I I带带IIII越红移越红移 B B环环3,43,4有有-OH-OH，带，带IIII为为双峰（主峰伴双峰（主峰伴肩峰）肩峰）328-357黄酮醇类黄酮醇类(3-OR)(3-OR) 352-385黄酮醇类黄酮醇类(3-OH)(3-OH) 245-270270-295300-340异黄酮类异黄酮类二氢黄酮（二氢黄酮（醇）醇）B B环上有环上有

46、-OH, -OH, OCHOCH3 3对带对带I I影影响不大响不大340-390或或340-390(Ia) 300-320(Ib)查耳酮类查耳酮类查耳酮查耳酮2-OH2-OH使带使带I I红移的红移的影响最大影响最大370-430(3-4个个小峰小峰) )橙酮类橙酮类220-2702、加入诊断试剂后引起的位移及结构测定、加入诊断试剂后引起的位移及结构测定常用的诊断试剂：常用的诊断试剂：甲醇钠甲醇钠 NaOMe 醋酸钠醋酸钠 NaOAc 醋酸钠醋酸钠/硼酸硼酸 NaOAc/H3BO3 三氯化铝三氯化铝 AlCl3若样品为苷，可进行水解，水解后测苷元若样品为苷，可进行水解，水解后测苷元UV加入试

47、剂加入试剂带带II带带I说明说明样品样品+MeOH2 5 0 -285304-385两峰强度基本相同，具体位置与两峰强度基本相同，具体位置与母核上电负性取代基母核上电负性取代基(-OH, -OCH3)有关，有关，-OH, -OCH3越多，越多，越长移越长移 +NaOMe或或+NaOHA 环 有环 有 -O H ， 红， 红移小，无移小，无意义意义 40-60nm（ 不变或增强）不变或增强） 50-60nm（ 下降）下降）有有4-OH，无，无3-OH 有有3-OH，无，无4- OH有有3,4-OH或或3,3,4-OH（衰减更快）（衰减更快） 7-OH带带I，II随加随加NaOMe时间延长，逐渐衰

48、减时间延长，逐渐衰减 320-330nm有小峰有小峰+NaOAc(未熔融未熔融) 5-20有有3-OH,4OH也也发生红移，发生红移，但意义不大但意义不大7-OH加入试剂加入试剂带带II带带I说明说明+NaOAc/H3BO3 5 -10 12-30 有有6,7-OH或或7,8-OH (5,6-OH无无)B环有邻二酚羟基环有邻二酚羟基 AlCl3/HCl 60 50-60 35-55 17-20 0有有3-OH有有3,5-二二OH有有5-OH，无，无3-OH有有6-OR无无3-OH, 5-OH或或6-OR存在存在AlCl3光谱光谱-AlCl3/HCl光谱光谱 30-4050-650B环有邻二酚羟

49、基环有邻二酚羟基A,B环皆有邻二酚羟基环皆有邻二酚羟基A,B环皆无邻二酚羟基环皆无邻二酚羟基说明：说明：1）+NaOMe, OHOMe，红移，红移 另有有另有有3,4-OH或或3,3,4-OH时，在时，在 NaOMe作用下易氧化破坏，故峰有衰减。作用下易氧化破坏，故峰有衰减。2）NaOAc为弱碱，仅使酸性较强者，如为弱碱，仅使酸性较强者，如7,4-OH解离。解离。OOO3）HCl/H2OAlCl3Al3+OOOHOHOHOAl3+Al3+OOOOOHOOOOHOHHOOH形成络合物的能力：形成络合物的能力：黄酮醇黄酮醇3-OH 黄酮黄酮5-OH（二氢黄酮（二氢黄酮5-OH） 邻二邻二酚羟基酚羟

50、基 二氢黄酮醇二氢黄酮醇5-OH邻二酚羟基和二氢黄酮醇邻二酚羟基和二氢黄酮醇5-OH在酸性条件下不与在酸性条件下不与AlCl3络合；络合；但不在酸性条件下，五者皆与但不在酸性条件下，五者皆与Al3+络合；络合；形成络合物越稳定，红移越多。形成络合物越稳定，红移越多。4）二者相减可检测邻二酚羟基。）二者相减可检测邻二酚羟基。 三、三、1H-NMR在黄酮类化合物结构鉴定中的应用在黄酮类化合物结构鉴定中的应用 常用溶剂：氘代氯仿（常用溶剂：氘代氯仿（CDDl3），氘代二甲基），氘代二甲基亚砜（亚砜（DMSO-d6），氘代吡啶（），氘代吡啶（C5D5N）。）。 也可将黄酮类化合物作成三甲基硅醚衍生物溶

51、也可将黄酮类化合物作成三甲基硅醚衍生物溶于四氯化碳中进行测定。于四氯化碳中进行测定。优点：优点：无干扰信号，勿须昂贵的氘代试剂；无干扰信号，勿须昂贵的氘代试剂；供试后的样品用含水甲醇处理可回收；供试后的样品用含水甲醇处理可回收；三甲基硅醚衍生物可很方便的转变成乙酰衍生物或甲三甲基硅醚衍生物可很方便的转变成乙酰衍生物或甲醚衍生物。醚衍生物。hesperidinMeOH-H2Ohexa-trimethyl-silyl-rha-glc-OOOOSi(CH3)3OCH3OSi(CH3)3pyridin(CH3)3SiCl(CH3)3Si2NHrha-glc-OOOOHOCH3OH 7 （2）7-OH黄

52、酮黄酮H-5 7.7-8.2 (d, J=9Hz)H-6 6.4-7.1(dd, J=9, 2.5Hz) H-8 6.8-7.0 (d, J=2.5Hz) 5OOHO68H-5较较H-6、H-8低场，是由于羰基的负屏蔽效应低场，是由于羰基的负屏蔽效应的影响。的影响。H-6、H-8较较5, 7-二二OH黄酮低场，且相互位置可黄酮低场，且相互位置可能颠倒。能颠倒。 2. B环质子：环质子：6.57.9, 较较A环稍低场环稍低场 （1）4-氧取代黄酮类化合物氧取代黄酮类化合物5632ORH-3, 5 6.5-7.1, d, J=8.5HzH-2, 6 7.1-7.9, d, J=8.5Hz由于由于C

53、环对环对H-2, 6的负屏蔽作用大于对的负屏蔽作用大于对H-3, 5，且，且H-3, 5受受4-OR的屏蔽作用，故前者较低场；的屏蔽作用，故前者较低场；C环氧化程度越高，环氧化程度越高，H-2, 6处于越低场的位置。处于越低场的位置。B环环上的芳氢有两组信号：上的芳氢有两组信号：H-3,5, H-2,6构成构成AABB系统，可简单看成系统，可简单看成AB系统。系统。（2）3, 4-二氧取代黄酮类化合物二氧取代黄酮类化合物 562ORORH-2受受C环负屏蔽和环负屏蔽和3-OR屏蔽作用，屏蔽作用，H-6 也受也受C环负屏环负屏蔽作用，而蔽作用，而H-5则仅则仅4-OR屏蔽作用。故由低场到高场的屏

54、蔽作用。故由低场到高场的顺序为：顺序为：H-6 H-2 H-5。但有时也会发生但有时也会发生H-2和和H-6重叠的现象。重叠的现象。 3, 4-二氧取代黄酮及二氧取代黄酮及 黄酮醇黄酮醇H-5 6.7-7.1 d, J=8.5HzH-2 7.2 d, J=2.5HzH-6 7.9 dd, J=2.5, 8.5Hz 3, 4-二氧取代异黄酮、二氢黄酮及二氧取代异黄酮、二氢黄酮及 二氢黄酮醇二氢黄酮醇 H-2, 5,6常作为一个复杂多重峰（通常常作为一个复杂多重峰（通常为两组峰）为两组峰） 6.7-7.1562OROR3, 4,5-三氧取代黄酮类化合物三氧取代黄酮类化合物62OR2OR1OR3若若

55、R1=R2=R3=H，则，则H-2,6为单峰，为单峰， 6.7-7.5若上述条件不成立，则若上述条件不成立，则H-2,6分别为二重峰分别为二重峰（J=2Hz） 3. C环质子环质子 黄酮类黄酮类H-3, 6.33OHO四、四、13C-NMR 主要用在以下三个方面主要用在以下三个方面: （一）黄酮类化合物（一）黄酮类化合物骨架骨架类型的判断类型的判断 （二）黄酮类化合物（二）黄酮类化合物取代基位置取代基位置的判断的判断 （三）黄酮类化合物苷的确定（三）黄酮类化合物苷的确定 a、了解苷中、了解苷中糖糖的连接的连接位置位置 b、了解、了解苷键构型苷键构型 c、了解、了解糖糖连接顺序糖糖连接顺序（一）

56、骨架类型的判断（一）骨架类型的判断 根据中央三碳链的碳信号，即先根据羰基碳根据中央三碳链的碳信号，即先根据羰基碳的的值，再结合值，再结合C2、C3的裂分和的裂分和值判断。值判断。C=OC-2（或（或C-）C-3（或（或C-）归属归属168.6169.8(s)137.8140.7(d)122.1122.3(s)异橙酮类异橙酮类 174.5184.0(s)160.5163.2(s)104.7111.8(d)黄酮类黄酮类149.8155.4(d)122.3125.9(s)异黄酮类异黄酮类147.9(s)136.0(d)黄酮醇类黄酮醇类182.5182.7(s)146.1147.7(s)111.611

57、1.9(d)(=CH-)橙酮类橙酮类 188.0197.0(s) 136.9145.4(d)116.6128.1(d)查耳酮类查耳酮类75.080.3(d)42.844.6(t)二氢黄酮类二氢黄酮类82.7(d)71.2(d)二氢黄酮醇二氢黄酮醇类类（二）黄酮类化合物取代图式的确定方法（二）黄酮类化合物取代图式的确定方法 黄酮类化合物中芳香碳原子的信号特征可以用来确定取黄酮类化合物中芳香碳原子的信号特征可以用来确定取代基的取代图式。代基的取代图式。以黄酮为例，其以黄酮为例，其13C-NMR信号如下所示：信号如下所示： flavoneflavone118.3118.3156.3156.3163.

58、2163.2131.8131.8126.3126.3131.6131.6129.0129.0OO129.0129.0126.3126.3178.4178.4107.6107.6133.7133.7125.2125.2125.7125.7 1取代基位移的影响取代基位移的影响 XZiZoZmZpOH26.6-12.81.6-7.1OCH331.4-14.41.0-7.8-OH及及-OCH3的引人将使直接相连碳原子的引人将使直接相连碳原子(-碳碳)信号大幅度信号大幅度地向低场位移，邻位碳原子地向低场位移，邻位碳原子(-碳碳)及对位碳则向高场位移。及对位碳则向高场位移。间位碳虽也向低场位移，但幅度很小

59、。间位碳虽也向低场位移，但幅度很小。 A-A-环上引入取代基时，位移效应只影响到环上引入取代基时，位移效应只影响到A A环，环，而而B-B-环上引入取代基时，位移效应只影响到环上引入取代基时，位移效应只影响到B B环。若是一个环上同时引入几个取代基时，其环。若是一个环上同时引入几个取代基时，其位移效应将具有某种程度的加和性。位移效应将具有某种程度的加和性。25，7-二羟基黄酮类中二羟基黄酮类中C-6及及C-8信号的特征信号的特征 对大多数对大多数5，7二羟基黄酮类化合物来说，二羟基黄酮类化合物来说，C-6(d)及及C-8(d)信号在信号在9001000的范围内出现，且的范围内出现，且C-6信信号总是比号总是比C-8信号出现在较低的磁场。信号出现在较低的磁场。 在二氢黄酮中两者差别较小，约差在二氢黄酮中两者差别较小，约差09个化学位移单个化学位移单位，但在黄酮及黄酮醇中差别较大，约为位，但在黄酮及黄酮醇中差别较大，约为4.8。 C-6或或C8有无烷基或者芳香基取代可通过观察有无烷基或者