实验室的卫生与安全

1、实验室的卫生与安全动物检疫实验室是从事与动物及其产品有关的动物传染病、寄生虫病的病原 学、免疫学、酶学、血清学、分子生物学、生物化学诊断的专设场所。在实验室 需经常使用各种各样的病原微生物，这些病原微生物不仅对畜禽是致病性的，而 且其中一些还可感染人类，如果控制不严引起扩散，不仅污染实验室，导致检验 结果失败或混淆，还可能污染周围环境，对畜禽造成威胁，甚至引起疫病暴发； 共患疾病还会引起实验室工作人员感染。引起实验室感染的病原类型的百分比 是，细菌49.1%，病毒31.6%，立克次氏体11.3%，真菌5.7%，寄生虫2.3%。因 此，要做到检疫检验结果准确，又不造成自身感染和从实验室扩散病原微

2、生物， 对动物检疫实验室必须有具体的要求。（一）在检疫检验过程中不可避免地要接触各种各样的病原微生物，含有病 原微生物的样品，如脏污样品的处理和检验，特别是粉状样品或含灰尘较多的样 品容易形成气溶胶和空气传播性微粒，容易被操作者吸入而感染，因此应在“排 气橱”内操作，以减少操作者感染的危险。保护橱的基本结构由Williams和Lidwell设计，它由以下部分组成：一个 具有适当体体积并内部明亮的橱，装配有可移动的玻璃窗，通过它操作者可以看 见自己的操作；一个工作面操作者可将手臂伸入，橱上连结一排气系统，形成工 作面气流的流通；此外还装有滤器，以便过滤排出气流中的传染性微粒。保护橱 应装配底盘，

3、以防液体漏出和便于清洁工作。保护橱有正面开放式或半栅栏式和 封闭式或全栅栏式等，此处介绍的是正面开放式排气保护橱要求。工作面气流速度通过保护橱工作面的气流是橱面的面积和排气系统牵 力互相作用的结果，一般不应少于0.5m/s。风速过小，不能完全排队由强速率 所释放出的微粒。一般用1.0m/s （最低为0.75m/s）的均一气流能产生最好的 效果。当气流小于0.5m/s时，由于在保护橱内操作和来自酒精灯的热空气以及其 他因素，可能引起涡流，使传染性微粒逸回室内。气流超过1m/s时，可产生部 分真空，使酒精灯缺氧熄灭，滤器很快被堵塞，使工作不顺利。保护橱的安置和室内通风 保护橱应安放于远离门窗处，安

4、放位置的前后 均不留通道。因为交叉的气流和扰动可能引起涡流，抑制排气系统的功能。保护 橱离地面的高度，应使操作者能通过前面的玻璃观察其橱内为度。排气保护橱的房间体积不应过小，至少大于30m3。通风要良好，但要避免与 户外直接通风。排气系统及安装 由一根约长6m、直径10cm、内径光滑的干道管和一个 具有0.1m3/s吹风能力、旋转幅度不少于直径15cm、转速为3 000r/min的风扇 组成排气系统。风扇部位必须安装在干道管的末端，排于大气中。这样在干道管中就形成了 负压，所漏气将被吸出而不致于漏入室内。理想的排气系统应安装于屋顶，使用 排气系统的实验室应设置于顶楼。如果条件不允许，也可安装在

5、墙壁或窗户上。 安装的方位很重要，假如排出口面向风头，必将减低排气效能，需要装置一蘑菇 状挡板，遮蔽其出口或将排气管道管高出屋顶。如果出口在建筑物的背风面，当 优势风吹向建筑物时，可能形成一个风洼，而排出气若排入这种风洼，则不易散 开和稀释，并可能涡卷入背风面的窗内，因此道管应高于风洼之上。排气系统出口处应安装可开闭的百叶窗，当风扇运转时开放，停止时关闭， 以防在逆风情况下空气回流。出口周围应安装铁丝网，防止鸟类栖息和营巢。干道管安装连接排气橱和排气系统的干道管应尽可能短，其内壁要光 滑，弯曲要少。拐弯部分必须为圆形，不可成直角，弯曲的半径不应少于干道管 直径的2.5倍。这些因素可减少乱流和拖

6、力。塑料排气管的直径以10-15cm为宜。滤器含有微生物的排气必须经过过滤，除去其传染性微粒。要求有两 种滤器，直接安装于排气橱的强制通风室之上。安装于低位的称为初滤滤器，除 去尘埃和小于5p m的微粒。上位的称高效能颗粒滤器，排除小于0.川m微粒。 这些滤器系统需要经常检查。排气橱的检查及其机能的检测排气橱和排气系统运转功能的检验，需要 两种仪器，即风力表和气流烟向测验器。风力表用来测量工作面的气流，要有6处数据；工作面的每一角落和中心的 顶部和底部风速不应低于1.0m/s，每周测验一次。气流烟向测验器系由一个含有化学药品的小玻璃管和一个橡皮球组成。空气 从橡皮球通过玻璃管喷出白烟，即可测出

7、橱内的涡流、乱流和回流，以及干道管 连结处的漏气现象。排气保护橱内气流是否充足，可由装配于橱上的压力表或文德利氏管 (Venturi system)自动的记录于外部刻度表上。消毒、清洁和维修排气橱内和滤器的消毒可使用甲醛溶液，装于细颈瓶 内放入橱内加热蒸干。消毒工作应在滤器更换前进行，一般密封过夜；同时应开 动风扇几分钟，以利甲醛蒸气浸透过滤器。日常的清洁和消毒可用酚类消毒剂擦 拭。当排气保护橱的气流低于要求时，则需在消毒后进行拆卸，更换滤器，用喷 灯烧滤板架中存挂的污物，以及其他部件的检修等。保护橱内的器械，应尽量少放并保持专用。（二）无菌室的消毒在操作前、后各用紫外灯照射0.5-1h，经试

8、用一段时 间，或发生霉菌或顽固性细菌污染时，用甲醛溶液熏蒸消毒，每立方米容积用甲 醛溶液10-15ml，加高锰酸钾5-7.5g，密闭门窗，熏蒸4h以上或过夜。启封后 残余甲醛溶液气雾经打开窗户通风或用放在浅盘中的氨水中和。病毒室平时用1%新洁尔灭或3.3%漂白粉或2%过氧乙酸等擦拭。（三）传染性材料的处理 实验室中所有传染性材料一概不准拿出实验室。 废弃的材料均应经过高压消毒后分别进行处理。用作传染性材料消毒的高压锅必 须专用。送检的病理标本通常应贮存于实底容器中，放置于专用橱内或指定的冰 箱中，检验完成后即可送去高压消毒。废弃的容器和可重复使用的容器应经高压 消毒后分开，废弃的放入袋中送去焚

9、化；可重复使用的物品消毒后再送去洗涤。 消毒小量的家兔或豚鼠等粪尿时，可用1份粪尿加漂白粉5份，充分搅拌，消毒 2h以上。有些传染性材料可用化学消毒剂进行消毒，实验室常用的为苯氯酸钠溶液。 放入消毒液内的吸管、玻片、毛吸管等均应浸泡过夜后方可处理。处理时，吸管 等应在热水（65C）中漂洗或用水煮沸后再按常规法洗净。盛消毒液的玻璃器皿 在重新换液前，应进行高压消毒，以防耐消毒剂的细菌滋生。因为在消毒剂的废 弃筒内，经常有蛋白质类加入其中，致使消毒剂的作用迅速丧失，所以实验室废 弃筒应经常更换。含有10-3有效氯的浓次氯酸盐适用大多数消毒目的。当存在大量血液时，可 用强次氯酸盐（含10-2有效氯）

10、。当存在大量有机物而无血液时，可选用可溶性 苯酚溶液。（四）为方便选用各种消毒剂，对常用消毒剂作简单介绍，以供参考。消毒剂的种类按其主要的作用原理，可分为以下几类：使菌体蛋白质变性或沉淀 重金属盐类易与带阴电的细菌蛋白质结合，使 之变性或发生沉淀。汞、银、砷等均能与菌体酶蛋白的一SH基结合，使一些以 此为必要基的酶丧失活性。重金属盐类遇到有机物特别是蛋白质时，则杀菌作用 降低。氧化剂：能使菌体酶蛋白中的一SH基氧化变成为一S S 基而失去酶活性。 氯能与蛋白质中的氨基结合，使菌体蛋白氯化，代谢机能发生障碍，细菌因而死 亡。漂白粉、氯及其衍化物（如氯胺类）分解时生成次亚氯酸，再分解时生成新 生氧

11、O和Cl，呈氧化和氯化作用，使细菌死亡。过氧乙酸（CHCOOOH）:为无色透明或淡黄色液体，易溶于水，为强氧化剂， 对金属有腐蚀性。3市售品为20%水溶液，对细菌及其芽胞、真菌、病毒均具有高 效的杀灭作用。常用0.2-0.5%水溶液消毒，稀释液只能存放3天。醇类：能使菌体蛋白变性，具有一定的杀菌力。常用的为乙醇。无水乙醇无 杀菌力，稀释至70%左右时才有效。醛类：杀菌作用比醇类强，以甲醛和戊二醛作用最强。改变细菌细胞壁或破坏细胞膜使通透性发生改变。酚类：苯酚、来苏儿等酚类化合物，低浓度能破坏细胞膜，使胞浆内容物如 氨基酸等漏出，高浓度使细菌蛋白质凝固，能抑制细菌生长并杀灭之。此外，也 有抑制细

12、菌某些酶系统如脱氢酶和氧化酶等作用。表面活性剂：又称去垢剂（detergent），为四联胺化合物。易溶于水，能 降低液体的表面张力，使物品油脂乳化，易于去除，因而具有清洁作用。并能吸 附于细菌表面，改变细胞壁通透性，使菌体内的酶、辅酶和代谢中间产物逸出而 杀菌。因细菌一般带阴电荷，故阳离子型表面活性剂有较强的杀菌使用。其作用 机理，一般认为是损害细胞壁，使菌体内的氯、磷和其他物质逸出。同时由于水 解酶游离，细菌成分发生自溶，最后导致死亡。此外，亦引起菌体蛋白质变性沉 淀。阴阳离子表面活性剂相遇作用可抵消。常用的有新洁尔灭、杜灭芬等，使用 新洁尔灭时，不能与肥皂、合成洗涤剂及盐类接触时，否则失效

13、。影响细菌的代谢作用染料：碱性染料，如龙胆紫、甲紫与煌绿等，有显著的抑菌作用，同时也有弱的杀菌作用。 碱性染料对革兰氏阳性细菌的作用比对革兰氏阴性菌强。氨基吖啶的作用不受血清的抑制， 可用于治疗创伤。环氧乙烷（CHO）:又称氧化乙烯，是一种化学性质活泼的环氧类烷基化合 物，它对细菌及芽胞、病毒、真菌等有较强的杀灭力。酸、碱类主要以离子或其分子杀菌（五）工作衣、帽、口罩等消毒处理 进行病毒和细菌的检疫检验，进出操 作室必须更衣、换鞋。进工作室要穿工作室内的工作衣，戴工作帽和口罩，必要 时要戴手术手套。操作完成后脱手套，应先用一手指勾另一手的手套外表面（不 要接触内表面），将手套脱至一半，再用已脱

14、一半手套的手的手指勾向另一手的 手套外表面脱下手套，然后用已脱下手套的手的手指夹住另一手手套内表面将手 套脱下。然后脱下帽子、口罩和工作衣，连同手套放入高压锅内准备高压消毒。 工作完毕，一定要洗手。洗手时，不要用指头开水龙头开关，而用肘或脚踏式水 龙头开关，水从上向下冲洗手后再用肥皂清洗一次。所以实验室必须装肘动或脚 动开关的水源。龙头莲盘最好装置莲头喷嘴。接触毒物的生化实验室和同位素实 验室也要安装肘动或脚动开关的水源，以防毒物对工作人员的毒害。（六）避免交叉污染在同一个无菌室或洁净工作台上不能同时进行两种或 两种以上的病原检验，以免交叉污染。有条件的一个无菌室或洁净工作台仅检验 一种病原。

15、若条件受到限制，应当检验完成一种病原后彻底消毒，再进行另一项 检验，以免交叉污染，影响检测结果。在培养传代细胞种的无菌室或洁净工作台，不要进行病毒或细菌的检验，以 免污染种细胞。（七）实验室的污水处理 检疫用过的水应先集中到一个污水处理池，池中 加工业烧碱，使残留的病毒或烈性细菌彻底杀灭后在排放到城市下水道，以避免 危害环境。（八）实验室安全需用氧气的设备如气相色谱仪和通气增菌培养设备等，都应在单独房间安 放，要避免与其他明火接触，房间注意通风，以免发生意外。使用氮气或二氧化碳的设备如二氧化碳培养箱、超滤过滤器等，要防止窒 息发生意外，房间要注意通风。冰箱和温箱要分别在不同房间安放，不要混放，

16、因为它们都会产生很大的 热量，因此房间要注意通风、降温、室内温度不可过高。易燃、易爆、有毒的试剂，要根据它们的特性合理存放，以免发生意外， 如乙醚极易挥发、易燃，沸点为34.6C，在空气作用下易氧化，在光线下促进 氧化。氧化物在100C能引起强烈爆炸，在南方的夏天，气温常常超过它的沸点， 所以应放在阴凉避光处。又如氯仿是有毒易挥发的药品，遇光会产生极毒的光气。 要存放于通风阴凉避光处。实验室必须常备小型灭火器，以备急用。除了上述易燃易爆的试剂外，最 常用的酒精灯，若因操作不当打破就会引起火源，若不及时扑救，也会酿成灾害， 所以，常备小型灭火器应急使用可以避免较大的损失。最好屋顶能装配自动灭火

17、器，防患于未然。表4-2常用消毒剂的性状与用法类 别名称主要性状用法用途重升汞杀菌作用强，腐蚀金0.05%-0.1%非金属器皿器械金属属红汞抑菌力弱，无刺激性2%水溶液皮肤粘膜，小创伤消盐毒类硫柳汞杀菌力弱，抑菌力强，0.01%生物制品防腐不沉淀蛋白质硝酸银有腐蚀性0.1%蛋白银银有机化合物弱蛋白 银银有机化合物高锰酸 钾过氧化氢过氧乙 酸强氧化剂，稳定新生氧杀菌稳定20%市售品无爆炸危 险，性质不稳定，原液 对皮肤、金属有强烈腐 蚀性1%-5%10%-20%0?3%0.2%-0.5%皮肤消毒，手术部位消毒新生儿滴眼预防淋球菌感染眼及尿道粘膜消毒皮肤、尿道消毒、蔬 菜、水果消毒口腔粘膜消毒塑料

18、、玻璃、人造纤 维消毒、皮肤消毒（洗 手）卤素及其化合物粉 胺 氯 酸酒漂 氯 二氤尿碘（0.2-0.5）X 10-6乳状液10%-20% 配成乳液;澄清液: 乳状液放24h后取 上清液0.5%-1.5%0.2%-0.5%水溶液4X10-63%2.5%碘酒（酊）氯气，刺激性强，有 毒白色粉末，有效氯易 挥发，有氯味，腐蚀金 属、棉织品、刺激皮肤 易潮解白色结晶，有氯臭， 含氯较稳定白色结晶，有氯味， 杀菌力弱，可持入，腐 蚀与杀菌作用小白色粉末，有氯味， 杀菌力强，较稳定，含 有效氯62%-64%刺激皮肤，不能与红 汞水通用饮水及游泳池消毒乳状液：地面、厕所、 排物消毒；澄清液：空 气、物品、

19、表面（0.5%-1% 喷雾）地面、墙壁、家具消 毒，饮水消毒： 0.3-0.4g/kg室内空气及表面消毒（喷雾）0.1%-0.2% 浸泡衣服消毒水消毒空气（喷雾）， 排泄物、分泌物等皮肤消毒已醇甲醛戊二醛消毒力不强，对芽胞 无效挥发慢，刺激性强挥发慢，刺激性少， 碱性溶液，有强大杀菌70%-75%10%以 0.3%NaHCO 调 pH 至 7.5-8.5,配皮肤、体温表消毒浸泡，物品表面消 毒，蒸气消毒：10%溶 液加等量水，蒸发，密 闭房间6-24h，或加半 量高锰酸钾，产生黄色 浓烟，消毒房间消毒不能用热力灭 菌的物品（如精密仪作用成2%水溶液器）酚类苯酚杀菌力强，有特殊气 味3%-5%3%-5%地面、家具、 器皿来苏儿杀菌力强，有特殊气 味3%-5%表面消毒：2%皮肤消 毒季胺盐类表面活性剂新洁尔杜灭芬（消毒宁灭）易溶于水，刺激性小， 稳定，对芽胞无效；遇 肥皂或其他合成洗涤 剂U，作用减弱稳定、易溶于水，遇 肥皂或其他合成洗涤剂 效果减弱0.05%-0.1%0.05%-0.01%外科手术洗手及皮 肤粘膜消毒，浸泡手术 器械皮肤创伤冲洗；金属 器械、棉织品、料物品 消毒巳烷洗必泰白色结晶，稳定，略 溶于水，溶于醇，禁忌 其盐类