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文档简介
1、 通过各种方法使酶分子的结构发生某些改变,从而改变酶的某些特性和功能的技术过程称为酶分子修饰。 通过酶分子修饰,可以使酶分子结构发生某些改变,就有可能提高酶的活力,增强酶的稳定性,降低或消除酶的抗原性等。 通过酶分子修饰,研究和了解酶分子中主链、侧链、组成单位、金属离子和各种物理因素对酶分子空间构象的影响,可以进一步探讨其结构与功能之问的关系。nThrough various physical method makes Through various physical method makes enzyme molecule structure occur some changes, enzy
2、me molecule structure occur some changes, thus changing some characteristics of the thus changing some characteristics of the function of the enzyme in the technology function of the enzyme in the technology process called enzyme molecule cess called enzyme molecule modified.酶分子修饰第1页/共14
3、页酶分子修饰主要包括第2页/共14页Take the metal ions of enzyme Take the metal ions of enzyme molecule into another kind of metal molecule into another kind of metal ions, making characteristics and ions, making characteristics and function of enzyme modified change function of enzyme modified change called metal i
4、ons replacement called metal ions replacement modified.modified. Some enzyme molecule contain metal Some enzyme molecule contain metal ions, and is often part of the enzyme ions, and is often part of the enzyme activity center , having an important activity center , having an important role function
5、s on enzyme catalysis.role functions on enzyme catalysis.把酶分子中的金属离子换成另一种金属离子,把酶分子中的金属离子换成另一种金属离子, 使酶的特性和功能发生改变的修饰方法称为使酶的特性和功能发生改变的修饰方法称为金属离子置换修饰金属离子置换修饰有些酶分子中含有有些酶分子中含有金属离子金属离子,而且往往是酶,而且往往是酶活性中心的组成部分,对酶催化功能的发挥活性中心的组成部分,对酶催化功能的发挥有重要作用。有重要作用。Metal ion replacement modified 金属离子置换修饰第3页/共14页-淀粉酶淀粉酶中的钙离子(
6、中的钙离子(Ca2+)谷氨酸脱氢酶谷氨酸脱氢酶中的锌离子(中的锌离子(Zn2+) 过氧化氢酶过氧化氢酶分子中的铁离子(分子中的铁离子(Fe2+)酰基氨基酸酶酰基氨基酸酶分子中的锌离子(分子中的锌离子(Zn2+)超氧化物歧化酶超氧化物歧化酶分子中的铜、锌离子(分子中的铜、锌离子(Cu2+ , Zn2+)等)等若从酶分子中除去其所含的金属离子,酶往往若从酶分子中除去其所含的金属离子,酶往往会丧失其催化活性会丧失其催化活性若用另一种金属离子进行置换,则可使酶呈现若用另一种金属离子进行置换,则可使酶呈现出不同的特性出不同的特性第4页/共14页 第5页/共14页金属离子置换修饰的方法 金属离子置换修饰只
7、适用于那些在分子结构中本来含有金属离子的酶。 金属离子置换修饰的过程主要包括如下步骤: 第6页/共14页酶的分离纯化 首先将欲进行修饰的酶经过分离纯化,除去杂质,获得具有,一定纯度的酶液 Separation and purification of enzyme : first of all, going after the separation and purification of the enzymes remove impurities, get an enzyme liquid, certain purity. 第7页/共14页除去原有的金属离子 在经过纯化的酶液中加入一定量的金属螯
8、合剂,如乙二胺四乙酸( EDTA )等,使酶分子中的金属离子与EDTA 等形成螯合物 Remove the original metal ions: after the purified enzyme add a certain amount of metal liquid chelating agent, such as ethylenediamine tetraacetate (EDTA) etc, make the enzyme molecules of the metal ions and EDTA formed chelates. 第8页/共14页加入置换离子 于去离子的酶液中加入一定量的另一种金属离子,酶蛋白与新加入的金属离子结合,除去多余的置换离子,就可以得到经过金属离子置换后的酶 Join replacement ion: to ion enzymes fluid added with a certain volume of another kind of metal ions, combining enzyme protein and new members metal ions, removing redundant replacement with ion
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