分子生物学考试重点(共10页)

1、1.简述真核生物(shngw)的染色体结构，它们是如何组装的？有几种组蛋白参与核小体的形成？真核生物的染色体十分复杂，具有(jyu)不同层次的组装结构，染色质分为常染色质和异染色质两种。在常染色质中DNA的压缩比为1 0002 000，相对比较伸展(shnzhn)，主要为单拷贝基因和中等重复序列。异染色质是指在间期核中DNA折叠压缩程度较高，约8000-10000倍,以凝集状态存在，对碱性染料着色较深的区域。在着丝粒、端粒、次缢痕以及染色体的某些节段，由较短和高度重复的DNA序列组成永久性的异染色质。另一些染色质区域随细胞分化而进一步折叠压缩，以封闭基因活性，称为功能性异染色质。染色质的基本结

2、构单位是核小体。核小体是由组蛋白核心和盘绕其上的DNA构成。核心由组蛋白H2A、H2B、H3和H4各2分子组成，所以是一个八聚体。在 DNA分子上的每一条链都含有合成它的互补链所必需的全部遗传信息。在复制过程中首先是双链解旋并分开，之后以每条链作为模板在其上合成新的互补链，其结果是由一条链可以形成互补的两条链。这样新形成的两条双链DNA分子与原来DNA分子的碱基顺序完全一样。在此过程中，每个子代分子的一条链来自亲代DNA，另一条链则是新合成的，这种方式称为半保留复制。在DNA复制过程中每个复制叉中的前导链连续复制，而后随链是以反方向合成不连续的短片段。最后再由连接酶连接成连续的DNA序列，这种

3、复制方式称为半不连续复制。半保留复制的生物学意义是，在半保留复制中碱基配对是核酸分子间传递遗传信息的结构基础。无论是复制、转录或逆转录，在形成双链螺旋分子时都是通过碱基配对来完成的。这种复制机制还说明了DNA分子在代谢上的稳定性，经过许多代的复制，DNA多核苷酸链仍可保持完整，并存在于后代而不被分解。与细胞的其他成分相比这种稳定性与它的可遗传功能是相符合的。9. 简述以下DNA复制酶与蛋白质因子的体系，DNA聚合酶、Klenow片段、DNA聚合酶、DNA聚合酶、复合物、 夹子装置器、DNA连接酶、SSB、HU、DnaA 、DnaB 、DnaC 、 两类拓扑异构酶 DNA聚合酶是多功能酶。可催化

4、以下几种反应： 通过核苷酸聚合反应，使DNA链沿3 5方向延长(聚合酶活性)；由3端水解DNA链(3 5核酸外切酶活性)；由5端水解DNA链(3 5核酸外切酶活性)；由3端使DNA链发生焦磷酸解；无机焦磷酸与脱氧核糖核苷三磷酸之间的焦磷酸基交换。焦磷酸解是聚合反应的逆反应，焦磷酸交换反应由前两个反应连续重复多次引起。因此，DNA聚合酶I兼有聚合酶、3 5核酸外切酶和5 3核酸外切酶的活性。在聚合酶活性中心，与这些功能相关的结合位置分布十分精巧而灵活。DNA聚合酶为多亚基酶，其聚合酶亚基由一条相对分子质量(zhling)为88 000的多肽链组成。这个酶的活力比DNA聚合酶I高。NA聚合酶具有(

5、jyu)3 5核酸(h sun)外切酶活性，但无5 3活性。DNA聚合酶也不是复制酶，而是一种修复酶。DNA聚合酶是由多个亚基组成的蛋白质，亚基很容易解离，全酶(holoenzyme)由、 和10种亚基所组成，除合成速度比聚合酶I快外其他性质与聚合酶I基本相同。DNA聚合酶的其他许多性质都表明它是DNA复制酶。DNA聚合酶被蛋白酶切开得到的大片段称为Klenow片段，具有催化DNA聚合作用和3 5校对功能。聚合酶III中的亚基是一种依赖DNA的ATP酶，全酶中的复合物由6个亚基(2)构成，主要功能是协同亚基嵌住模板DNA，又称夹子装置器。3类RNA聚合酶都有几种共同的亚基：根据其结构与功能，可

6、以分为核心亚基、共同亚基和非必须亚基。帽子结构的功能（1）对翻译起识别作用-为核糖体识别RNA提供信号，Cap0的全部都是识别的重要信号，Cap1,2的甲基化能增进识别（2）增加mRNA的稳定性，使5端免遭外切核酸酶的攻击(3)有助于mRNA越过核膜，进入胞质poly(A)的功能（1）可能与核质转运有关（2）增强mRNA稳定性（3）增强可翻译能力9、Lac操纵子调控机制总结当低葡萄糖而高乳糖时，部分乳糖在半乳糖苷酶作用下转变为异乳糖，异乳糖可作为诱导物和有活性阻遏蛋白结合，使阻遏蛋白失活，不能结合O，RNA聚合酶顺利结合启动子，起始转录利用乳糖的酶；同时，由于没有葡萄糖存在，胞内cAMP浓度高

7、，大量的cAMPCAP复合物结合在CAP位点，极大的促进下游结构基因转录效率，半乳糖苷酶、通透酶和转乙酰酶的含量高，这时候，细菌就分解乳糖为葡萄糖和半乳糖，葡萄糖直接作为碳源，半乳糖利用gal操纵子调控的酶转变为葡萄糖，由于阻遏物不断合成，当乳糖被消耗完毕后，有活性的阻遏蛋白可重新建立阻遏状态，酶合成被抑制，经过一段延迟期后，逐渐被稀释。当高葡萄糖和高乳糖时，乳糖可作为诱导物和有活性阻遏蛋白结合，使阻遏蛋白失活，不能结合O，RNA聚合酶可顺利结合P起始转录分解利用乳糖的酶；同时，但是由于葡萄糖存在，胞内cAMP浓度极低，没有cAMPCAP结合在CAP位点，转录虽然可以起始但还是效率极低，半乳糖

8、苷酶、通透酶和转乙酰酶的含量非常少，这时候，细菌就利用葡萄糖作为碳源，而不利用乳糖。色氨酸操纵子调节(tioji)机制当环境能提供足够浓度的色氨酸时，调节蛋白R与辅阻遏物色氨酸结合，构象变化而活化，就能够与操纵基因Otrp特异性亲和结合，阻遏结构基因的转录起始。因此这是属于一种可阻遏的负调控操纵元，即操纵子通常是开放转录的，有效应物（色氨酸为辅阻遏物）作用时则阻遏关闭转录；同时，色氨酸浓度高，tRNAtrp-色氨酸浓度随之升高，核糖体沿mRNA翻译移动的速度加快，占据1和2区域，1和2、2和3配对的机会减少，3和4配对就形成具有终止结构C茎环，RNA聚合酶终止转录，于是即使(jsh)已经开始的

9、转录就减弱，这样，在有色氨酸存在时，大肠杆菌利用外界提供的色氨酸，而很快关闭其体内色氨酸合成途径，直接利用外界trp。在色氨酸浓度未达到能起阻遏作用时，调节蛋白R未与辅阻遏物色氨酸结合，构象处于失活状态，不能与操纵基因Otrp特异性亲和结合，结构基因的转录就可起始进行(jnxng)。同时，Ptrp起始转录后，RNA聚合酶沿DNA转录合成mRNA，同时，核糖体就结合到新生成的mRNA核糖体结合位点上，开始翻译。tRNAtrp-色氨酸量也少，使核糖体沿mRNA翻译移动的速度慢，赶不上RNA聚合酶沿DNA移动转录的速度，这时核糖体占据前导序列1区域，使不能生成发夹结构A，于是2和3区域配对就形成发夹

10、结构B，阻止了C生成终止信号的结构，RNA聚合酶得以沿DNA前进，继续去转录，编码合成色氨酸的酶。1、真核生物所有的mRNA都有polyA结构。（X）组蛋白的mRNA没有2、由于密码子存在摇摆性，使得一种tRNA分子常常能够识别一种以上同一种氨基酸的密码子。（）3、大肠杆菌的连接酶以ATP作为能量来源。（X）以NAD作为能量来源4、tRNA只在蛋白质合成中起作用。（X）tRNA还有其它的生物学功能，如可作为逆转录酶的引物5、DNA聚合酶和RNA聚合酶的催化反应都需要引物。（X）RNA聚合酶的催化反应不需要引物6、真核生物蛋白质合成的起始氨基酸是甲酰甲硫氨酸（X）真核生物蛋白质合成的起始氨基酸是

11、甲硫氨酸7、质粒不能在宿主细胞中独立自主地进行复制（X）质粒具有复制起始原点，能在宿主细胞中独立自主地进行复制8、RNA因为不含有DNA基因组，所以根据分子遗传的中心法则，它必须先进行反转录，才能复制和增殖。（X）不一定，有的RNA病毒可直接进行RNA复制和翻译9、细菌的RNA聚合酶全酶由核心酶和因子组成。（X）10、核小体在复制时组蛋白八聚体以全保留的方式传递给子代。（）11、色氨酸操纵子中含有衰减子序列（）12、SOS框是所有din基因（SOS基因）的操纵子都含有的20bp的lexA结合位点。（）1、在真核基因(jyn)表达调控中，(B)调控元件能促进(cjn)转录的速率。A、衰减(shu

12、i jin)子B、增强子C、repressorD、TATABox2、核基因mRNA、的内元拼接点序列为(D)。A、AGGUB、GAUGC、UGGAD、GUAG3、下列何种因子不会诱变DNA(D)A、亚硝酸B、UVC、丫啶橙D、饱和脂肪乳剂4、RNA聚合酶1的功能是(C)A转录tRNA和5sRNA基因；B转录蛋白质基因和部分snRNA基因；C只转录rRNA基因；D转录多种基因如果一段DNA产生了1的译码突变，可以加以校正的是（D）A突变型氨酰tRNA合成酶B有突变型反密码子的tRNAC有切割一个核苷酸的酶D有四个碱基长的反密码子的tRNA6、参与重组修复的酶系统中，具有交换DNA链活性的是（D）

13、ADNA聚合酶IBRecB蛋白CRecC蛋白DRecA蛋白7、原核RNApol识别的启动子位于：(A)A、转录起始点的上游；B、转录起始点的下游；C、转录终点的下游；D、无一定位置；8、在研究原核翻译过程中，可用不同的抑制剂研究翻译诸阶段，其中链霉素可抑制：(C)A、起始B、延长C、肽基有P位移至A位D、核糖体移位9、在什么情况下，乳糖操纵子的转录活性最高（A）A高乳糖，低葡萄糖B高乳糖，高葡萄糖C低乳糖，低葡萄糖D低乳糖，高葡萄糖设密码子为5XYZ3，反密码子为5ABC3，则处于摆动位置上的碱基为（C）AX-CBY-BCZ-A3、详述大肠杆菌色氨酸操纵子的调控机理。（12分）答：大肠杆菌色氨

14、酸操纵子的转录受阻遏和衰减两种机制的控制，前者通过阻遏蛋白和操纵基因的作用控制转录的起始，后者通过前导序列形成特殊的空间结构控制转录起始后是否进行下去。1）色氨酸操纵子的可阻遏系统：在阻遏系统中，起负调控的调节基因的产物是一个无活性的阻遏蛋白，色氨酸是辅阻遏物；当色氨酸不足时，阻遏蛋白无活性，不能和操纵基因结合，色氨酸操纵子能够转录；当色氨酸充足时，阻遏蛋白和它结合而被激活，从而结合到操纵基因上，而色氨酸操纵子的操纵基因位于启动基因内，因此，活性阻遏物的结合排斥了RNA聚合酶的结合，从而抑制了结构基因的表达。2）色氨酸操纵子的衰减调控在色氨酸操纵子的操纵基因和第一个结构基因之间有一段前导序列L

15、，在前导序列上游部分有一个核糖体结合位点，后面是以起始密码AUG开头的14个氨基酸的编码区，编码区有两个紧密相连的色氨酸密码子，后面是一个终止密码子UGA，在开放阅读框下游有一个不依赖因子的终止子，是一段富含G/C的回文序列，可以形成发夹结构，因此可以在此处终止转录。另外前导序列包含4个能进行碱基互补配对的片断1区、2区、3区和4区。它们能以1、2和3、4或2、3的方式进行配对，从而使前导序列形成二级结构的变化。在细菌中，翻译与转录偶连，一旦RNA聚合酶转录出trpmRNA中的前导肽编码区，核糖体便立即结合上去翻译这一序列。当细胞中缺乏色氨酸时，Trp-tRNATrp的浓度很低，核糖体翻译前导

16、肽至两个连续的色氨酸密码子处就陷入停顿，这时核糖体只占据1区，由RNA聚合酶转录的2区和3区便可配对，4区游离在外，这样就不能形成终止子结构，RNA聚合酶就可以一直转录下去，最后完成trp全部结构基因的转录，得到完整的mRNA分子。当细胞中存在色氨酸时，就有一定浓度的Trp-tRNATrp，核糖体便能顺利通过两个连续的色氨酸密码子而翻译出整个前导肽，直到前导肽序列后面的终止密码子UGA处停止。此时，核糖体占据了1区和2区，结果3区和4区配对，形成转录终止子结构，使RNA聚合酶终止转录。实现衰减调控的关键在于时间和空间上的巧妙安排。在空间上，两个色氨酸密码子的位置很重要，不可随意更改；在时间上，

17、核糖体停顿于两个色氨酸密码子上时，序列4应当还未转录出来1.简述乳糖操纵子的正负调控(dio kn)机制答案要点：包括(boku)正负调控两种（）阻遏(z )蛋白的负调控当细胞内有诱导物时，诱导物结合阻遏蛋白，此刻聚合酶与启动子形成开放式启动子复合物转录乳糖操纵子结构基因。当无诱导物时，阻遏蛋白结合与启动子与蛋白质部分重叠不转录。（=）CAP正调控当细胞内缺少葡萄糖时ATPCAMP结合，CRP生成CAP与CAP位点结合，增前RNA聚合酶转录活性。当有葡萄糖存在时CAMP分解多合成少，CAP不与启动子上的CAP位点结合RNA聚合酶不与操纵区结合无法起始转录结构基因表达下降。2.简述转录的基本过程

18、?答案要点：转录的基本过程包括：模板的识别；转录起始；通过启动子；转录的延伸和终止。1蛋白质生物合成的方向是( )。 从CN端 定点双向进行 从N端、C端同时进行 从NC端2不能合成蛋白质的细胞器是( )。 线粒体 叶绿体 高尔基体 核糖体3真核生物的延伸因子是( )。 EFTu EF一2 EF-G EF一1 4真核生物的释放因子是( )。 RF RF一1 RF一2 RF一3 5能与tRNA反密码子中的I碱基配对的是( )。 A、G C、U U U、C、A 6蛋白质合成所需能量来自( )。 ATP GTP ATP、GTP GTP 7tRNA的作用是( )。 将一个氨基酸连接到另一个氨基酸上 把

19、氨基酸带到mRNA位置上 将mRNA接到核糖体上 增加氨基酸的有效浓度8关于核糖体的移位，叙述正确的是( )。 空载tRNA的脱落发生在“A”位上 核糖体沿mRNA的35方向相对移动 核糖体沿mRNA的53方向相对移动 核糖体在mRNA上一次移动的距离相当于二个核苷酸的长度9在蛋白质合成中，下列哪一步不需要消耗高能磷酸键( )。 肽基转移酶形成(xngchng)肽键 氨酰一tRNA与核糖体的“A，位点结合(jih) 核糖体沿mRNA移动(ydng) fMettRNAf与mRNA的起始密码子结合以及与大、小亚基的结合10在真核细胞中肽链合成的终止原因是( )。 已达到mRNA分子的尽头 具有特异

20、的tRNA识别终止密码子 终止密码子本身具有酯酶作用，可水解肽酰与tRNA之是的酯键 终止密码子被终止因子(RF)所识别11蛋白质生物合成中的终止密码是( )。 UAA UAU UAC UAG UGA12根据摆动假说，当tRNA反密码子第1位碱基是I时，能够识别哪几种密码子( ) A C G T U13下列哪些因子是真核生物蛋白质合成的起始因子( )。 IF1 IF2 eIF2 eIF4 elF4A14蛋白质生物合成具有下列哪些特征( )。 氨基酸必须活化 需要消耗能量 每延长一个氨基酸必须经过进位、转肽、移位、税落四个步骤 合成肽链由C端向N端不断延长 新生肽链需加工才能成为活性蛋白质15下

21、列哪些内容属于蛋白质合成后的加工、修饰( )。切除内含子，连接外显子 切除信号肽 切除N-端Met形成二硫键 氨的侧链修饰16蛋白质生物合成过程中，下列哪些步骤需要消耗能量( )。 氨基酸分子的活化 70S起始复合物的形成 氨酰tRNA进入核糖体A位 肽键形成 核糖体移位17原核生物的肽链延伸过程有下列哪些物质参与( )。肽基转移酶 鸟苷三磷酸 mRNA 甲酰甲硫氨酰-tRNAEF-Tu、EF-Ts、 EF-G18.Shine-Dalgarno顺序(SD-顺序)是指: ( )在mRNA分子的起始码上游8-13个核苷酸处的顺序在DNA分子上转录起始点前8-13个核苷酸处的顺序16srRNA3端富

22、含嘧啶的互补顺序 启动基因的顺序特征 以上都正确19.在研究蛋白合成中,可利用嘌呤霉素,这是因为它: ( )使大小亚基解聚 使肽链提前释放 抑制氨基酰-tRNA合成酶活性 防止多核糖体形成 以上都正确20.氨基酸活化酶：( )活化氨基酸的氨基 利用GTP作为活化氨基酸的能量来源催化在tRNA的5磷酸与相应氨基酸间形成酯键每一种酶特异地作用于一种氨基酸及相应的tRNA 以上都不正确(五)是非题1DNA不仅决定遗传性状，而且还直接表现遗传性状。( )2密码子在mRNA上的阅读(yud)方向为5 3。( )3每种氨基酸都有两种以上(yshng)密码子。( )4一种tRNA只能(zh nn)识别一种密

23、码子。( )5线粒体和叶绿体的核糖体的亚基组成与原核生物类似。( )6大肠杆菌的核糖体的小亚基必须在大亚基存在时，才能与mRNA结合。( )7大肠杆菌的核糖体的大亚基必须在小亚存在时，才能与mRNA结合。( )8在大肠杆菌中，一种氨基酸只对应于一种氨酰-tRNA合成酶。( )9氨基酸活化时，在氨酰-tRNA合成酶的催化下，由ATP供能，消耗个高能磷酸键。( )10线粒体和叶绿体内的蛋白质生物合成起始与原核生物相同。( )11每种氨基酸只能有一种特定的tRNA与之对应。( )12AUG既可作为fMet-tRNAf和Met-tRNAi的密码子，又可作为肽链内部Met的密码子。( )13构成密码子和

24、反密码子的碱基都只是A、U、C、G。( )14核糖体大小亚基的结合和分离与Mg2+，的浓度有关。( )15核糖体的活性中心“A”位和“P”位都主要在大亚基上。( )16. E.coli中，DnaA与复制起始区DNA结合，决定复制的起始。( )1DNA以半保留方式复制，如果一个具有放射性标记的双链DNA分子，在无放射性标记的环境中经过两轮复制。其产物分子的放射性情况如何( )。其中一半没有放射性 都有放射性半数分子的两条链都有放射性 都不含放射性2关于DNA指导下的RNA合成的下列论述除了哪一项都是正确的( )。 只有存在DNA时，RNA聚合酶才能催化磷酸二酯键的形成。 在合成过程中，RNA聚合

25、酶需要一个引物。 RNA链的延长方向是5 3。 在多数情况下，只有一条DNA链作为模板。 3下列关于DNA和RNA聚合酶的论述哪一种是正确的( ): RNA聚合酶用核苷二磷酸而不是核苷三磷酸来合成多核苷酸链 RNA聚合酶需要引物，并在生长的多核苷酸链的5端加上核苷酸 DNA聚合酶能在核苷酸链的两端加上核苷酸 所有RNA和DNA聚合酶只能在生长的多核苷酸链的3端加上核苷酸。 4修补胸腺嘧啶有数种方法，其中之一是用DNA连接酶、DNA聚合酶等催化进行，试问这些酶按下列哪种顺序发挥作用( )： DNA连接酶DNA聚合酶核酸内切酶 DNA聚合酶核酸内切酶DNA连接酶 核酸内切酶DNA聚合酶DNA连接酶

26、核酸内切酶DNA连接酶DNA聚合酶5DNA聚合酶在分类时属于六大酶类中的哪一种( )。 合成酶类 转移酶类 裂解酶类 氧化还原酶类 6催化真核生物mRNA生物合成的RNA聚合酶对-鹅膏蕈碱( )。 不敏感 敏感 高度敏感 低度敏感 7DNA复制中RNA引物的主要作用是( )。 引导(yndo)合成冈奇片段 作为合成冈奇片段(pin dun)的模板 为DNA合成(hchng)原料dNTP提供附着点 激活DNA聚合酶 8下列关于单链结合蛋白的描述哪个是错误的( )。 与单链DNA结合防止碱基重新配对 保护复制中单链DNA不被核酸酶降解 与单链DNA结合，降低双链DNA Tm值 以上都不对 9紫外线

27、对DNA的损伤主要是( )。 引起碱基置换 形成嘧啶二聚体 导致碱基缺失 发生碱基插入 l0有关转录的错误描述是( )。 只有在DNA存在时，RNA聚合酶方可催化RNA 需要NTP做原料 RNA链的延伸方向是3 5 RNA的碱基需要与DNA互补 11关于逆转录作用的错误叙述是( )。 以RNA为模板合成DNA 需要一个具有3-OH末端的引物 以5 3方向合成，也能3 5方向合成 以dNTP为底物12体内参与甲基化反应的直接甲基供体是( )。 Met S腺苷甲硫氨酸 甲酰甲硫氨酸 Met-tRNA 13关于大肠杆菌DNA聚合酶I的下列论述哪些是正确的( )。 它是一个金属酶 它能从3-OH端逐步

28、水解单股DNA链 它在双螺旋区有5 3核酸酶活性 它需要DNA模板上的游离5-OH ；14试将下列DNA复制的有关步骤按正确的顺序排列( )。 DNA指导的RNA聚合酶合成RNA引物 解旋蛋白打开DNA双链 DNA指导的DNA聚合酶合成的DNA互补链 DNA连接酶连接DNA片段 核酸内切酶切除RNA引物 15下列关于核不均一RNA(hnRNA)的论述哪些是正确的( )。 它们的寿命比大多数细胞液的RNA为短 在3端有一个多聚腺苷酸(polyA)长尾，是由DNA编码的 它们存在于细胞核的核仁外周部分 链内核苷酸不发生甲基化反应 有大约四分之三成份将被切除棹，以形成mRNA16DNA复制的精确性远

29、高于RNA的合成，这是因为( )。 新合成的DNA链与模板链形成了双螺旋结构，而RNA链不能 DNA聚合酶有3 5外切酶活力，而RNA聚合酶无相应活力脱氧核苷酸之间的氢键配对精确性高于脱氧核苷酸与核苷酸之间的配对DNA聚合酶有5 3外切酶活力，RNA聚合酶无此活性17有关逆转录酶的论述哪些是正确的( )。具有依赖于RNA的DNA聚合酶活性具有依赖于DNA的DNA聚合酶活性不具备5 3或3 5核酸外切酶活性催化合成反应时，需要模板及3-OH引物18下列哪几种突变最可能是致命的( )。腺嘌呤取代(qdi)胞嘧啶 胞嘧啶取代(qdi)尿嘧啶缺失(qu sh)三个核苷酸 插入二个核苷酸19Crick于

30、1958年提出的中心法则包括( )。DNA复制 RNA复制 转录 逆转录 翻译20DNA生物合成中需要以下哪些酶参与( )。引物酶 解旋酶 解链酶 DNA连接酶 DNA聚合酶21RNA聚合酶的核心酶由以下哪些亚基组成( )。 22RNA生物合成的终止需要以下哪些成分( )。终止子 因子 因子 dna蛋白 亚基23RNA与DNA生物合成相同的是( )。需RNA引物 以3 5方向DNA为模板 两条模板链同时合成新链生成方向53 形成3,5- 磷酸二酯键24DNA的切除修复需要以下哪几种酶参与( )光裂合酶 核酸内切酶 DNA聚合酶I DNA连接酶 RNA聚合酶25目的基因的制备方法有( )DNA复制 RNA转录 mRNA逆转录 化学合成法 限制性内切酶切取26真核细胞mRNA的加工修饰包括以下内容( )。切除内含子，连接外显子 5端接上“帽子” 3端接上CCA 3端添加多聚(A)尾 碱基甲基化27. 指导合成蛋白质的结构基因大多数是( )单考贝顺序 中度重复顺序高度重复顺序回文顺序 以上都正确28.下面