自身抗体实验室检测及意义分析课件

1、常见自身抗体检测及意义 The Common Autoantibodies Examination and Clinical Significance 诊断学 免疫学检验The First Affiliated Hospital of Nanchang University Qingshui Huang(黄清水)1Teaching outline理解几个概念AutoimmunityAutoimmune diseasesAutoantibodies and characteristics掌握常见自身抗体及其临床意义ANA、 RF、ENA 、ANCA、autoimmune liver diseas

2、es Clinical significance1学时Case one患者女，30岁，因面部红斑、胸闷、发热1个月加重7天入院。查体：体温38.5，脉搏102次/分，呼吸28次/分，面部红斑，左胸胁部饱满，呼吸活动度减弱，局部叩诊呈浊音，语颤、呼吸音消失，抗生素治疗无效。诊断考虑？鉴别诊断？需要完善哪些检查？Autoimmunity自身免疫是指机体免疫系统受某些内外因或遗传等因素作用产生针对自身抗原发生免疫应答反应，出现自身抗体或自身致敏淋巴细胞的现象。Autoimmune diseases自身免疫性疾病一类由自身免疫反应导致对机体造成免疫性病理损伤或功能障碍的疾病，可分为器官特异性（慢性甲状

3、腺炎）和非器官特异性（SLE、RA）两大类。The pathogenesy of autoimmune disease自身组织免疫耐受myasthenia gravisGraves diseaseAIHA1 type DMmultiple sclerosisRheumatoid arthritisSystemic lupus erythematosusSjogrens syndrome Systemic sclerosis Polymyositis/dermatomyositis Wegeners granulomatosis消化系统眼抗磷脂抗体综合征血液系统神经系统肺脏心血管肌肉骨骼皮肤粘膜

4、浆膜炎肾脏全身症状干燥综合征Autoimmune diseasesAutoimmune diseases characteristics病程长，女性患者居多，病因不清，有遗传倾向，临床症状多样病理特征为免疫炎症免疫抑制剂治疗有一定疗效可检出高滴度的自身抗体和（或）自身致敏淋巴细胞Autoantibodies自身抗体是针对自身组织成分产生的抗体，与自身组织成分的抗原决定簇发生反应，通过各种途径造成自身免疫损伤，如：变态反应、免疫复合物、ADCC、炎症反应及干扰细胞功能等。Autoantibodies characteristics自身抗体特性产生 在遗传背景下，隐蔽抗原的释放或移位，自身组织抗原

5、的改变或修饰，交叉抗原，免疫系统的调节异常等。作用 自身抗体参与免疫病理损伤，对某些自身免疫性疾病的诊断具高度特异性，血清滴度与疾病的活动性密切相关。自身免疫=自身免疫性疾病？Autoantibodies significance斑点法印迹法Methodes of common examinationWestblotIIFELISACommon examination itemsANAds-DNAENAANCAAnti-CCPGBMACLautoimmune liver diseases Antinuclear antibodiesANA：是指存在与血液和体液中，能与真核细胞核抗原起反应的自身

6、抗体的总称。狭义的ANA是指用间接免疫荧光法检出的抗细胞核成分的抗体；广义的是指用各种方法能检出的核物质，包括核酸、酸或碱性核组织蛋白和非组织蛋白等的抗体。Antinuclear antibodiesANA的性质主要是IgG，无器官特异性和种属特异性，可与所有动物的细胞核发生反应。核抗原成分复杂，已经发现有几十种，高滴度ANA对多种自身免疫免疫性疾病具有重要的诊断意义，有的已成为某些自身免疫性疾病的诊断标志物。ANA筛查及亚类ANA抗体的检测对明确诊断、临床分型、病情观察、预后等具有重要意义。Indirect immunofluorescenceThe common ANA photofluo

7、rogram荧光型相关抗体临床意义均质型抗dsDNA抗体、抗组蛋白抗体SLE、RA、SS斑点型抗ENA抗体MCTD、多种自身免疫性疾病核膜型抗dsDNA抗体SLE核仁型抗核仁核糖核酸抗体硬皮病着丝点型抗着丝点抗体硬皮病胞浆型抗细胞浆成分抗体原发性胆汁性肝硬化ANA clinical significance多种风湿性疾病可出现阳性正常人可有5%的阳性率，并随年龄增加有上升趋势，5%SLE病人的ANA为阴性ANA对诊断风湿病敏感，但特异性差，不能提示发生免疫反应的是抗细胞核那种成分抗体，只能根据荧光型大致估计，临床作为诊断风湿病的筛选实验。ANA testing guidelinesAnti-D

8、NA antibody概述：染色体由dsDNA和组蛋白（H1、H2、H2、H3、H4五种成分）及非组蛋白组成（种类很多如：核酸代谢所需的各种酶等），抗DNA抗体包括两大类：抗dsDNA抗体和抗ssDNA抗体参考值：IFA法为阴性临床意义 抗dsDNA抗体阳性：对SLE特异性高，活动期阳性率达7090%，但敏感性低 抗ssDNA抗体阳性：许多自身免疫性疾病都可有阳性，其诊断特异性不如抗dsDNA抗体Anti-Extractable Nuclear antigen AntibodiesENA为用等渗盐水或磷酸盐缓冲液所提取的核内抗原多种相对分之量不同的多肽，成分复杂，达数十种之多，用于检测相应抗体

9、，包括：抗Sm抗体、抗RNP抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体、抗Scl-70抗体、抗Jo-1抗体等参考值：IBT法(免疫印迹) 为阴性The common markers for autoimmune diseases 标志抗体相关疾病抗dsDNA抗体SLE抗Sm抗体SLE抗SS-B抗体SS抗着丝点抗体SSc(局限型)抗Scl-70抗体SSc(弥漫型)抗PM-Scl抗体PM/DM抗Jo-1抗体PM/DM高滴度抗RNP抗体MCTDThe common markers for autoimmune diseases标志抗体相关疾病抗肾小球基底膜抗体肺出血肾炎综合征抗平滑肌抗体型自身免疫性肝炎抗肝肾

10、微粒体抗体型自身免疫性肝炎抗可溶性肝抗原抗体型自身免疫性肝炎抗线粒体抗体型原发性胆汁性肝硬化抗角蛋白抗体类风湿性关节炎抗桥粒抗体寻常天疱疮抗肌内膜抗体过敏性肠病Specific autoantibodies for SLE靶抗原 阳性率(%) ssDNA 70-95 dsDNA 30-90 组蛋白 40-80 核小体 50-95 U1-nRNP 15-40 Sm 5-30 SS-A 20-60 SS-B 10-20 核糖体P蛋白 5-15 Ku 10 PCNA 3 心磷脂, 2-GP1 20-40Specific autoantibodies for pSS靶抗原 阳性率 (%) SS-A 4

11、0-95 SS-B 40-95Specific autoantibodies for SSc靶抗原 阳性率(%) 着丝点 80-95 Scl-70 25-75 原纤维蛋白 5-10 PM-Scl (与多肌炎的重叠综合征） 2-5Specific autoantibodies for PM/DM靶抗原 阳性率(%) ssDNA40-50 Jo-125-35 PM-Scl (与硬化症的重叠综合征) 8 Mi-2 5 Ku (与硬化症的重叠综合征) 1-7 PL-7, PL-12, OJ, EJ, KJ 2-3(各种氨基酰rRNA合成酶)antineutrophil cytoplasmic anti

12、body,ANCA中性粒细胞ANCA是一组针对中性粒细胞胞浆抗原的自身抗体，其靶抗原为中性粒细胞胞浆中的颗粒蛋白酶随着对ANCA的深入研究，ANCA的特异性靶抗原逐渐被发现并得到纯化 到目前为止，已有十余种中性粒细胞胞浆成分被证实为ANCA的靶抗原ANCAANCA determinationcANCA蛋白酶3 (PR3) pANCA髓过氧化物酶(MPO)aANCAANCA clinical significance与多种疾病相关系统性血管炎诊断与鉴别诊断炎症性肠病诊断与鉴别诊断自身免疫性肝病诊断与鉴别诊断其它疾病诊断与鉴别诊断 结缔组织病 感染性疾病 autoimmune liver dise

13、ases ,AILD自身免疫性肝病是一组免疫介导的肝脏损伤,肝组织改变与慢性病毒性肝炎相一致，但血清病毒标志物阴性。临床上有自身免疫的各种表现，多数自身免疫性肝病伴有特异性自身抗体的出现，自身抗体的检测对临床肝病学具有重要的意义。根据临床表现、生物化学、影像学和组织病理学特点,可简单地分为以肝炎为主型的自身免疫性肝炎(AIH)以胆汁淤积为主型的原发性胆汁性肝硬化(PBC)以胆系损害原发性硬化性胆管炎(PSC)Autoantibodies for AILD自身免疫性肝炎（AIH） ANA 、 SMA（抗肌动蛋白抗体 ） 抗LKM1抗体、抗LC1抗体 抗SLA/LP 原发性胆汁性肝硬化（PBC）

14、AMA/AMA-M2 抗核包膜抗体、抗核点抗体、抗着丝点抗体 原发性硬化性胆管炎（PSC） 抗中性粒细胞胞浆抗体（pANCA）AILD determinationAILD clinical significance抗平滑肌抗体（ASMA/ SMA）见于多种肝脏疾病及非肝脏疾病，无疾病诊断特异性，对I型AIH诊断有重要意义，高滴度的SMA（1:160）对AIH诊断敏感性相当高（至少90）抗肝/肾微粒体抗体（抗LKM1抗体）II型AIH血清特异性抗体抗可溶性肝抗原抗体（抗SLA抗体） 型AIH的血清特异性标志抗肝细胞胞浆抗原1型抗体（抗LC1抗体） II型AIH的血清特异性标志抗线粒体抗体Late

15、st study about autoantibodiesRA相关抗体抗角蛋白抗体抗丝集蛋白抗体抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体SS相关抗体Anti-alpha-fodrin antibodies 慢性炎症性肠病相关抗体抗小肠杯状细胞抗体抗酿酒酵母抗体Latest study about autoantibodiesSLE相关抗体抗核小体抗体抗核糖体P蛋白抗体抗磷脂抗体综合征抗磷脂抗体多肌炎和皮肌炎相关抗体抗Mi-2抗体How to read the reports?ANAds-DNAENA（ANA谱14项）ANCAAILDOthers几个要说明的问题ANA（-）而ANA14项（+）ds-DNA（I

16、IF）与ANA14项中不符合ANCA （IIF+）而确认试验阴性Autoimmune diseases laboratory diagnosis(4-1)血常规尿常规血沉免疫球蛋白补体风湿三项X线MRICTANAENAACLANCAGBMAIH相关抗体诊断治疗预后Autoimmune diseases laboratory diagnosis(4-2)红斑狼疮筛查干燥综合症进行性系统性硬化症多发性肌炎皮肌炎等怀疑自身免疫性疾病ANA筛查Anti-dsDNA必要时查ANA谱-14项Autoimmune diseases laboratory diagnosis(4-3)可疑自身免疫性肝病ANA筛查必要时查ANA谱-14项自身免疫性肝病筛查自身免疫性肝病相关抗体确认Autoimmune diseases laboratory diagnosis(4-4)炎症性肠病自身抗体谱血管炎自身抗体谱ANA筛查抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）必要时查ANA谱-14项提高质量，加强交流质量控制人员室内质控室间质评加强临床沟通与交流已开展项目新开展项目申请单的填写科研课题文章Course summary and que