08化妆品的微生物学检查ppt课件

1、第八章化装品的微生物学检查1化装品的卫生规范化装品微生物学检查根底知识化装品中微生物总数检查化装品中控制菌检查2一、2007版“化装品卫生规范粘膜用、婴儿及儿童用化装品眼部及口唇等细菌菌落总数不得大于500CFU/mL 或500CFU/g。其他化装品细菌菌落总数不得大于1000CFU/mL 或1000CFU/g3一切化装品霉菌和酵母菌总数不得大于100CFUmL 或100CFUg每克或每毫升产品中不得检出粪大肠菌群、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌。4二、检查的必备知识1.采样采样应具有代表性。从两个包装单位以上的样品中共取10g 或10mL作为检验量。样品应严厉坚持原有的包装形状。容器不应有破裂

2、，在检验前不得翻开，防止样品被污染。接到样品后，应立刻登记，编写检验序号，并按检验要求尽快检验。及时检验的样品应放在室温阴凉枯燥处，不要冷藏或冷冻。5二、检查的必备知识1.采样假设样品需同时做多种分析，如细菌、毒理、化学等，那么宜先取出部分样品做细菌检验，再将剩余样品做其它分析。在检验过程中，从翻开包装到全部检验操作终了，均须防止微生物的再污染和分散，所用器皿及资料均应事先灭菌，全部操作应在无菌室内进展，或在相应条件下，按无菌操作规定进展。6二、检查的必备知识1.采样如检出粪大肠菌群或其它致病菌，自报揭显露之日起该菌种及被检样品应保管一个月。7二、检查的必备知识2.供检样品供试品的制备水溶性液

3、体样品样品10mL90mL生理盐水1:10供试液8二、检查的必备知识2.供检样品供试品的制备油性液体样品5mL灭菌液体石蜡1:10供试液均质器10mL灭菌吐温80404410mL样品混匀10min75mL 4044灭菌生理盐水4044乳化9二、检查的必备知识2.供检样品供试品的制备亲水性半固体膏、霜、乳剂样品振荡90mL生理盐水上清液作为1:10供试液10g样品15min膏、霜剂假设用均质器，混合均质12min即可。10二、检查的必备知识2.供检样品供试品的制备疏水性半固体样品10mL灭菌液体石蜡1:10供试液均质器10mL灭菌吐温80404410g样品混匀10min70mL 4044灭菌生理

4、盐水4044乳化膏、霜剂假设用均质器，混合均质35min即可。11二、检查的必备知识2.供检样品供试品的制备固体样品振荡90mL生理盐水上清液作为1:10供试液10g样品15min12三、细菌、真菌总数检查1.意义测定总数主要是作为断定化装品被细菌、霉菌及酵母菌污染程度的标志，也可以察看化装品中细菌、霉菌及酵母菌的性质和在化装品中的繁衍动态，以便对样品进展卫生学评价时提供科学根据。13三、细菌、真菌总数检查2.培育基、培育温度和时间检查菌培养基名称培养温度培养时间细菌卵磷脂、吐温80-营养肉汤琼脂36148h2h真菌虎红琼脂28272h2h14三、细菌、真菌总数检查3.方法平皿法数据处置混合平

5、板的制备细菌、真菌的培育检查结果、察看与计数供试液的制备书写检验记录单15 细菌、霉菌和酵母菌计数的操作过程10-110-210-210-110-110-210-2 10-1对照对照对照对照1.0ml倒置培育48h1h361卵磷脂、吐温80-营养肉汤琼脂282虎红琼脂倒置培育72h2h9.0ml 稀释液10g/ml供试品 9.0ml10-210-11.0ml16三、细菌、真菌总数检查4.操作本卷须知1.尽量使菌细胞分散开，使每个菌细胞生成一个菌落，否那么将会导致艰苦的技术误差。 2.为防止细菌增殖及产生菌苔，制成供试液后，应尽快稀释，注皿。普通稀释后应在1小时内操作终了。 17三、细菌、真菌总

6、数检查4.操作本卷须知3.运用吸量管时，应小心沿管壁参与，不用触及管内溶液，以防吸管尖端外侧黏附的溶液混入其中。 4.留意抑菌景象。由于防腐剂未被中和，往往使平板计数结果受影响，如低稀释时菌落少。而高释释度时菌落数反而增大。遇此情况应反复检验，以确定是防腐剂影响还是操作技术误差。 18三、细菌、真菌总数检查4.操作本卷须知5.为检查和控制灭菌效果，应做空白对照，以检验所运用的物品能否彻底灭菌及检验过程能否无菌操作。 6.为便于区别化装品中的颗粒与菌落，可在每100mL 卵磷脂吐温80 营养琼脂中参与1mL0.5的TTC 溶液，如有细菌存在，培育后菌落呈红色，而化装品的颗粒颜色无变化。19三、细

7、菌、真菌总数检查5.菌落计数及报告方法 宜选取细菌、酵母菌平均菌落数30300之间、霉菌平均菌落数550之间的稀释级，作为菌数报告取两位有效数字的根据。 1当只需一个稀释度的平均菌落数符合此范围时，即以该平皿菌落数乘其稀释倍数; 2假设有两个稀释度，其平均菌落数均在30 个300 个之间，那么应求出两菌落总数之比值来决议，假设其比值小于或等于2，应报告其平均数，假设大于 2 那么报告其中稀释度较低的平皿的菌落数20三、细菌、真菌总数检查5.菌落计数及报告方法 3假设一切稀释度的平均菌落数均大于300 个，那么应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之; 4假设一切稀释度的平均菌落数均小于30

8、 个，那么应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之; 5假设一切稀释度的平均菌落数均不在30 300 个之间，其中一个稀释度大于300 个，而相邻的另一稀释度小于30 个时，那么以接近30 或300 的平均菌落数乘以稀释倍数报告之； 6假设一切的稀释度均无菌生长，报告数为每g 或每mL 小于10CFU;21例次不同稀释度平均菌落数两稀释度菌数之比菌落总数(CFU/mL或CFU/g)报告方式(CFU/mL 或CFU/g)10-110-210-31136516420-1640016000或1.6*10422760295461.63800038000或3.8*10432890271602.227

9、10027100或2.7*1044不可计4650513-513000513000或5.1*105527115-270270或2.7*1026不可计30512-3050031000或3.1*1047000-1*1022四、控制菌检查检查工程1阴性对照实验：应无菌生长。2阳性对照实验：供试品+阳性对照菌，应检出相应的阳性对照菌。 3供试品控制菌检查：依相应的检查方法进展。 23四、控制菌检查检查流程供试品增菌培育分别培育纯培育染色镜检生化反响实验报告结果24四、控制菌检查检查流程1.增菌培育目的使被检药物中的被检菌增殖，防止出现漏检。25四、控制菌检查检查流程2.分别培育目的经增殖培育后,被检菌大

10、量繁衍，同时其他一些杂菌也出现增殖。因此分别培育能使目的菌从混合菌中分别出来。26四、控制菌检查检查流程3.纯培育目的只是大量增殖被检菌，用于后面的进一步检验。27四、控制菌检查检查流程4.染色镜检目的初步鉴定，察看细菌的形状大小。28四、控制菌检查检查流程5.生化实验目的最终的鉴定根据，结合染色镜检得出实验结果，填写检验报告。29四、控制菌检查粪大肠菌群检查粪大肠菌群 粪大肠菌群系一群需氧及兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌，在44.50.5培育24h48h 能发酵乳糖产酸并产气。30四、控制菌检查粪大肠菌群检查粪大肠菌群检查意义 粪大肠菌群主要存在于温血动物粪便中，随粪便排出体外后可直接污染化装

11、品，假设产品中检出该菌群，阐明该产品遭到粪便污染，能够存在肠道致病菌并引起疾病，是评价化装品卫生质量的重要目的之一。31四、控制菌检查粪大肠菌群检查产酸：黄色产气：气泡产酸产气书写检验记录单不产酸不产气增菌培育供试液的制备配培育基和稀释液检查结果判别44 0.52428h分别培育蛋白胨水培育最终结果判别44 0.5242h靛基质特征菌落361 1824h双倍胆盐乳糖MEMB琼脂液面玫瑰红色紫黑色粪大肠菌群检查流程图32双倍乳糖胆盐培育基EMB琼脂培育基靛基质实验气泡，培育基呈黄色紫黑色金属光泽玫瑰红色液面33四、控制菌检查粪大肠菌群检查粪大肠菌群检查结果报告 根据发酵乳糖产酸产气，平板上有典型

12、菌落，并经证明为革兰氏阴性短杆菌，靛基质实验阳性，那么可报告被检样品中检出粪大肠菌群。34四、控制菌检查铜绿假单胞菌检查铜绿假单胞菌 铜绿假单胞菌属于假单胞菌属，为革兰氏阴性杆菌，氧化酶阳性，能产生绿脓菌素。此外还能液化明胶，复原硝酸盐为亚硝酸盐，在421条件下能生长。35四、控制菌检查铜绿假单胞菌检查铜绿假单胞菌检查意义 铜绿假单胞菌在特殊情况下可引起皮肤化脓感染、泌尿道感染、中耳炎等。外伤及烧伤患者感染后最易引起化脓，并引起败血症。为保证消费者平安，化装品中不得检出铜绿假单胞菌。36四、控制菌检查铜绿假单胞菌检查最终结果判别增菌培育供试液的制备书写检验记录单分别纯化无菌落或无特征菌落配培育

13、基和稀释液革兰染色、镜检 氧化酶实验 绿脓菌素实验生化实验 硝酸盐复原实验 42生长实验 明胶液化实验铜绿假单胞菌检查流程图SCDLP培育基十六烷三甲基溴化铵琼脂3611824h3611824h特征菌落灰白色、扁平、周围有水溶性蓝绿色素37十六烷三甲基溴化铵平板SCDLP培育基黄绿色菌膜灰白色潮湿氧化酶实验粉红/紫红色38绿脓菌素实验盐酸层呈粉紫色氯仿层呈蓝绿色硝酸盐复原产气实验N2明胶液化实验明胶培育基高层明胶液化39四、控制菌检查铜绿假单胞菌检查铜绿假单胞菌检查结果报告 被检样品经增菌分别培育后，经证明为革兰氏阴性杆菌，氧化酶及绿脓菌素实验皆为阳性者，即可报告被检样品中检出铜绿假单胞菌；如

14、绿脓菌素实验阴性而液化明胶、硝酸盐复原产气和42生长实验三者皆为阳性时，仍可报告被检样品中检出铜绿假单胞菌。40四、控制菌检查金黄色葡萄球菌检查金黄色葡萄球菌 金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性球菌，呈葡萄状陈列，无芽胞，无荚膜，能分解甘露醇，血浆凝固酶阳性。41四、控制菌检查金黄色葡萄球菌检查金黄色葡萄球菌检查意义 金黄色葡萄球菌在外界分布较广，抵抗力也较强，能引起人体部分化脏性病灶，严重时可导致败血症，因此化装品中检验金黄色葡萄球菌有重要意义。42四、控制菌检查金黄色葡萄球菌检查革兰染色、镜检 生化实验:血浆凝固酶实验 甘露醇发酵实验最终结果判别增菌培育供试品的处置书写检验记录单分别纯化无菌落或无特征菌落配培育基和稀释液361361SCDLP培育