3、1菊花的组织培养(给力的)ppt课件

1、课题一 菊花的组织培育 安岳中学： 蒋小丽有丝分裂受精卵细胞分化 在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形状、构造和生理功能上发生稳定性差别的过程。1、细胞分化的概念一、知识回想 黑色素细胞在体外培育30多代后仍能合成黑色素；离体培育的上皮细胞，一直坚持为上皮细胞，而不会变成其他类型的细胞。 2、稳定性3、不可逆性细胞分化发生在整个生命进程中。1、耐久性2、细胞分化的特点 造血干细胞 原红细胞 早幼红细胞 中幼红细胞 晚幼红细胞 成熟红细胞 死亡4、普遍性 细胞分化能否意味着细胞中遗传物质的改动？ 遗传物质没有改动，不同组织的细胞共同来源于受精卵，经有丝分裂产生。3、细胞分化的本质A

2、BDCEEDCABEDCABEDCABEDCAB基因在个体发育过程中，不同细胞中遗传信息的执行情况不同即基因的选择性表达的过程 红细胞合成血红蛋白 (不合成肌动蛋白)肌细胞肌动蛋白基因开启合成肌动蛋白 (不合成血红蛋白)肌动蛋白基因封锁血红蛋白基因封锁血红蛋白基因开启试一试:如今他能解释这些景象了吗?4、细胞分化的结果 细胞产生了不同种类的蛋白质即出现了不同的构造和功能的细胞和组织。愈伤组织胚状体1958，美国，斯图尔德 植物组织培育离体二、根底知识一植物组织培育概念关键词： 外植体、脱分化、再分化、愈伤组织 在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培育在人工配置的培育基上，给予

3、适宜的培育条件，诱导其脱分化产生愈伤组织再分化构成丛芽，最终构成完好的植株。又称：植物离体培育脱分化或去分化：由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程。再分化：脱分化产生的愈伤组织继续进展培育，又可以重新分化成根或芽等器官的过程。外植体：用于离体培育的植物器官或组织片段。愈伤组织：细胞陈列疏松、无规那么、高度液泡化的无定形的薄壁细胞。切取构成层无菌接种诱导愈伤组织的构成试管苗的构成培育室移栽脱分化再分化二植物组织培育的根本过程植物组织培育过程离体组织或细胞植物体脱分化细胞分裂素生长素愈伤组织芽根细胞分裂素生长素细胞分裂素生长素细胞分裂素生长素细胞分裂素有利于根的分化有利于芽的分化，抑制根的

4、分化促进愈伤组织生长激素的运用顺序、运用量及比例影响植物细胞的发育方向：思索：以下培育基出现的景象反响了什么问题？生长素/细胞分裂素高 利于根的构成适中 利于愈伤组织的构成供参考的配方1、诱导菊花愈伤组织：在MS培育基中参与BA和NAA，质量浓度均为0.5mg、诱导菊花从芽：在MS培育基中参与BA和NAA，质量浓度分别为2-3mg和0.020.03mg3、诱导菊花生根：在MS培育基各成分用量减半，并添参与NAA或IAA，质量浓度均为0.1mg4温度、光照、pH的影响光照：菊花每日用日光灯照射12h。温度：大多数植物组织培育控制在2327 , 低于15时植物组织会表现生长停顿, 高于35时对植物

5、生长不利。 菊花的组织培育控制在1822。pH： 不同植物对培育基最适pH的要求不 同，大多数控制在56.5。 菊花的组织培育控制在5.8左右。制备MS固体培育基外植体消毒 接种 培 养栽 培四、实验操作 移 栽冲洗酒精无菌水冲洗氯化汞无菌水冲洗至少三次之上配制各种母液配制培育基灭菌一制备MS固体培育基MS培育基包括20多种营养成分，实验室普通运用4保管配制好的培育基母液来制备1、配制各种母液无机物中大量元素浓缩10倍，微量元素浓缩100倍，常温保管激素类、维生素类以及用量较小的有机物普通可按1mg/ml的质量浓度单独配制成母液用母液配制培育基时，需求根据各种母液的浓缩倍数，计算用量2、配制培

6、育基分装到锥形瓶中，每瓶分装50ml或100ml 配制培育液 调PH 培育基的分装 由于菊花的茎段的组织培育比较容易，因此不用添加植物激素3、灭菌分装好的培育基连同其他器械一同进展高压蒸汽灭菌1、选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝二外植体消毒2、消毒流水冲洗菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉，用软刷悄然刷洗，刷洗后在流水下冲洗20min左右 酒精处置用无菌吸水纸吸干外植体外表的水分，放入体积分数为70的酒精中摇动23次，继续67s，立刻将外植体取出，在无菌水中清洗 消毒液处置取出后用无菌吸水纸吸干外植体外表的水分，放入质量分数为0.1的氯化汞溶液中12min，取出后在无菌水中至少清洗3次，漂净消毒

7、液三接种污染的主要来源是空气中的细菌和孢子，接种室消毒是至关重要的。用70的酒精喷雾使空气消毒， 酒精或新洁尔灭搽洗任务台并用紫外线照射20分钟。1、接种室消毒2、无菌操作要求操作要在酒精灯火焰旁完成，每次运用器械后，都需求用火焰灼烧灭菌，接种后立刻盖好瓶盖。3、资料的切取和接种 将消过毒的菊花茎段在无菌培育皿中切成0.51cm的小段，用镊子夹取菊花茎段接种。4、接种本卷须知每接种一块外植体前，镊子需放入体积分数为70的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精灯火焰上烧一遍，冷却后再接种外植体在培育基中要分布均匀，放置外植体数量根据锥形瓶的大小确定，普通胡萝卜34块，菊的茎或叶68块，也不要太少，以充分

8、利用培育基中的营养成分和光照条件插入时应留意方向，形状学上端朝上，形状学下端朝下，不要倒插。茎段、茎尖基部插入培育基利于吸收水分和营养正常苗污染苗1、外植体带菌2、培育基及接种器具灭菌不彻底3、接种操作时带入4、环境不清洁污染途径思索：他计划做几组反复？他计划设置对照实验吗？答：每种资料或配方至少要做一组以上的反复。设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培育基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培育，用以阐明培育基制造合格，没有被杂菌污染。四培育接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培育，培育期间应定期消毒培育温度控制在18-22每日用日光灯光照12h五移栽 移栽生根的菊花试管苗之前，应先翻开培育瓶的封

9、口膜，让试管苗在培育间生长几日。普通放置在2025的遮荫环境中，顺应57d。试管苗不萎蔫，有新生长的趋势，便可移栽。1、翻开封口膜2、清洗转移 用流水清洗根部的培育基，将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间3、移栽幼苗长壮后，移栽到土壤中固体基质型，含水量高、蓄水性强、透性好，适宜栽培珍珠岩 ,珍珠岩是一种火山喷发的酸性熔岩，经急剧冷却而成的玻璃质岩石，有弧形或圆形裂隙，如珍珠的构造，所以被命名为珍珠岩 。蛭石是一种天然、无毒的矿物质，在高温作用下会膨胀的矿物。它是一种比较少见的矿物，属于硅酸盐。 六栽培 幼苗移栽后，每天察看并记录幼苗的生长情况，适时浇水、施肥，直至开花1、培育

10、基的灭菌高压蒸汽灭菌2、外植体的消毒酒精、氯化汞3、接种的无菌操作酒精、酒精灯灼烧4、无菌箱中的培育；5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？结果分析与评价一对接种操作中污染情况的分析二能否完成了对植物组织的脱分化和再分化三能否进展了统计、对照与记录四生根苗的移栽能否合格五、课题延伸1、普通来说，容易进展无性繁衍的植物，也容易进展组织培育2、实例：芦荟、豆瓣绿、秋海棠、月季营养繁衍扦插嫁接压条 扦插嫁接压条 练习1.答：植物组织培育所利用的植物资料体积小、抗性差，对培育条件的要求较高。用于植物组织培育的培育基同样适宜于某些微生物的生长，如一些细菌、真菌等的生长。而培育物一旦遭到微生物的污染，就会导致