机能实验学自主设计之花青素与高尿酸血症

1、目录CONTENTS01020304研究背景与设计思想研究目的和主要研究内容技术路线、研究方案和预期结果创新性和可行性PART 1研究背景与设计思想ADD YOUR TITLE HERE1研究背景1.1.研究背景研究背景3456 NYC, Street Avenue 近年来，随着营养条件改善，人们在饮食方面更加要求多元化，但与此同时也出现了很多营养过剩的现象。过多的摄入某些食物对机体可能造成很大的伤害。研究表明，在日常饮食中摄入过多的高嘌呤食物，将导致体内尿酸含量升高，从而引发高尿酸血症。即高尿酸血症的致病原因之一为高嘌呤饮食。1.1.研究背景研究背景3456 NYC, Street Aven

2、ue 21rianda_调查显示，此病的发病率日趋升高，但是很多人在体检中发现尿酸异常升高（高尿酸血症），因为没有任何自觉症状而未加重视。除此之外很多医生也未对高尿酸血症引起足够重视。因为实践表明，只有约10%的高尿酸血症者会发展为“痛风”。高尿酸血症(HUA)定义为血尿酸水平男性大于6.5或7.0mgdl，女性大于6.0或6.5mgdl。它是以体内嘌呤代谢紊乱、尿酸增高为特征的疾病。HuA可诱发痛风、尿石症等疾病，并且血尿酸升高与肥胖、高血压、高血糖和血脂紊乱等代谢综合征的组成成分关系密切。1.1.研究背景研究背景3456 NYC, Street Avenue 21rianda_体内尿酸形成

3、来源于嘌呤代谢，次黄嘌呤在黄嘌呤氧化酶的催化条件下转化为黄嘌呤，再使黄嘌呤转化为尿酸与氧自由基等。临床上常用别嘌呤醇治疗高尿酸血症，别嘌呤醇可被体内黄嘌呤氧化酶催化成为别黄嘌呤，别黄嘌呤与别嘌呤醇对黄嘌呤氧化酶有抑制作用。由于黄嘌呤氧化酶对别黄嘌呤的亲和力比对黄嘌呤和次黄嘌呤大，因而使黄嘌呤和次黄嘌呤不能利用该酶转化为尿酸。使血中尿酸含量降低。缺点：但它在治疗高尿酸血症的初期可诱发急性痛风，增加急性痛风的发作频率与严重程度，具有一定的副作用。次黄嘌呤次黄嘌呤黄嘌呤黄嘌呤尿酸尿酸+ + 氧自由基氧自由基别嘌呤醇别嘌呤醇别黄嘌呤别黄嘌呤黄嘌呤氧化酶黄嘌呤氧化酶黄嘌呤氧化酶黄嘌呤氧化酶黄嘌呤氧化酶黄

4、嘌呤氧化酶1.1.研究背景研究背景3456 NYC, Street Avenue 21rianda_花青素是自然界一类广泛存在于植物中的水溶性天然色素，属类黄酮化合物。现代药理学研究表明，花青素具有抗氧化、抗肿瘤、防治心脑血管疾病、降血糖、抗炎、促进视力等多种药理作用，受到国内外医药和食品界的广泛重视。1.1.研究背景研究背景3456 NYC, Street Avenue 21rianda_张晓晖等在2004年发表的名为原花青素对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用观察了从莲房、藕节中提取的莲房原花青素（LSPC）对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。给予动物LSPC并且再灌注后，冠脉流量和心率恢复

5、明显，XOD（黄嘌呤氧化酶）活性受到抑制，猜测LSPC有可能通过抑制XOD的活性，阻断氧自由基的来源而起到保护心肌的作用。 在一篇2013年徐春阳等发表的花青素的生理活性研究进展中，我们发现花青素确实具有抑制黄嘌呤氧化酶的作用。因此，基于上述资料查找获得的信息，我们提出了探究花青素对治疗小鼠高尿酸血症的影响的研究。ADD YOUR TITLE HERE2设计思想2.2.设计思想设计思想3456 NYC, Street Avenue 21rianda_本实验为探究型实验，旨在探究花青素对小鼠血清中尿酸含量的影响。本实验的基本思想就是对照和控制变量。准备四组小鼠，一组为对照组，其余三组分别为阴性对

6、照组，阳性对照组和实验组。除此之外，为了防止偶然误差出现，遵循重复原则，每一组都应准备多只小鼠，进行平行实验。PART 2研究目的和主要研究内容研究目的和主要研究内容研究目的1.1.研究目的研究目的3456 NYC, Street Avenue 21rianda_ilham1）探究花青素对治疗高尿酸血症的作用；2）比较其与别嘌呤醇的作用效果；3）为临床治疗高尿酸血症开发新的药物。ADD YOUR TITLE HERE主要研究内容2 .2 . 主 要 研 究 内 容主 要 研 究 内 容3456 NYC, Street Avenue 21rianda_1）花青素对治疗小鼠高尿酸血症的作用；2）花

7、青素与别嘌呤醇治疗高尿酸血症效果比较。PART 3主要路线、研究方案和预期结果主要路线，研究方案，预期结果主要路线，研究方案，预期结果主要路线研究方案预期结果。1.1.主要路线主要路线rianda_D组：空白对照组（组：空白对照组（10只健康小鼠，普通饲料饲养）只健康小鼠，普通饲料饲养）注：注：1）实验用动物为清洁级）实验用动物为清洁级18 至至22 雄性雄性ICR小鼠小鼠80只，生命状态也基本只，生命状态也基本相同。相同。2）ABC三组的普通饲料三组的普通饲料的量是一样的，用于保的量是一样的，用于保证小鼠的正常生命活动证小鼠的正常生命活动实实验中的饲料用的是全价验中的饲料用的是全价营养颗粒饲

8、料。随饲料营养颗粒饲料。随饲料一起给予的还有充分的一起给予的还有充分的水，因为小鼠的水代谢水，因为小鼠的水代谢相当快，并且饮水是经相当快，并且饮水是经过灭菌的过灭菌的A D D Y O U R T I T L E H E E主要路线研究方案预期结果。主要路线，研究方案，预期结果主要路线，研究方案，预期结果2.2.研究方案研究方案3456 NYC, Street Avenue 21rianda_1）提取蓝莓果中的花青素：乙醇浸提法：蓝莓果 粉碎 乙醇浸提 过滤 回收乙醇花青素粗提液 HP20树脂吸附 40乙醇洗脱 回收乙醇 冻干 称重 注明：乙醇浸提法提取花青素的最佳条件为：pH 3.0，浸提温

9、度40C，浸提时间2h，浸提乙醇体积分数70%，提取次数2次，料液比1:10，在此条件下提取率为4.49mg/g。2.2.研究方案研究方案3456 NYC, Street Avenue 2）小鼠高尿酸血症模型的建立： 以 羧甲基纤维素钠水溶液分别配制50mg/mL次黄嘌呤混悬液40mg/mL氧嗪酸钾混悬液。采用次黄嘌呤混悬液10mL/kg 灌胃同时皮下注射氧嗪酸钾混悬液10mL/kg 的方法建立次黄嘌呤和氧嗪酸钾诱导的小鼠高尿酸血症模型。2.2.研究方案研究方案3456 NYC, Street Avenue 21rianda_3）预实验：将40只高尿酸模型的小鼠随机分成4组，每组10只小鼠。

10、测量小鼠血清中的尿酸含量并纪律。分别用同量的普通饲料喂养，随饲料给予充分的水。四组编号为a、b、c、d，分别用50mg/kg、100mg/kg、150mg/kg、200mg/kg的花青素提取液灌胃。再测量灌胃60分钟后小鼠血清中的尿酸含量。由此确定出花青素是否具有降血清中尿酸的浓度以及降血尿酸的最好效果的最适宜浓度。2.2.研究方案研究方案3456 NYC, Street Avenue 21rianda_4）将高尿酸血症的小鼠随机分成A、B、C三组，每组10只小鼠，实验前测定每组小鼠的血尿酸含量。D组小鼠10只，为正常的小鼠，测定其血清中的尿酸含量。将四组测量结果记录下来。按照上述技术路线进行

11、实验。四组小鼠用相同种类和相同重量的饲料喂养，A组灌入纯净水，B组灌入80mg/kg别嘌呤醇，C组灌入预实验中测得的最适浓度的花青素提取液。在经过（时间）以后测量血清中的尿酸含量。将4组的数据记录下来，与实验前的数据进行对比，得出结论。主要路线研究方案预期结果主要路线，研究方案，预期结果主要路线，研究方案，预期结果3.3.预期结果预期结果3456 NYC, Street Avenue 21rianda_ A组：前后两次测量的血尿酸含量基本一致，高尿酸的症状没有缓解； B组：前后两次测量的血尿酸含量差异较大，第二次测量的值低于第一次的值，高尿酸血症得到缓解； C组：前后两次测量的血尿酸含量差异较

12、大，并且前后的差值大于B组，高尿酸血症得到缓解； D组：前后两次测量的血尿酸含量基本一致，小鼠的的血尿酸的含量低于其余三组。PART 4创新性与可行性ADD YOUR TITLE HERE创新性单击编辑标题单击此处可编辑内容，根据您的需要自由拉伸文本框大小1.1.创新性创新性3456 NYC, Street Avenue 21rianda_ 已知花青素是一类广泛存在于植物中的水溶性天然色素，属黄酮类化合物。 黄嘌呤氧化酶是体内核酸代谢中重要的酶，广泛分布于人体心、肺、肝等组织细胞血浆内。 XOD能催化黄嘌呤和次黄嘌呤的氧化生成尿酸，并产生过氧化物自由基，尿酸过高会导致高尿酸血症。文献表明在心肌

13、缺血再灌注的过程中，莲房华花青素具有治疗的效果，因此推断花青素可能具有抑制黄嘌呤氧化酶活性的作用，我们用迁移的思维，将花青素可能拥有的这种作用用于治疗高尿酸血症。ADD YOUR TITLE HERE可行性单击编辑标题单击此处可编辑内容，根据您的需要自由拉伸文本框大小2.2.可行性可行性3456 NYC, Street Avenue 21rianda_1）小鼠高尿酸血症模型的建立已有文献可以查找到；2）花青素的提取方式已有文献可以查找到；3）花青素可以直接用灌胃的方式注入小鼠体内；4）小鼠血清中的尿酸含量可以直接抽血化验测得。参考文献参考文献1、单海丽，单瑞平，傅旭春 穿山龙醇提取物对高尿酸血

14、症小鼠的治疗作用 2015（1）2、刘强 蓝莓果中花青素的提取 2013（5）3、施善芬，黎良达，单爱琴，何永平，周美央，潘翠萍 药用炭治疗高尿酸血症合并慢性肾功能不全患者的临床研究 2013（8） 4、王曙光，李成建 别嘌呤醇不良反应 2004（6） 5、徐春明，庞高阳，李婷 花青素的生理活性研究进展 2013（3） 6、刘学铭，廖森泰，肖更生，陈卫东 花青素的吸收与代谢研究进展 2007（6）7.张晓晖1，张 斌2，龚培力1，曾繁典1 莲房原花青素对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用 2004（6）8.王红珊1，曹毅敏1，杨 晋1，吴 琳1，李国豪1，臧林泉2 葡萄籽原花青素对大鼠心肌缺血再灌注损伤