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1、 实验原理实验原理实验原理实验原理 (continued) 实验材料实验材料 涂片涂片干燥干燥 固定固定染色染色水洗水洗干燥干燥镜检镜检操作步骤操作步骤 操作步骤操作步骤(continued) 革兰氏染色(革兰氏染色(Gram stain) 1984年,丹麦医生年,丹麦医生Gram采用革兰氏染色法细采用革兰氏染色法细菌细胞壁区分为两种类型:革兰氏阴性(菌细胞壁区分为两种类型:革兰氏阴性(G+)和革兰氏阳性(和革兰氏阳性(G-)革兰氏染色步骤革兰氏染色步骤: 1)结晶紫初染;)结晶紫初染;2)碘液媒染;)碘液媒染; 3)酒精脱色;)酒精脱色; 4)番红复染)番红复染 G G菌:细胞壁厚,肽聚糖网
2、菌:细胞壁厚,肽聚糖网状分子形成一种透性屏障,当状分子形成一种透性屏障,当乙醇脱色时,肽聚糖脱水而孔乙醇脱色时,肽聚糖脱水而孔障缩小,故保留结晶紫障缩小,故保留结晶紫- -碘复碘复合物在细胞膜上。呈紫色。合物在细胞膜上。呈紫色。G菌:肽聚糖层薄,交联松菌:肽聚糖层薄,交联松散,乙醇脱色不能使其结构收散,乙醇脱色不能使其结构收缩,其脂含量高缩,其脂含量高, ,乙醇将脂溶乙醇将脂溶解,缝隙加大,结晶紫解,缝隙加大,结晶紫- -碘复碘复合物溶出细胞壁,番红复染后合物溶出细胞壁,番红复染后呈红色。呈红色。本实验安排本实验安排细菌三形永久片观察细菌三形永久片观察简单染色:枯草芽孢(简单染色:枯草芽孢(1d1d)。)。革兰氏染色:大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、革兰氏染色:大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、斜面菌株。斜面菌株。芽孢染色:枯草芽孢(芽孢染色:枯草芽孢(2d2d)另外,每大组派两人从斜面挑取枯草芽孢另外,每大组派两人从斜面挑取枯草芽孢(2d2d)于离心管,水浴锅中煮沸。)于离心管,水浴锅中煮沸。思考题思考题80页思考题第页思考题
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