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文档简介
1、第二章:序列的采集和存储第二章:序列的采集和存储DNA:Deoxyribonucleic acid,脱氧核糖核酸;,脱氧核糖核酸;RNA:RiboNucleic Acid,核糖核酸;,核糖核酸;r1. DNA测序测序r2. 序列数据的存储序列数据的存储核酸序列数据库核酸序列数据库蛋白质序列数据库蛋白质序列数据库基因组数据库基因组数据库r3. 序列数据的文件格式序列数据的文件格式rDNA一次连续测序的长度约为一次连续测序的长度约为500bp;rEST (Expressed sequence tag) 测序:细测序:细胞中胞中mRNA反转录成反转录成cDNA,方向不定测序,方向不定测序;rGSS
2、(Genome Survey Sequences,基因,基因组勘测序列组勘测序列):类似于:类似于ESTs,来源基因组,来源基因组;rHTG (High-throughput genome sequences,高通量基因组序列,高通量基因组序列):高通量、:高通量、尚未完工的尚未完工的DNA序列序列;CATddGTPddTTPddATP(D)r1. 基因图谱法:基因图谱法:DNA片段在染色体上的位片段在染色体上的位置、方向已知。首先染色体被打断成置、方向已知。首先染色体被打断成150200kbp左右的大片段,然后克隆到左右的大片段,然后克隆到BACs (Bacterial Artificial
3、 Chromosome)中,再进一步随机打断,克隆,测序,依中,再进一步随机打断,克隆,测序,依靠计算机组装成长的序列靠计算机组装成长的序列(contig) 。r2. “鸟枪法鸟枪法”(shotgun):):DNA片段在染片段在染色体上的位置和方向未知。全基因组随机色体上的位置和方向未知。全基因组随机打断成小片段,克隆,双向测序,计算机打断成小片段,克隆,双向测序,计算机组装成长的序列。组装成长的序列。r 基因组图谱:遗传图谱,物理图谱基因组图谱:遗传图谱,物理图谱r 遗传图谱遗传图谱(genetic map):连锁图谱,显示:连锁图谱,显示所知的基因和所知的基因和/或遗传标记的相对距离位置或
4、遗传标记的相对距离位置与次序。与次序。r物理图谱物理图谱(physical map):表示某些基因和表示某些基因和/或遗传标记之间在基因组上的精确位置和距或遗传标记之间在基因组上的精确位置和距离(如间隔的离(如间隔的bp数目)的图谱。数目)的图谱。r核酸序列数据库核酸序列数据库国际三大核酸序列数据库:国际三大核酸序列数据库:GenBank, EBML, DDBJRefSeq: The Reference Sequence DatabasedbEST: Expressed Sequences Tags数据库数据库UniGene等等r蛋白质序列数据库蛋白质序列数据库UniProtSwiss-pro
5、t & TrEMBL, PIRr基因组数据库基因组数据库: Ensemblr由美国国立卫生研究院由美国国立卫生研究院NIH下属国立生物技下属国立生物技术信息中心术信息中心NCBI建立。建立。r汇集并注释了所有公开的核酸以及蛋白质序汇集并注释了所有公开的核酸以及蛋白质序列。每个记录代表了一个单独的、连续的、列。每个记录代表了一个单独的、连续的、带有注释的带有注释的DNA或或RNA片段。片段。161.0版,2007r EMBL-EBI (European Bioinformatics Institute)维护维护;r http:/www.ebi.ac.uk/embl/r NIG (National
6、 Institute of Genetics)r CIB (Center for Information Biology)r http:/www.ddbj.nig.ac.jp/index-e.htmlr1998年,年,GenBank、EMBL和和DDBJ共同成共同成立了国际核酸序列数据库协会立了国际核酸序列数据库协会 (International Nucleotide Sequence Database Collaboration,INSDC)r三大核酸数据库之间每天将新测定或更新的三大核酸数据库之间每天将新测定或更新的数据进行交换共享,保证数据信息的完整与数据进行交换共享,保证数据信息的完整
7、与同步,每两个月更新一次版本。同步,每两个月更新一次版本。r/r1. 提供非冗余的,高质量的,经检验校正的提供非冗余的,高质量的,经检验校正的序列信息;序列信息;r2. 包括染色体、基因组(细胞器、病毒、质包括染色体、基因组(细胞器、病毒、质粒)、蛋白质、粒)、蛋白质、RNA等;等;r 序列文件的标识符:序列文件的标识符:mRNA序列:序列:NM_123456非编码非编码RNA:NR_123456蛋白质序列:蛋白质序列: NP_123456r /RefSeqr截然不同的截然不同的Accession号区别于
8、其它号区别于其它GenBank命名格式命名格式的序列,前缀是两个字的序列,前缀是两个字母加下划线母加下划线 _;r在在Comment区域显示来源区域显示来源;r使用正式命名使用正式命名;r包括包括dbxrefs的特征的特征;r蛋白序列在蛋白序列在DBSOURCE区域标示区域标示 REFSEQ最多的最多的20个物种:个物种:2007.08,总序列45,660,524条/dbEST/为每一个基因创造一个唯一的条目,收集这个基因所有的为每一个基因创造一个唯一的条目,收集这个基因所有的ESTs/un
9、igener最早广泛使用的蛋白数据库;欧洲最主要最早广泛使用的蛋白数据库;欧洲最主要的蛋白序列数据库;的蛋白序列数据库;http:/www.expasy.ch/sprot/rSIB(Swiss Institute of Bioinformatics)r可由可由ExPASy(Expert Protein Analysis System)系统访问;)系统访问;r所有序列条目均经过有经验的分子生物学所有序列条目均经过有经验的分子生物学家和蛋白质化学家审核,因此又称为蛋白家和蛋白质化学家审核,因此又称为蛋白质专家库。质专家库。rTrEMBL (Translation of EMBL):计算机:计算机注
10、释的注释的Swiss-Prot分支数据库,从分支数据库,从EMBL库中的库中的cDNA序列翻译得到的氨基酸序列序列翻译得到的氨基酸序列数据库。数据库。rGenPept:由:由GenBank翻译得到的蛋白质翻译得到的蛋白质序列,与序列,与TrEMBL类似,这两个数据库中类似,这两个数据库中的序列错误率较大,均有较大的冗余度。的序列错误率较大,均有较大的冗余度。r1984年,美国国家医学研究基金会(年,美国国家医学研究基金会(NREF)正式启动蛋白质信息资源(正式启动蛋白质信息资源(Protein Information Resource, PIR)计划;)计划;r美国最主要的蛋白序列数据库美国最
11、主要的蛋白序列数据库;r非冗余、高质量注释、全面分类非冗余、高质量注释、全面分类;rPIR数据库按照数据的性质和注释层次分为数据库按照数据的性质和注释层次分为PIR1、PIR2、PIR3和和PIR4。PIR1中的序列中的序列已经验证,注释最为详尽。已经验证,注释最为详尽。r/rUniversal Protein Resource: Swiss-prot(TrEMBL), PIR两大蛋白数据库两大蛋白数据库的整合体;的整合体;r收录蛋白质序列目录最广泛、功能注释最全收录蛋白质序列目录最广泛、功能注释最全面的数据库;面的数据库;r包含三个子库:包含三
12、个子库:UniProtKB(UniProt Knowledgebase)UniRef(UniProt Reference Clusters)UniParc(Uniprot Archive)rrUniProt Knowledgebase: Release 15.4 , 16-Jun-2009 ,包括:,包括:Swiss-Prot Release 57.4 : 497293 entries TrEMBL Release 40.4 : 9145906 entries r包含蛋白质序列全面的信息,提供准确、丰包含蛋白质序列全面的信息,提供准确、丰富的序列与功能
13、注释。富的序列与功能注释。r记录以记录以6位字母和数字组成,例:位字母和数字组成,例:Q5K8D3 r为人类基因组计划为人类基因组计划(HGP)保存和处理基因组保存和处理基因组图谱数据。图谱数据。rGDB的目标是构建关于人类基因组的百科的目标是构建关于人类基因组的百科全书,除了构建基因组图谱之外,还开发了全书,除了构建基因组图谱之外,还开发了描述序列水平的基因组内容的方法,包括序描述序列水平的基因组内容的方法,包括序列变异和其它对功能和表型的描述。列变异和其它对功能和表型的描述。r收集某些生物整个基因组序列的数据库收集某些生物整个基因组序列的数据库;r基因组计划基因组计划Human Genom
14、e Projecthttp:/www.sanger.ac.uk/HGP/Sequencing Genomics Projectshttp:/www.sanger.ac.uk/Projects/ r从从GenBank中选择同一物种的核酸信息组中选择同一物种的核酸信息组成的二级库成的二级库;The Ensembl project produces genome databases for vertebrates and other eukaryotic species, and makes this information freely available online.EMBL-EBI和和Sanger研究所共同开发。研究所共同开发。/ rDNA/RNA/氨基酸代码的标识氨基酸代码的标识rGenBank数据格式数据格式rEMBL & UniProt数据格式数据格式rFASTA 数据格式数据格式子库子库Locus名字名字定义定义 (标题标题)修改日期修改日期序列类型序列类型mRNA (= cDNA)rRNAsnRNADNA序列长度序列长度检索号检索号Genbank号号序列形状序列形状1I60:A|PDBID|CHAIN|SEQUENCEMKLCFNEATTLENSNLKLDLELCEKHGYDYIEIRTMDKLPEY
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