第八章-甾体激素类药物的分析课件

1、第八章 甾体激素类药物的分析Analysis of Steroid Hormones激素（hormone）是内分泌细胞（内分泌腺如脑垂体、甲状腺、胰岛、肾上腺和性腺或分散存在的一些组织细胞如胃肠粘膜细胞及丘脑下部一些神经细胞等）所产生的微量化学信息分子，这些物质通过扩散或被血液转运到作用细胞或器官，从而调节细胞或器官的代谢，并有反馈性地调节机制以适应体内环境的变化，也有协调体内各部分之间相互联系的作用。 现已发现人和动物的激素有几十种，他们的化学结构各异。 按分子结构中是否含氮，可将激素分为两大类：一类是含氮激素，如胰岛素（蛋白质），促肾上腺皮质激素、催产素（多肽）、促甲状腺激素（糖蛋白）、甲

2、状腺激素（含碘氨基酸）、肾上腺素（胺类）等；另一类为甾体激素类（又称类固醇激素），如肾上腺皮质激素、性激素等Contents第一节第二节第三节第四节基本结构与分类鉴别检查含量测定DABC123456789101112131415161718192021第一节基本结构与分类甾体激素类药物均具有环戊烷并多氢菲的母核:按药理作用分类： 肾上腺皮质激素 性激素 雄性激素 蛋白同化激素 孕激素 (干扰素) 雌性激素标号：一、肾上腺皮质激素抗炎药 第一节基本结构与分类氢化可的松(天然)Hydrocortisone醋酸地塞米松Dexamethasone acetate地塞米松磷酸钠Dexamethasone

3、Sodium Phosphate 曲安奈德Triamcinolone Acetonide：结构面下方：结构面上方一、肾上腺皮质激素第一节基本结构与分类醋酸地塞米松Dexamethasone acetate母核共有21个碳原子；A环均有4-3-酮基，为共轭体系，具有紫外吸收；C17位上有-醇酮基，具有还原性；有的药物C17位上还有-羟基；部分药物C11位上有羟基或酮基，C1、C2之间有双键，6或9位有卤素取代，或有C16-羟基 改造：作用增强二、雄性激素 和 蛋白同化激素第一节基本结构与分类睾酮(天然) Testosterone 甲睾酮 Methyltestosterone 雄性激素 具有蛋白同

4、化激素作用结构改造 雄性激素 减弱同化作用（保留或增强） 蛋白同化激素：苯丙酸诺龙 Nandrolone phenylpropionate雄性激素母核有19个碳原子，蛋白同化激素在C10位上一般无甲基，母核只有18个碳原子A环上有4-3-酮基，具有紫外吸收C17位上有-羟基，或由它们形成的酯 改造：作用增强第一节基本结构与分类三、孕激素黄体酮 Progesterone醋酸甲地孕酮Megestrol acetate口服后可被迅速破坏失效只能注射给药结构改造：具有口服的活性活性增强孕激素类药物的母核有21个C原子，A环有4-3-酮基，C17位上有甲酮基，有的药物C17位上有-羟基或与酸形成的酯。醋

5、酸甲羟孕酮Medroxyprogesterone Acetate第一节基本结构与分类四、雌激素雌二醇(天然)estradiol 结构改造： 高效、长效雌激素药物 EstriolEstradiol Benzoate炔雌醇 Ethinylestradiol母核有18个C原子A环为苯环C3位上有酚羟基C17位上有-羟基有些药物的C17-羟基形成了酯有的药物C17位上有乙炔基第一节基本结构与分类五、孕激素(干扰素)炔诺孕酮 Norgestrel炔孕酮Norethisterone避孕药：米非司酮Mifepristone 米非司酮为抗孕激素药物 ：炔诺孕酮 Norgestrel雌二醇(天然)estradi

6、ol 黄体酮 Progesterone睾酮(天然) Testosterone 氢化可的松(天然)Hydrocortisone 1.4-3-酮DABC1234567891011121314151617181920213. C11： 或2. C17：，4. A环上的酚羟基5. 卤素(-F)，酯基第一节基本结构与分类可供分析的主要基团：二、鉴别1.物理常数测定（比旋度）2.与强酸的呈色反应 与H2SO4、H3PO4、HClO4和HCl等反应后呈色3.制备衍生物测定熔点4.官能团反应C17 醇酮基： Fehling试剂 Cu2O（红色）氨制AgNO3 Ag（黑色）四氮唑盐 显色2）酮基 +羰基试剂 显

7、色（腙） 常见羰基试剂： 2,4-二硝基苯肼、异烟肼、硫酸苯肼3）甲酮基 +Na2Fe(CN)5NO 显色4）酚羟基 +重氮苯磺酸盐 红色（偶氮染料）三、杂质检查1. 特殊杂质：硒、其他甾体等2. 其他甾体：与标示药物不同的甾体化合物来源：原料、中间体、异构体、降解产物特点：可能存在多个甾体杂质；结构类似方法： TLC法、 HPLC法1）TLC法：多采用自身对照法显色方法：四氮唑盐、硫酸乙醇判定方法： 规定杂质斑点数目 规定杂质斑点颜色 规定： 如显杂质斑点，不得多于2个，其颜色与对照品主斑点相比较，不得更深。 供试品 对照品 4mg/ml 0.08mg/ml 2）HPLC法自身对照法四、含量

8、测定包括HPLC法、紫外分光光度法、比色法等1.异烟肼比色法1）原理： C3-酮基 异烟腙2）操作： 对照液 供试液异烟肼HCl乙醇 异烟肼 6060min420nm测定A3）注意事项：反应速度和专属性：C3= O C17= O 、 C20= O， C11= O 不反应C3-酮基有一定专属性溶剂的选择：异烟肼、盐酸 无水乙醇或无水甲醇 酸、异烟肼的量： 盐酸：异烟肼 = 2：1 酸度 异烟肼盐 酸度 A 样品：异烟肼 = 1：8水分、O2与光线的影响： 含水量 腙水解 A 溶剂不挥发、不吸收水分时 O2与光线无影响温度的影响： 温度 反应速度2. 四氮唑比色法1）原理 肾上腺皮质激素类 C17

9、-醇酮基 ChP采用TTC（RT） USP采用 BT2）操作 对照液 供试液强还原性TTC 氢氧化四丁基铵25 暗处45min485nm测定AOH-还原红四氮唑RT/TTC 三苯甲 （红色）蓝四氮唑BT 双甲 (兰色）C17-醇酮基+3）注意事项基团对反应速度的影响C11= O C11OHC21OH C21-酯C16无论何种取代基溶剂、水分的影响含水量5%含水10%A10%含水30%几无反应无水乙醇醛 A 无醛无水乙醇O2与光线的影响碱的影响反应应在强碱性（pH13.75）条件下进行以氢氧化四甲基铵的结果最佳加入顺序：皮质激素 四氮唑 碱反应过程反应产物光敏感 避光，快速O2影响产物颜色和稳定性充N2 ，密封温度和反应时间 t t 甲 分解 ChP 25 4045 BP 30 1h3. Kober反应比色法1） Kober反应原理：max=465max=5152）改良的Kober反应： 使用铁-酚试剂： (NH4)2Fe(SO4)2 + H2SO4 + H2O2 + 苯酚 也