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文档简介
1、实验八 水中菌落总数的测定及常见微生物察看 .目的要求实验原理实验资料实验步骤菌落计数作 业.一、目的要求掌握水样中细菌菌落总数的测定方法;了解检测水样朱总细菌总数方法的原理及其运用中的优缺陷了解水质与细菌菌落数之间的相关性以及水质评价的微生物学卫生规范,明白其运用的重要性;进一步稳定微生物倒平板、稀释涂布平板分别法和无菌操作等技术和方法.二、实验原理 菌落总数是指食品检样经过处置,在一定条件下培育后所得1g或1ml检样中所含细菌菌落的总数。细菌种类很多,有各自的生理特性,必需用适宜它们生长的培育基才干将它们培育出来。然而,在实践任务中不易做到,所以通常用一种适宜大多数细菌生长的培育基培育腐生
2、性细菌,以它的菌落总数阐明有机物污染程度。水中细菌总数与水体受有机污染的程度成下相关,因此细菌总数常作为评价水体污染程度的一个重要目的。细菌总数越大,阐明水体被污染得越严重。.三、实验试剂与器材 污水样品2种样品 牛肉膏蛋白胨培育基; 无菌试管、无菌三角瓶、无菌玻璃涂棒、无菌吸管、接种环、无菌培育皿等; 酒精灯、超净任务台、培育箱等。.四、实验步骤1 采集水样:曾经预备好2种污水水样。2 细菌总数的测定:1水样稀释:按无菌操作法,将水样作10倍系列稀释。2选取10-1、10-2、10-3三个延续稀释度。稀释度的选择 是本实验准确度的关键,选择适宜者,平皿上菌落总数 介于30和300之间。3汲取
3、由高倍至低倍的稀释液,每个稀释液分别注入两 个培育皿,每皿1mL。.4注入彻底融化,然后冷却到45的营养琼脂培育基,立刻旋摇培育皿,充分混匀。方法是握住平皿,先往一个方向画圆,再朝相反方向回转;或一面画圆,一面适当倾斜。小心勿使这个混合液体溅到培育皿的边缘。让平皿基于程度位置放置至固化。5接种水样的培育皿,倒置于37培育箱中培育48 h。.五、菌落计数1 平板菌落数的选择1进展平皿菌落计数时,记下同一浓度的3个平板或2个的菌落总数,计算平均值,再乘以稀释倍数即为1ml水样中的细菌总数。2计数时应选择菌落数在30300/皿之间的稀释倍数进展计数,假设同个稀释度中一个平皿有较大片状菌落生长时,那么
4、不宜采用,而应以无片状菌落生长的平皿计数该稀释度的平均菌落数。假设片状菌落少于平皿的一半时,而另半中菌落分布又均匀,那么可将其菌落数的2倍作为全皿的数目。在记下各平皿菌落数后,应算出同一稀释度的平均菌数,供下步计算时用。.2 稀释度的选择l首先选择平均菌落数在30300者进展计算,当只需一个稀释度的平均菌落数符合此范围时,即可用它作为平均值乘其稀释倍数。2假设有两个稀释度的平均菌落数都在30300之间,那么应按两者的比值来决议。假设其比值小于2,应报告两者的平均数;假设大于2那么报告其中较小的菌落数。3假设一切稀释度的平均菌落数均大于300,那么应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。.4假设一切稀释度的平均菌落数均小于30,那么应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之5假设全部稀释度的平均菌落数均不在30300之间,那么以最接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。6菌落计数的报告,菌落在100以内时按实有数报告;大于100时,采用二位有效数字;在二位有效数字后面的数值,以四舍五入方法计算。为了缩短数字后面的零数,也可用10的指数来表示,在所需报告的菌落数多至无法计算时,应注明水样的稀释倍
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