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文档简介

1、王晓杜浙江农林大学第十章 免疫学检测技术第一节第一节 抗原或抗体的检测抗原或抗体的检测抗原抗原-抗体反应受多种因素影响抗体反应受多种因素影响抗原抗体的检测方法抗原抗体的检测方法凝集反应凝集反应(Agglutination)血血 球球 凝凝 集集沉淀反应沉淀反应（Precipitation)单向免疫扩散单向免疫扩散(Single Immunodiffusion)含抗体的凝胶含抗体的凝胶沉淀环沉淀环双向免疫扩散双向免疫扩散 （Double Immunodiffusion)免疫电泳免疫电泳（Immunoelectrophoresis)火箭电泳火箭电泳（Rocket Electrophoresis)

2、补体结合反应补体结合反应（Complement Fixation, CFT)Complement Fixation, CFT)免疫标记技术免疫标记技术免疫荧光显微技术免疫荧光显微技术(Immunofluorescence Technique)间接免疫荧光法示意图间接免疫荧光法示意图免疫荧光显微技术免疫荧光显微技术流式细胞术流式细胞术（Flow Cytometry, FCM)流式细胞仪工作原理流式细胞仪工作原理酶免疫测定酶免疫测定(Enzyme Immunoassay, EIA)酶联免疫吸附试验酶联免疫吸附试验(Enzyme Linked Immunosorbent Assay, ELISA)

3、ELISA 检测抗体检测抗体放射免疫测定法放射免疫测定法(Radioimmunoassay, RIA) Ag* Ab Ag 标记抗原 特异性抗体 待测抗原( Ag*-Ab)+ (Ag-Ab) 抗原抗体复合物分离Ag*-Ab 和游离Ag*从标准曲线上读知含量测定Ag*-Ab和/或游离Ag*放射性 放射免疫测定法放射免疫测定法(RIA)示意图示意图RIA法原理及标准曲线法原理及标准曲线 7550 30 100110100 1000未标记抗原浓度（ng/ml)结合/未结合的放射活性（%）免疫印迹法免疫印迹法(Immunoblotting)二二 淋巴细胞淋巴细胞 的测定的测定 (1) 抗凝抗凝静脉血静脉血(2) 加等加等量量NS(4) 密度梯度离心密度梯度离心血浆血浆分离液分离液RBCPBMCPMN(3) 混匀后，缓混匀后，缓慢加于分离液上慢加于分离液上一）淋巴细胞类型和数目的测定一）淋巴细胞类型和数目的测定花结试验示意图花结试验示意图T细胞功能测定细胞功能测定 )培养液3H-TdRPHA淋巴细胞全血分层液离心过滤测量放射性淋巴细胞增殖试验（淋巴细胞增殖试验（3H-TdR掺入法）示意图掺入法）示意图靶细胞51Cr洗涤去除游离的51Cr效应细胞测量上清液中释放的51Cr混合培养4-6小时细胞毒试验（细胞毒试验（51Cr释放法）示意图释放法）示意图酶联免疫斑点法酶联免疫斑点法（Enzy

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