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文档简介
1、药理学实训指导让每次的实训(习)都安全快乐有收获实训中心编3医药营销专业实训(习)指导书适用课程:药理学实训(习)项目:实训一药物的一般知识实训二药物剂量对药物作用的影响实训三给药途径对药物作用的影响实训四传出神经系统药物对兔瞳孔的影响实训五局麻药作用比较实训六地西泮的抗惊厥作用实训七糖皮质激素的抗炎作用实训八抗生素、链霉素急性中毒及钙剂的解救实训(习)课时:46个课时实训(习)依据和目的:根据教材教学目的,以教、学、做相结合的要求,培养学生的动眼、动手、 动脑能力;学习并熟练掌握药理学实验的基本方法、实验的基本原理。1.2.3.1.2.3.1.2.实训一药物的一般知识、实训目的掌握基本操作,
2、锻炼动手、动脑能力;更好地掌握药理学基本理论知识;培养科学思维、基本要求实验前:预习实验内容并复习相关理论知识;实验时实验器材要妥善保管;实验操作按步骤进行,仔细观察实验中出现的现象,实事求是地做好记录; 注意节约实验药品;维持良好的课堂纪律。实验后各组同学将实验动物处死,实验台擦干净,将实验方盘送回准备室; 值日生搞好实验室卫生,将死亡动物送至指定场所;书写实验报告。二、实训报告的书写题目目的原理4.5.6.7.材料:实验动物,器材,药品方法:用自己的语言简单扼要描述出来;结果:要求真实、清楚;讨论:将实验结果进行比较、分析;实验中有哪些不足之处;结果异常或失 败的原因;8.结论:将实验结果
3、进行归纳总结,应带有提示性质。四、药理学实训设计原则1. 随机原则按照机遇均等的原则进行分组。其目的是使一切干扰因素造成的实验误差减少, 而不受实验者主观因素或其他偏性误差的影响。2. 对照原则空白对照(指在不加任何处理的条件下进行观察对照);阴性对照也称假处理对 照(给予生理盐水或不含药物的溶媒);阳性对照也称标准对照(指以已知经典 药物在标准条件下与实验药进行对照)。3. 重复原则能在类似的条件下,把实验结果重复出来,才能算是可靠的实验,重复实验除增 加可靠性外,也可以了解实验变异情况。五、实训动物1. 动物的选择(1)小白鼠:适用于需大量动物的实验,如某些药物的筛选,半数致死量的 测定。
4、也较适用于避孕药实验、抗炎镇痛药实验、中枢神经系统药实验、抗肿瘤 药及抗衰老药实验等。(2)大白鼠:比较适用于抗炎药物实验,血压测定、利胆、利尿药实验,也可 用于进行亚急性和慢性毒性实验。(3)豚鼠:因其对组胺敏感,并易于致敏,故常被选用于抗过敏药、平喘药 和抗组胺药的实验。也常用于离体心脏、心房、肠管实验。又因它对结核敏感, 常用于抗结核病药的实验。(4)家兔:常用于观察研究脑电生理作用,药物对小肠的作用。由于家兔体温 变化敏感,也常用于体温实验,用于热原检查。(5)狗:狗是记录血压,呼吸最常用的大动物。还可利用狗做成胃痿、肠痿,以观察药物对胃肠蠕动和分泌的影响。在进行慢性毒性实验时,也常采
5、用狗。2. 实验动物的编号狗、兔等较大的动物可用特制的铝质号码牌固定在颈部或耳上。大鼠、小鼠如为白色可用黄色苦味酸在不同的体表标志上标记。3. 动物固定及给药(1)小鼠捉拿小鼠性情较温顺,一般不会咬人,比较容易抓取固定。通常用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙表面上, 在小鼠向前挣扎爬行时,用左手拇指 和食指捏住其双耳及颈部皮肤,将小鼠置于左手掌心、无名指和小指夹其背部皮 肤和尾部,即可将小鼠完全固定。在一些特殊的实验中,如进行尾静脉注射时, 可使用特殊的固定装置进行固定,如尾静脉注射架或专用小鼠固定筒。如要进行 手术或心脏采血应先行麻醉再操作,如进行解剖实验则必须先行无痛处死后再进 行
6、。(2) 小鼠灌胃用左手固定鼠,右手持灌胃器,将灌胃针从鼠的口腔插入,压迫鼠的头部, 使口腔与食道成一直线,将灌胃针沿咽后壁慢慢插入食道,可感到轻微的阻力 , 此时可略改变一下灌胃针方向,以刺激引起吞咽动作,顺势将药液注入。一般灌 胃针插入小鼠深度为34cm大鼠或豚鼠为46cm常用灌胃量小鼠为0.21ml, 大鼠14ml,豚鼠15ml。(3) 小鼠腹腔注射先将动物固定,腹部用酒精棉球擦试消毒,然后在左或右侧腹部将针头刺入 皮下,沿皮下向前推进约0.5厘米,再使针头与皮肤呈45度角方向穿过腹肌刺 入腹腔,此时有落空感,回抽无肠液、尿液后,缓缓推入药液。此法大小鼠用的 较多。(4) 皮下注射注射时
7、用左手拇指及食指轻轻捏起皮肤,右手持注射器将针头刺入,固定后 即可进行注射。一般小鼠在背部或前肢腋下,大鼠在背部或侧下腹部;豚鼠在后 大腿内侧、背部等脂肪少的部位;兔在背部或耳根部注射;蛙可在脊背部淋巴囊 注射;狗多在大腿外侧注射,拔针时,轻按针孔片刻,防药液逸(5) 家兔捉拿右手握住兔颈背部皮肤轻轻提起,再以左手托起其臂部,使兔呈坐位姿势。(6) 家兔耳缘静脉注射采用外耳缘静脉,因其表浅易固定。注射部位除毛,用 75%的酒精消毒,手 指轻弹兔耳,使静脉充盈,左手食指和中指夹住静脉的近心端, 拇指绷紧静脉的 远心端,无名指及小指垫在下面,右手持注射器,尽量从静脉的远端刺入血管, 移动拇指于针头
8、上以固定,放开食、中指,将药液注入,然后拔出针头,用手压 迫针眼片刻以止血。实训二药物剂量对药物作用的影响、实训目的1. 比较同一种药物不同剂量对小白鼠作用的差异。2. 观察药物量效关系。、实训原理药理效应与剂量在一定范围内成正比,称为剂量-效应关系,药物效应的强弱呈连续增减的变化,可用具体数量或最大反应的百分率表示的称为量反应,如果药 理效应不随药物剂量或浓度呈连续性量的变化, 则变现为反应性质的变化,称为 质反应,一般药物剂量过小,药物作用不明显,剂量过大,则可能出现不良反应, 甚至毒性反应。三、实训材料1. 1.器材:注射器,烧杯,天平。2. 2.试剂:025%,0.15%,0.025%
9、戈巴比妥溶液。3. 3.动物:小白鼠。四、实训步骤取体重相近性别相同的小白鼠三只,编号甲乙丙,并分别称重,然后分别对三只小鼠腹腔注 射 025%,0.15%,0.025%戊巴比妥溶液 0.2ML/10g。五、实训结果记录 将实验结果填入下表中药物剂量对药物作用的影响鼠号体重(g)药量(ml)给药浓度现象甲21.50.43025%抽搐,四肢无力兴奋性降低,极静乙21.80.440.15%既然松弛较慢,较为安静丙22.20.450.025%肌肉松弛很慢,呼吸变慢六、注意事项1. 药物必须准确注射到腹腔,给药量要准。2. 捉拿小白鼠时应严格按操作进行,以免被咬伤。七、实训分析: 戊巴比妥抑制脑干网状
10、结构上行激活系统, 且具有高度选择性,阻碍兴奋冲动传 至大脑皮层,从而对中枢神经系统起到抑制作用,根据剂量不同可变现出镇静、 催眠、麻醉作用。对丙鼠注射低浓度戊巴比妥,表现为呼吸变慢即为药物的镇静 作用;而乙鼠注射中等浓度戊巴比妥,变现较为安静,肌肉松弛,即产生轻微催眠作用;而甲鼠注射高浓度戊巴比妥,兴奋性极度降低即为安静,可能产生麻醉 作用。八、实训结论:在意的范围内,随着药物剂量的增大,药理效应也随之加强,但超过一定范围,可引起质的变化,出现中毒,甚至死亡。实训三给药途径对药物作用的影响、实训目的1. 观察不同给药途径对药物作用的快慢和强弱的影响;2. 学习小白鼠不同途径的给药方法。、实训
11、原理采用不同的给药途径,会使药物发挥不同的作用,口服硫酸镁可导泻和利胆, 注射则产生止痉、镇静和降低颅内压。三、实训动物-小白鼠 四、实训药品及器材1. 器材:1ML注射器四副,灌胃针头一个,天枰一台, 250ML烧杯4个。2. 药物:10僦酸镁。五、实训方法1. 取体重相近的小白鼠2只,甲鼠腹腔注射10佩酸镁溶液0.6ML。2. 乙鼠口服(灌胃)10僦酸镁溶液0.6ML。3. 观察并比较两只鼠的不同现象。六、实训结果鼠 号体重药量给药途径给药前给药后(g)(ml)肌张力大小便肌张力大小便甲22.40.6腹腔注射正常正常松弛失禁乙22.60.6口服(灌胃)正常正常正常腹泻七、实训分析硫酸镁可因
12、给药途径不同而产生不同的药理作用,硫酸镁腹腔注射给药时,会抑制中枢及外周神经系统,使骨骼肌、心肌、血管平滑肌松弛,从而发挥肌松作用和降压作用;而硫酸镁灌胃时,肠道很少吸收增加肠容积而促进肠道推进性蠕动,产生泻下作用,故甲鼠出现肌张力明显减弱,处于安静状态,乙鼠则出现轻微腹泻的现象。八、实训结论给药途径不同所产生药物作用的快慢和强弱不同, 硫酸镁腹腔注射使肌松弛,灌胃则出现轻微腹泻。实训四传出神经系统药物对兔瞳孔的影响一、实训目的1 .观察拟胆碱药、 抗胆碱药对瞳孔的作用并分析其作用机制。2. 练习家兔的捉拿、滴眼及量瞳方法。其上分布有M受体, 瞳孔缩小;另一种二、实训原理虹膜内两种平滑肌控制瞳
13、孔大小,一种是瞳孔括约肌,引 起瞳孔括约肌向眼中心方向收缩,当当M受体激动后,是瞳孔开大肌,其上主要分布的是a受体,当a受体激动时,瞳孔开大 肌向眼外周方向收缩,瞳孔扩大。阿托品是M受体阻断药, 产生扩瞳作用;而毛果芸香碱是M受体激动药, 激动M受体产生缩瞳作用。三、实训动物: 家兔1只,体重2kg3kg四、实训药品、器材1漏酸阿托品溶液、1 %硝酸毛果芸香碱溶液、剪刀、测瞳器、注射器(1 m1)、 免固定箱五、实训方法步骤(1 )取健康家兔1只,标记后放入兔固定箱内, 剪去眼睫毛,在自 然光 线 下测量并记录两侧正常瞳孔直径(mm),然后按下列顺序给药(每只眼2滴): 左眼1 %硫酸阿托品;
14、 右眼1 %硝酸毛果芸香碱。 滴药 时将下眼睑拉成杯状, 并用手指按住鼻泪管, 使其在眼睑内保留Imin ,然后将手轻轻放开, 任其自 然溢出。(2)滴药1 5mi n后,在同样强度的光线下, 再分别测量并记录各 眼瞳孔大小。六、实训结果记录表动物眼药物给药前给药后剂量/3滴瞳孔直径对光反射药物瞳孔直径对光反射药物家兔:左硫酸阿托品右毛果芸香碱七、注意事项(2)滴药时应按压内眦(1 )测量瞳孔勿刺激角膜,否则会影响瞳孔大小。部的鼻泪管,以防药液进入鼻腔,经鼻粘膜吸收。(3)各眼滴药量要准确,在13眼内停留时间要一致, 一致:如光线的强度,者。以确保药液充分作用。(4)测量瞳孔条件务求给药前后
15、光源的角度等。(5)实验动物应为一周内未用过眼药实训五局麻药作用比较一、实训目的1. 比较普鲁卡因和丁卡因的表面麻醉作用强度;二、实训原理1. 局部麻醉药(局麻药)概念:是一类能可逆地阻滞神经冲动的发生和传导,在 意识清醒的条件下,使有关神经支配的部位出现暂时性感觉丧失的药物。表面麻醉:又称黏膜麻醉; 浸润麻醉; 传导麻醉; 硬膜外麻醉; 蛛网膜下腔阻滞麻醉(蛛网膜下隙麻醉、腰麻)2. 局部麻醉方法有五种:(1)(2)(3)(4)(5)3. 局麻药的作用:(1)局麻作用:通过阻断Na+通道,减少Na+内流,从而影响动作电位的产生和传导,呈 现麻醉作用;用药后痛觉、温觉、触觉、压觉依次消失,恢复
16、时顺序相反。(2)吸收作用:用量过大或意外血管内注入,可产生吸收作用,由于中枢抑制性神经元 比兴奋性神经元对局麻药更敏感之故。4. 常用局麻药:(1)普鲁卡因 Procaine :(奴佛卡因) 局部麻醉作用:本药对黏膜的穿透力弱,一般不作表面麻醉。主要用于浸 润麻醉、传导阻滞、腰麻和硬膜外麻醉。 局部封闭作用:用0.25-0.5%的普鲁卡因溶液注射于病灶周围,可减轻病灶 对中枢神经系统的劣性影响,使损伤部位的症状缓解。 敏反应:极少数人用药后可发生皮疹、哮喘,甚至休克等过敏反应; 用药前常规作皮试! 毒性反应:用量过大或意外血管内注入,可产生吸收作用,出现中毒反应!(2) 丁卡因Tetraca
17、ine (地卡因)特点: 丁卡因的穿透力及局麻作用均比普鲁卡因强,且作用持久。 主要用于表面麻醉,也可用于腰麻、传导阻滞、硬膜外麻醉。 但毒性也大,为普鲁卡因的10倍,故一般不用于浸润麻醉; 误注入血液可致猝死。实训动物家兔1只;兔台1个(一台配备);四、实训药品和器材1. 药品:1%普鲁卡因、1%丁卡因;2.实验器械:滴管2支。五、实训方法1. 取无眼疾家兔1只,由助手固定,剪去动物的 双眼睫毛;2. 角膜刺激器(兔须代替),轻触角膜之上、中、下、左、右 5点,观察并记录 正常眨眼反射;3. 用拇指和食指将左侧下眼睑拉成杯状,滴入1%r卡因溶液3滴,使其存留 1min,然后任其流溢;另于右眼
18、内,滴入1%鲁卡因溶液3滴;滴药5 - 10 min后,如前实验 眨眼反射。 记录方法:测试次数为分母,眨眼次数为分子,如测试 5次,若有二次眨眼,记录4.5.6.记录表3-1-1为2/5 ,余类推。动物眼药物给药前给药后眨眼反射比例眨眼反射5 10 15 20 25 30mi n家兔:左丁卡因右普鲁卡因六、注意事项1. 滴药时用中指压住鼻泪管,以防药液流入鼻泪管被吸收, 而发生中毒;2. 刺激角膜的兔须前、后应用同一根,刺激强度尽量一致;3. 刺激角膜时不可触及眼睑,以免影响实验效果。实训六 地西泮的抗惊厥作用一、实训目的观察安定的抗惊厥作用,联系其临床用途。二、实训原理惊厥系物理、化学或精
19、神性的刺激所引发的全身骨骼肌不自主的强烈收缩, 常见于小儿高热、破伤风、癫痫大发作、子痫和中枢兴奋药中毒等。本实验所用的致惊厥药为尼可刹米,用量较大时可导致惊厥。抗惊厥药 为安定,其用量大于镇静催眠量,故给完药后小鼠可能进入睡眠。尼可刹米(可拉明),对延脑的呼吸中枢有直接的兴奋作用。 对神经系统的 其他部位,在一般剂量时影响较小。对血管运动中枢虽无直接作用,但当 呼吸中枢解除抑制后,可间接地加强心血管的功能。尼可刹米用于药物中 毒或疾病所致的中枢性呼吸抑制,解除吗啡所致的呼吸抑制效果较好。 大剂量引起血压升高、心悸、出汗、呕吐、震颤及肌僵直,若出现以上症 状应立即停止用药,以防惊厥。小鼠惊厥的
20、表现阵挛性惊厥:出现弓背跳跃,触摸刺激后头部高频率颤动,之后四肢阵挛 而倒地。强直性惊厥:四肢伸直,身体僵硬。惊厥模型的制备:1. 物理方法:电休克法:以强电流通过角膜电极或耳电极,对动物脑部进行短时间刺激,弓I起惊厥发作。听觉刺激。光刺激。2. 化学方法:应用大剂量的化学药物使动物中枢神经系统过度兴奋, 常用的药物有硝酸士的宁,戊四唑,印防己毒素和氨基脲等。常用的抗惊厥药:1. 苯二氮卓类:如地西泮,为镇静催眠药,随剂量增大,相继出现抗焦虑、镇静催眠和抗惊厥作用。2. 巴比妥类:如苯巴比妥、异戊巴比妥、硫贲妥属镇静催眠药,随剂量增 大,相继出现镇静、催眠、抗惊厥和麻醉作用。3. 硫酸镁,i.
21、v.具有抗惊厥作用,Mg2+可拮抗Ca2+勺作用,抑制神经递质 传递和骨骼肌收缩,从而使肌肉松弛,临床常用于妊娠子痫。三、实训材料器材:架盘天平、注射器、5#针头、玻璃钟罩。 药品:2.5%尼可刹米溶液、0.5%安定溶液、生理盐水。 动物:小白鼠。四、实训方法取小白鼠2只,称体重,编号,置于玻璃钟罩中观察小鼠正常活动。分别腹 腔注射2.5%尼可刹米溶液0.2ml/10g,然后一只接着腹腔注射 0.5%安定溶液 0.05ml/10g,另一只注射等容量生理盐水,观察比较两鼠反应情况。五、实训结果将结果记录于下表中。鼠号体重(g)剂量(ml)给药结果12.5%尼可刹米溶液+0.5%安定溶液22.5%
22、尼可刹米溶液+生理盐 水六、注意事项1、剂量要准确,时间掌握好。2、给药后应保持室内安静,避免刺激实验动物。3、急救用安定必须预先吸好备用,待惊厥发生时立即腹腔注射。4、腹腔注射在小白鼠下腹部,切勿进针过深损伤内脏,否则内脏出血小白 鼠而死,影响实验进行。腹腔注射的操作左手固定小鼠,头低腹高位,右手 45°在左或右侧下腹部进针,针尖刺 入腹腔时有落空感,然后略抽回针头 2mm贴着腹腔壁轻轻推液。注射结 束后,不宜太快抽回针头,否则漏液过多,对于小剂量的注射影响较大。实训七糖皮质激素的抗炎作用、实训目的观察蛋清的致炎作用和糖皮质激素的抗炎作用。、实训材料大鼠、大鼠后足容积测量器、注射器
23、、新鲜蛋清、氢化可的松(或地塞米松) 溶液、生理盐水等。、实训原理异体蛋白进入机体后,可在短时间内引起组织的急性炎症反应, 炎症部位明 显肿胀,体积增大。本实验用蛋清为异种蛋白质,注入大鼠足跖内,可致局部急 性炎症反应,使局部组织肿胀。通过测定炎症部位的体积,观察炎症的发生及氢化可的松的抗炎作用。糖皮质激素是由肾上腺皮质分泌的类固醇激素,以氢化可的松、可的松、地塞米松为代表,主要影响糖、脂肪和蛋白质的代谢,并能对抗炎症反应。四、实训方法1、取大鼠2只,标记,称重,分别ip下列药物,1号鼠:生理盐水1ml/kg , 2号鼠:氢化可的松(或地塞米松)溶液 15mg/kg (0.5%溶液3ml/kg)。2、 取带有侧管的大鼠后足容积测量器(如图),将注射器与侧管相连,盛入 水,使液面与20ml处平齐。3、将1号、2号两鼠右踝关节以下的突起点处用圆珠笔划一圈作标志,依 次将各鼠右后足放入容积测量器内,使右后肢暴露在筒外,浸入的深度以划圈处 与20ml刻度重合为度。该足进入液体以后,液面升高,液体自侧管溢出,流入注射器中,记录溢出液体的 ml数。4、在各鼠ip药物15分钟后,从右后足掌心向掌跖关节方向皮下注射新鲜 蛋清0.1ml。5、在注射蛋清后20 min、40 min、60 min、80 min,分别测量右后足的体
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