(病原生物与免疫学实验)免疫学探索性实验

1、( (病原生物与免疫学实验病原生物与免疫学实验) )免疫学探免疫学探索性实验索性实验Learning to learn, learning by doingI hear and I forgetI read (see) and I rememberI do and I understand?荀子儒效?:不闻不假设闻之，闻之不假设见之，见之不假设知之，知之不假设行之。学至于行之而止矣。观察、学习、思考、行动观察、学习、思考、行动科学研究的目的科学研究的目的兴趣兴趣什么是科学研究什么是科学研究怎样做科学研究怎样做科学研究文献文献实验实验 科学研究的目的1、宇宙由什么构成?2、意识的生物学根底是什么

2、?3、人类的基因为什么如此之少?4、遗传变异与人类健康在多大程度上彼此相关?5、物理定律能否统一?6、人类寿命可以延长多久?7、是什么控制着器官再生?8、皮肤细胞如何变成神经细胞?9、单一体细胞怎样成为完整植株?10、地球内部如何运行?11、我们在宇宙中是孤独的吗?12、地球生命是在哪里、如何诞生的?13、什么决定了物种的多样性?14、何种基因改变造就了独特的人类?15、记忆如何存储和提取?16、合作行为如何开展?17、怎样从海量生物学数据中获得大的图形模式?18、我们能在化学自组织方面走多远?19、常规计算的极限在哪里?20、我们能否有选择地切断某些免疫反响? 21、量子不确定性和非局部性背

3、后是否有更深刻的原理?22、能否研制出有效的HIV疫苗?23、温室效应会使地球变得多热?24、什么时间用什么能源可以替代石油?25、马尔萨斯会一直错下去吗?2021年十大科技突破年十大科技突破癌症免疫疗法癌症免疫疗法群众基因显微手术群众基因显微手术脑成像技术脑成像技术人体胚胎克隆人体胚胎克隆迷你器官迷你器官宇宙射线的来源宇宙射线的来源太阳能新星太阳能新星为什么睡觉为什么睡觉微生物与健康微生物与健康疫苗设计疫苗设计人造探测器首次登陆彗星被选为本年度最重要的科学突破。人造探测器首次登陆彗星被选为本年度最重要的科学突破。从恐龙到鸟的转变从恐龙到鸟的转变年轻血液有年轻血液有“返老还童成效：血液中一种叫

4、返老还童成效：血液中一种叫GDF11的蛋白的蛋白机器人机器人“自主合作自主合作仿人脑芯片仿人脑芯片可治糖尿病的细胞：实验室中培养出酷似可治糖尿病的细胞：实验室中培养出酷似细胞的细胞。细胞的细胞。印尼洞穴艺术印尼洞穴艺术操纵记忆：研究人员利用光遗传学技术操纵小鼠的特定记忆，如操纵记忆：研究人员利用光遗传学技术操纵小鼠的特定记忆，如删除记忆或植入虚假记忆。删除记忆或植入虚假记忆。立方体卫星：这种长宽高均为立方体卫星：这种长宽高均为10厘米的廉价微型卫星在厘米的廉价微型卫星在2021年年真正获得成功真正获得成功生命基因密码生命基因密码“添丁：自然界的添丁：自然界的DNA脱氧核糖核酸只有脱氧核糖核酸只

5、有种碱基：种碱基：G、T、C和和A，但科学家设计制造的一种大肠杆菌的，但科学家设计制造的一种大肠杆菌的DNA添两个成员：添两个成员：X和和Y。2021年十大科技突破年十大科技突破癌症免疫疗法癌症免疫疗法今年6月，研究人员报告，结合使用伊匹单抗即抗CTLA-4和抗PD-1令1/3的黑色素瘤患者出现“深层和快速的肿瘤消退。2021年，美国食品和药品管理局批准了百时美施贵宝针对转移性黑素瘤的伊匹单抗治疗。2021年，霍普金斯大学的Suzanne Topalian、耶鲁大学的Mario Sznol和同事报告了在近300名患者中使用抗PD-1疗法的结果，其中31%黑色素瘤患者、29%肾癌患者和17%肺癌

6、患者的肿瘤萎缩了一半或更多。2021年，据百时美施贵宝报告称，在1800名使用伊匹单抗治疗的黑色素瘤患者中，22%的人在3年后仍存活。 什么是科学研究？科学研究的根本任务就是探索、认识未知。我国国家教育部定义是：科学研究是指为了增进知识包括关于人类文化和社会的知识以及利用这些知识去创造新的技术而进行的系统的创造性工作。美国资源委员会对科学研究的定义是：科学研究工作是科学领域中的检索和应用，包括对已有知识的整理、统计以及对数据的搜集、编辑和分析研究工作。The observation, identification, description, experimental investigation

7、, and theoretical explanation of phenomena. 科学研究程序及实施科学研究程序及实施一科研课题设计一科研课题设计二二)科研课题实施科研课题实施(三实验记录和原始实验数据三实验记录和原始实验数据保存保存四资料分析与论文撰写四资料分析与论文撰写科研课题设计科研课题设计 1. 1.文献调研文献调研 * * 收集和学习国内外相关进展收集和学习国内外相关进展 * * 注意：创新点及条件、方法注意：创新点及条件、方法 2. 2. 确定研究目标确定研究目标 * * 根据拟解决的关键问题，选择和准备根据拟解决的关键问题，选择和准备实验对象、仪器、材料等实验对象、仪器、材

8、料等 * * 注意：创新性、现有条件、可行性、注意：创新性、现有条件、可行性、伦理学伦理学 3. 3. 制定科研方案制定科研方案 * * 实验方案处理因素、观察指标、实实验方案处理因素、观察指标、实验对象、实验条件等；验对象、实验条件等； 记录工程和格式；人员分工记录工程和格式；人员分工 * * 注意：合理、具体、明确、可操作、注意：合理、具体、明确、可操作、符合统计学原那么符合统计学原那么 4. 4. 预实验预实验 * * 校正仪器，摸索实验方法，优化实验校正仪器，摸索实验方法，优化实验条件条件 * * 注意：保持仪器良好状态，尽可能确注意：保持仪器良好状态，尽可能确定最正确实验条件定最正确

9、实验条件 5. 5. 正式实验正式实验 完善观察和记录格式，严格按标准进完善观察和记录格式，严格按标准进行行科研课题实施科研课题实施 1. 1. 课题实施原那么课题实施原那么 * * 设计实验方案及技术路线设计实验方案及技术路线 * * 确定可靠稳定的实验操作方法确定可靠稳定的实验操作方法 * * 精确准备实验材料精确准备实验材料 * * 实验分组实验分组( (设立对照设立对照) )，排除非实验因素干扰，排除非实验因素干扰 2. 2. 确定实验条件确定实验条件 * * 制订实验操作流程制订实验操作流程 * * 标准操作技巧标准操作技巧 * * 落实实验材料来源落实实验材料来源 * * 控制主观

10、误差控制主观误差 实验记录和原始实验数据保存实验记录和原始实验数据保存 1. 1. 实验记录的内容实验记录的内容 实验名称、实验目的、实验方案实验名称、实验目的、实验方案框架式实验方案及实验操作方案、框架式实验方案及实验操作方案、实验过程、实验结果及分析、实验记录实验过程、实验结果及分析、实验记录的标准和保存的标准和保存 2. 2.实验小结实验小结 实验数据整理和分析、资料解释实验数据整理和分析、资料解释与科研结论与科研结论 资料分析与论文撰写资料分析与论文撰写1. 1. 资料统计与整理资料统计与整理 2. 2. 实验结果判定实验结果判定 3. 3. 科研结论科研结论 4. 4. 论文撰写论文

11、撰写 5. 5. 论文投送论文投送 选题的根本过程选题的方法国家科研工程指南国家科研工程指南临床实践临床实践理论研究和学术争论理论研究和学术争论 文献启发文献启发 科学领域空白点科学领域空白点 原有课题延伸、深入原有课题延伸、深入 交叉学科的科学问题交叉学科的科学问题 发现和提出问题发现和提出问题 任何科学研究都是从发现和提出问任何科学研究都是从发现和提出问题开始的。题开始的。“问题是科研活动的起点。问题是科研活动的起点。提出问题选择并确立研究题目，就是科提出问题选择并确立研究题目，就是科学研究的第一步，也是科研成败的关键。学研究的第一步，也是科研成败的关键。只有题目选得好，才有可能出成果。正

12、只有题目选得好，才有可能出成果。正确的提出问题等于解决了问题的一半。确的提出问题等于解决了问题的一半。因此，科研选题必须具有明确的目的性，因此，科研选题必须具有明确的目的性，充分的科学性和先进性以及现实的可行充分的科学性和先进性以及现实的可行性。性。 么需要创造性的想象力，而且标志着科学的真正进步。只有对自然现象能做敏锐观察的人，才可能有伟大的发现。只有对自然现象能做敏锐观察的人，才可能有伟大的发现。在观察的领域中，机遇只偏爱那种有准备的头脑巴斯德。在观察的领域中，机遇只偏爱那种有准备的头脑巴斯德。法国生物学家、化学家、微生物学的奠基人巴斯德法国生物学家、化学家、微生物学的奠基人巴斯德Loui

13、sPasteur,1822-1895在实验室里在实验室里有心人有心人-初始意念初始意念( (局限的、粗浅的局限的、粗浅的-“-“火花。火花。 “ “火花的出现是跳跃的、瞬间的，但思想上的积火花的出现是跳跃的、瞬间的，但思想上的积累和孕育过程是长期的。从偶然性机遇中发现必然性规律累和孕育过程是长期的。从偶然性机遇中发现必然性规律-机遇理性法。偶然性是必然性的反映和表现，必然机遇理性法。偶然性是必然性的反映和表现，必然性是偶然性的最终结果。性是偶然性的最终结果。 初始意念初始意念 要善于在观察中发现问题弗莱明，要善于在观察中发现问题弗莱明，19281928年，年，penicillinpenicil

14、lin 要在疑心中提出问题哥白尼，要在疑心中提出问题哥白尼，15291529年，日心说年，日心说 要在灵感中提出假想阿基米德要在灵感中提出假想阿基米德, ,公元前公元前240240年，浮年，浮力力 要在梦想中提出创意要在梦想中提出创意( (达达. .芬奇，芬奇，18861886年年, ,汽车汽车 要在实践工作中提出思路柯马克，要在实践工作中提出思路柯马克，19571957年，年，CTCT1928年，英国科学家弗莱明和他年，英国科学家弗莱明和他当年发现青霉素的培养皿。当年发现青霉素的培养皿。1945年获诺贝尔奖年获诺贝尔奖要善于在观察中发现问题要善于在观察中发现问题弗莱明，弗莱明，1928年，年

15、，penicillin 19531953年，沃森和克里克发现了年，沃森和克里克发现了DNADNA分子分子双螺旋结构。双螺旋结构。19621962年获诺贝尔奖年获诺贝尔奖 1900 1900年年奥地利生理学家兰德斯坦纳等发现了人类的奥地利生理学家兰德斯坦纳等发现了人类的 ABO ABO 血型系统血型系统 19281928年年英国微生物学家弗莱明发现青霉素英国微生物学家弗莱明发现青霉素 19361936年年前苏联首次成功进行肾移植前苏联首次成功进行肾移植 19531953年年美国生物学家沃森和英国物理学家克里克首次确美国生物学家沃森和英国物理学家克里克首次确定人类定人类DNADNA双螺旋立体结构双

16、螺旋立体结构 19531953年年塞尔得格应用自制的器械成功地进行了动脉血管塞尔得格应用自制的器械成功地进行了动脉血管造影；造影；19561956年年DedmanDedman等又成功地完成了选择性腹等又成功地完成了选择性腹 腔动脉和肠系膜上动脉造影腔动脉和肠系膜上动脉造影 1978 1978年年7 7月月2525日，世界上第一名日，世界上第一名“试管婴儿试管婴儿路路易易布朗在英国诞生布朗在英国诞生 20 20世纪世纪7070年代柯马克和纽博尔德洪兹菲尔德创造了电年代柯马克和纽博尔德洪兹菲尔德创造了电子计算机子计算机X X线断层显像技术线断层显像技术CTCT， 80 80年代又出现了磁共年代又出

17、现了磁共振显像技术振显像技术MRIMRI 1987 1987年法国医生莫瑞特首先利用膀胱镜完成了世界上年法国医生莫瑞特首先利用膀胱镜完成了世界上第一例内镜下胆囊手术第一例内镜下胆囊手术 1996 1996年年7 7月英国爱丁堡卢斯林研究所培育出人类历史上月英国爱丁堡卢斯林研究所培育出人类历史上第一个克隆绵羊第一个克隆绵羊“多利多利 1999 1999年年1212月月1 1日，英、美、日、加、法、中等国共同完日，英、美、日、加、法、中等国共同完成人类基因组工作草图的绘制成人类基因组工作草图的绘制 第一个试管婴儿第一个试管婴儿路丝路丝布朗布朗19781978年年7 7月月2525日于英国诞生日于英

18、国诞生 19971997年英国罗斯林研究所年英国罗斯林研究所维尔穆特宣布第一只克隆维尔穆特宣布第一只克隆羊羊多莉诞生多莉诞生 只有对自然现象能做敏锐观察的人，才可能有伟大的发现。在观察的领域中，机遇只偏爱那种有准备的头脑巴斯德。 发现或提出问题的条件是： 1勤动手 2善观察 3勤动脑 4具有丰富的知识每项实验必须合理组织三项实验要素：每项实验必须合理组织三项实验要素：1.试验对象试验对象2.处理因素处理因素3.试验效应试验效应哪种动物的生理或病理特性与研究目标和要求哪种动物的生理或病理特性与研究目标和要求最为吻合最为吻合针对人类某种特性的研究，要根据哪种动物的针对人类某种特性的研究，要根据哪种

19、动物的特征与人类这种特性最为吻合特征与人类这种特性最为吻合制作病理模型，哪种动物最容易成功制作病理模型，哪种动物最容易成功改变遗传性状的研究要根据动物生殖周期的长改变遗传性状的研究要根据动物生殖周期的长短短动物繁育和饲养的方便程度及价格因素动物繁育和饲养的方便程度及价格因素实验动物的选择单一因素单一水平主要用于人单一因素单一水平主要用于人组组 别别 目目 的的处理组处理组 施加处理因素，观察处理引起施加处理因素，观察处理引起 的变化的变化对照组对照组 不加处理，其它条件一致，以不加处理，其它条件一致，以 排除条件因素引起的变化排除条件因素引起的变化两种因素单一水平两种因素单一水平 处理因素处理

20、因素A A：诱导脑缺血；：诱导脑缺血；处理因素处理因素B B：低温：低温3232处理。处理。两种因素模型、药物和药物的五种水平两种因素模型、药物和药物的五种水平 组组 别别 目目 的的 处理组处理组0、5、10、 观察不同药物剂量对脑缺血观察不同药物剂量对脑缺血的影响的影响20、50 mg/kg 对照组对照组0、5、10、 观察药物对假手术动物的作用，观察药物对假手术动物的作用，排除药物排除药物20、50 mg/kg 本身对动物生理功能的影响本身对动物生理功能的影响只有少量的对照组的情况，各种对照应当都在实只有少量的对照组的情况，各种对照应当都在实验中采用；验中采用；如对照组数量多，可以精简其

21、中一些组别，但如对照组数量多，可以精简其中一些组别，但是应当有充足的理由。是应当有充足的理由。如前期研究、预实验或文献中已经证明某些组如前期研究、预实验或文献中已经证明某些组别无特殊效应，可以考虑精简。别无特殊效应，可以考虑精简。对各种理论上应当设置的对照，必须加以考虑，对各种理论上应当设置的对照，必须加以考虑，不能无故忽略！不能无故忽略！主要实验组别与相应的对照组，应当在同主要实验组别与相应的对照组，应当在同一时间和同一批次实验中交叉、平行进一时间和同一批次实验中交叉、平行进行。行。不同组别的实验，如将其中一个实验组在不同组别的实验，如将其中一个实验组在同一时间和同一批次进行，其他组别在同一

22、时间和同一批次进行，其他组别在另外的时间和批次进行，会产生较大实另外的时间和批次进行，会产生较大实验误差，应当严加防止。验误差，应当严加防止。举例：举例：研究目的：说明研究目的：说明A分子在肺癌中的作用及有关分子在肺癌中的作用及有关机制机制处理因素：不同肺癌模型与哪种类型肺癌有处理因素：不同肺癌模型与哪种类型肺癌有关关 不同病变时间变化的时间过程不同病变时间变化的时间过程试验对象：不同动物发生在哪类对象试验对象：不同动物发生在哪类对象试验效应：不同检测手段试验效应：不同检测手段mRNA、蛋白等、蛋白等 不同分子检测对不同分子检测对A分子有无特异分子有无特异性性 不同功能检测与哪类功能相关不同功

23、能检测与哪类功能相关 举例：举例：研究目的：说明研究目的：说明A药体外抗肿瘤的作用及有药体外抗肿瘤的作用及有关机制关机制处理因素处理因素1：不同肿瘤系保护哪类肿瘤：不同肿瘤系保护哪类肿瘤处理因素处理因素2：不同药物是否为该药特定作：不同药物是否为该药特定作用用浓度效应定量，浓度依赖浓度效应定量，浓度依赖特征特征时间时间依赖特征时间时间依赖特征试验对象：试验对象：肿瘤细胞肿瘤细胞试验效应：试验效应：不同指标对不同功能的影不同指标对不同功能的影响响对照对照 控制试验条件控制试验条件随机随机 分组的客观化分组的客观化 减少抽样误差减少抽样误差重复重复 样本数及重复次数样本数及重复次数 提高可靠性提高

24、可靠性盲法盲法 降低人为主观因素的干扰降低人为主观因素的干扰一、对照一、对照1、根底条件的对照、根底条件的对照正常对照或阴性对照，正常对照或阴性对照，操作条件对照如假手术操作条件对照如假手术2、经典处理的对照、经典处理的对照阳性对照阳性对照二、随机二、随机1、单纯随机法随机数字表、单纯随机法随机数字表2、均衡随机分层随机、均衡随机分层随机将调查总体按照一定标准性别、年将调查总体按照一定标准性别、年龄等进行分层龄等进行分层,然后在每一层中用简然后在每一层中用简单随机抽样方式抽取样本进行调查。单随机抽样方式抽取样本进行调查。3、均衡顺序随机、均衡顺序随机三、重复三、重复同一试验的重复次数样本量；同

25、一同一试验的重复次数样本量；同一时间地点的屡次重复时间地点的屡次重复1如处理组与对照组的反响差异较大，如处理组与对照组的反响差异较大，可使所需的样本量减少；反之，假设两可使所需的样本量减少；反之，假设两者差异不大，单靠增加样本量是不现实者差异不大，单靠增加样本量是不现实的，还应从专业角度考虑这种微小的差的，还应从专业角度考虑这种微小的差异是否有现实意义。异是否有现实意义。2试验手段、仪器设备越精密，所需样本试验手段、仪器设备越精密，所需样本量可减少。在试验中设计中应尽量注意仪器量可减少。在试验中设计中应尽量注意仪器的校正、操作的标准化、指标的统一等，以的校正、操作的标准化、指标的统一等，以提高

26、试验质量。提高试验质量。两次测量值有无自然差异等。两次测量值有无自然差异等。四、盲法四、盲法单盲法单盲法 研究对象不知道自己所在的分组和所接受的研究对象不知道自己所在的分组和所接受的处理，但观察者和资料收集分析者知道处理，但观察者和资料收集分析者知道 ；双盲法双盲法 研究对象和观察者都不知道分组情况，也不研究对象和观察者都不知道分组情况，也不知道研究对象接受的处理措施；知道研究对象接受的处理措施；1.1.三盲法和多盲法三盲法和多盲法 研究对象、观察者和资料整理分析研究对象、观察者和资料整理分析者均不知道研究对象分组和处理情况，只有研究者委者均不知道研究对象分组和处理情况，只有研究者委托的人员或

27、药物的制造者知道，直到试验结束时才公托的人员或药物的制造者知道，直到试验结束时才公布分组和处理情况。布分组和处理情况。 1、环境条件的控制、环境条件的控制2、生理条件的控制、生理条件的控制3、试验条件的控制、试验条件的控制4、操作人员因素的控制、操作人员因素的控制5、条件的前后一致、条件的前后一致6、控制试验误差、控制试验误差三研究条件控制三研究条件控制1、环境条件的控制、环境条件的控制需要保持环境有适宜的气温和湿度、安静、相需要保持环境有适宜的气温和湿度、安静、相似的季节和昼夜时刻、无其他不良刺激等。似的季节和昼夜时刻、无其他不良刺激等。对动物试验应当作更加严格的条件控制。对动物试验应当作更

28、加严格的条件控制。由于有些试验动物生理过程的昼夜节律与人不由于有些试验动物生理过程的昼夜节律与人不同，如啮齿类动物大鼠、小鼠等是夜行同，如啮齿类动物大鼠、小鼠等是夜行性动物，其活动期在夜晚，静息期在白天，性动物，其活动期在夜晚，静息期在白天，因此，用这些动物试验时，要选择适当和相因此，用这些动物试验时，要选择适当和相同的昼夜时刻，并注意给动物保持光照和黑同的昼夜时刻，并注意给动物保持光照和黑暗的时间。暗的时间。2、生理条件的控制、生理条件的控制受试对象的种族、性别、年龄、营养状况、遗传特征、各种受试对象的种族、性别、年龄、营养状况、遗传特征、各种生理功能状况等。生理功能状况等。在动物试验中，诸

29、如血糖、血在动物试验中，诸如血糖、血O2分压、血分压、血CO2分压、血及其分压、血及其他体液的他体液的pH、体温等生理因素。、体温等生理因素。试验动物还应注意有无有关病原体病毒、细菌、寄生虫等试验动物还应注意有无有关病原体病毒、细菌、寄生虫等感染。感染。对动物实施麻醉，应当注意麻醉深度以及麻醉造成的生理功对动物实施麻醉，应当注意麻醉深度以及麻醉造成的生理功能改变，如体温降低、血压下降、心率加快等。能改变，如体温降低、血压下降、心率加快等。3、试验条件的控制、试验条件的控制受试对象受试对象仪器设备仪器设备试剂材料试剂材料试验实施条件试验实施条件操作规程操作规程SOP等等1受试者或动物受试者或动物

30、应当按要求选择和随机应当按要求选择和随机分组，保证各组的根本条件根本一致，保持分组，保证各组的根本条件根本一致，保持可比性。可比性。2仪器设备仪器设备仪器设备的精确性、稳定性、仪器设备的精确性、稳定性、可靠性都应符合试验要求，并且定期或试验可靠性都应符合试验要求，并且定期或试验前加以校正；还要标准操作方法，以保证定前加以校正；还要标准操作方法，以保证定量的准确。量的准确。3试剂材料试剂材料各种药物、试剂、细胞株、其他材料等，各种药物、试剂、细胞株、其他材料等，应当符合试验要求，都要贴标签注明名称、应当符合试验要求，都要贴标签注明名称、含量、来源、批号、日期、试验人员姓名等，含量、来源、批号、日

31、期、试验人员姓名等，防止发生过失；必要时对其稳定性、含量、防止发生过失；必要时对其稳定性、含量、活性进行检测，保证试验的可靠性。活性进行检测，保证试验的可靠性。4试验条件试验条件应当事先确定各组条件，并应当事先确定各组条件，并严格按同一标准执行。严格按同一标准执行。5操作规程操作规程设计时应当制订切实可行，设计时应当制订切实可行，并 且 能 保 证 试 验 质 量 的 标 准 操 作 规 程并 且 能 保 证 试 验 质 量 的 标 准 操 作 规 程SOP，并在实施规程中严格掌握。，并在实施规程中严格掌握。4、操作人员因素的控制、操作人员因素的控制各种试验都是由研究人员来操作的，每个人各种试

32、验都是由研究人员来操作的，每个人员对各种条件和标准的掌握有不同程度的员对各种条件和标准的掌握有不同程度的差异，这就会影响结果的准确性和一致性，差异，这就会影响结果的准确性和一致性，造成较大的误差，因此，要对人员操作因造成较大的误差，因此，要对人员操作因素加以控制。素加以控制。除了事先要统一执行标准的具体做法外，为除了事先要统一执行标准的具体做法外，为了防止主观因素的干扰，采用盲法是一个了防止主观因素的干扰，采用盲法是一个有效的方法。有效的方法。临床研究可采用双盲法，即受试者和研究者包临床研究可采用双盲法，即受试者和研究者包括数据分析人员都不知道试验分组情况，因此括数据分析人员都不知道试验分组情

33、况，因此受试者的反响和研究者的评判都较为客观。受试者的反响和研究者的评判都较为客观。根底研究中，对一些容易受主观因素影响的定性根底研究中，对一些容易受主观因素影响的定性或半定量指标，如动物行为学观察、病理切片观或半定量指标，如动物行为学观察、病理切片观察等，应当实行单盲法，即负责观察的人员不知察等，应当实行单盲法，即负责观察的人员不知道处理方法和试验分组，而按照规定的标准进行道处理方法和试验分组，而按照规定的标准进行观察，这样可以在很大程度上防止主观因素造成观察，这样可以在很大程度上防止主观因素造成的偏差，使试验结果较为客观可信。的偏差，使试验结果较为客观可信。5、条件的前后一致、条件的前后一

34、致研究的各种条件，如受试对象的根本特点、动研究的各种条件，如受试对象的根本特点、动物及其品系、采用的仪器设备、各种试剂和物及其品系、采用的仪器设备、各种试剂和材料、试验环境温度、湿度、光照、噪声材料、试验环境温度、湿度、光照、噪声等、试验方法、操作过程、采用的观察指等、试验方法、操作过程、采用的观察指标等，应当在设计时确定，研究全过程都要标等，应当在设计时确定，研究全过程都要按照统一标准进行，中途改变条件会使试验按照统一标准进行，中途改变条件会使试验结果前后难以比较，导致返工等问题。结果前后难以比较，导致返工等问题。6、控制试验误差、控制试验误差随机误差不可防止随机误差不可防止系统误差注意纠正

35、系统误差注意纠正人为误差应当克服人为误差应当克服1、标准化、标准化事先规定格式和内容事先规定格式和内容培养严谨的习惯培养严谨的习惯加强管理加强管理2、记录内容及要求、记录内容及要求1在记录本或记录表中，记录试验日期、在记录本或记录表中，记录试验日期、试验场所当天的室温及湿度必要时、记试验场所当天的室温及湿度必要时、记录者签名、审核者签名必要时。录者签名、审核者签名必要时。2按照实验方案逐日对每一试验对象进行按照实验方案逐日对每一试验对象进行观察和记录，注意对象的编号与记录一致。观察和记录，注意对象的编号与记录一致。3临床试验中发现受试者出现不良事件，临床试验中发现受试者出现不良事件，应及时记录

36、，并作妥善的处理；动物试验中，应及时记录，并作妥善的处理；动物试验中，发现濒死或者已死动物，要作记录和适当处发现濒死或者已死动物，要作记录和适当处理，必要时作病理学检查。理，必要时作病理学检查。4记录实验标本的收集和编号。记录实验标本的收集和编号。5在研究过程中出现异常现象的，应做在研究过程中出现异常现象的，应做详细记录。详细记录。6所用记录的数据应当做到直接、及时、所用记录的数据应当做到直接、及时、清晰和不易消除，并应当注明记录日期，由清晰和不易消除，并应当注明记录日期，由记录者签名，专题负责人复核后签名。记录者签名，专题负责人复核后签名。7记录的数据需要修改的，应当注明修记录的数据需要修改

37、的，应当注明修改的理由以及修改日期，并由修改者签名；改的理由以及修改日期，并由修改者签名；修改数据不得损毁原记录。修改数据不得损毁原记录。免疫学探索性实验课题设计免疫学探索性实验课题设计1. 1. 中药香菇多糖能明显增强机体免疫功能，试设计课题中药香菇多糖能明显增强机体免疫功能，试设计课题阐述香菇多糖对免疫系统的作用机制。阐述香菇多糖对免疫系统的作用机制。2. 2. 临床患者感染临床患者感染H7N9H7N9病毒两周左右，如何确定其体内是病毒两周左右，如何确定其体内是否建立有效的免疫应答？否建立有效的免疫应答？3. 3. 临床患胰岛素依赖型糖尿病的病人，如何明确具体发临床患胰岛素依赖型糖尿病的病

38、人，如何明确具体发病机制？病机制？ *免疫器官免疫器官中枢免疫器官中枢免疫器官外周免疫器官外周免疫器官*免疫细胞免疫细胞*免疫分子免疫分子免疫系统免疫系统immune systemimmune system的组成的组成免疫的核心内容免疫的核心内容“自我自我self“非我非我(nonself)免疫应答免疫应答immune response免疫耐受免疫耐受 immune tolerance)TheprincipalmechanismsofinnateandadaptiveimmunityInnate immune response Physiological barriers skin mucou

39、s membranes Phagocytosis polymorphonuclear leukocytes (PMN) monocytes/macrophages Natural killer (NK) cell Complement and acute phase proteinsLinks between innate and adaptive immunity 2005 Elsevier Typesofadaptiveimmunity.The clonal selection hypothesisAdaptive immune responseIntroductionBCR (mIg)T

40、CRThetwo-signalrequirementforlymphocyteactivation.Signal 1 is provided by antigen recognition.Signal 2 is provided by components of the microbes or substances produced during the innate immune response.Downloaded from: StudentConsult (on 31 May 2006 05:26 PM) 2005 Elsevier LMolecular interactions ac

41、ross the T cell APC junctionTcellsMHCIImolecularT cell-mediated immune responseImmunologicalSynapseA. TCRAg-MHCB. CD28B7C. LFA-1ICAM-1D. LFA-2LFA-3 Anergy(concept)A. Only 1st signal, no 2nd signalB. No 1st signal, only 2nd signalTheroleofcostimulationinTcellactivationSignaltransductionpathwaysinTcel

42、lactivationPIP2Target genes:CKs and CKRsCAMsMHC LAT,SLP-76MAPKthe subsets of T cellsDifferentiation of Th cellsDifferentiation of Th cellsTh1Th2ActivationofmacrophagesbyTlymphocytesT cell-mediated immune responseTypeofadaptiveimmunity(4) Activation induced T cell death1) AICD (Activation induced cell death) Activated T cells express FasL that induce apoptosis of Fas positive T cells.2) Passive cell apoptosis Ag, survival signals and growth factors Key pointKey point