结核分枝杆菌课件

1、病原生物学教研室Department of pathogenic Biology of Gannan Medical University医学微生物学Medical Microbiology第十三章 呼吸道感染细菌传播途径：呼吸道传播 包括：结核分枝菌、白喉杆菌、嗜肺军团菌、百日咳鲍特菌、流感嗜血杆菌及肺炎克雷伯菌等第一节 结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)一类细长弯曲的杆菌，因有分枝生长的趋势而命名主要特点细长弯曲，分枝状生长细胞壁含有大量脂质（分枝菌酸）常用抗酸染色鉴定，呈抗酸染色阳性引起疾病都呈慢性，并伴肉芽肿分类结核分枝杆菌复合群非结核分枝杆菌麻风分枝

2、杆菌分枝杆菌属概述分类生长特性主要对人致病的分枝杆菌结核分枝杆菌复合群生长缓慢结核分枝杆菌、牛分枝杆菌非结核分枝杆菌组生长缓慢、光产色堪萨斯分枝杆菌、海分枝杆菌组生长缓慢、暗产色瘰疠分枝杆菌组生长缓慢、不产色鸟-胞内分枝杆菌组生长快速、偶发分枝杆菌麻风分枝杆菌人工培养基上不生长分枝杆菌的分类抗酸染色由于细菌细胞壁中含大量脂质，一般不易着色，若经加温或延长染色时间而着色后又能抵抗强脱色剂盐酸酒精的脱色，故又称抗酸杆菌(acid-fast bacilli)抗酸染色法(acid-fast stain) ：以5石炭酸复红加温染色，再用3盐酸酒精脱色，然后用美蓝复染，则分枝杆菌呈红色(+)，其他细菌和背

3、景物质为蓝色(-)。结核分枝杆菌俗称结核杆菌，引起人类结核病致病菌主要为结核分枝杆菌（M. tuberculosis)、牛分枝杆菌(M. bovis)世界上1/3人感染，70%在亚洲世界防治结核病日：3月24日流行病学全球总疫情20亿人口感染了结核菌，现症结核病人2000万，每年新发病人数8001000万，每年300万人死于结核病。我国疫情现有活动性肺结核病人500万人，传染性肺结核病人200万人，每年因结核病死亡25万人。形态与染色细长略带弯曲，分枝状，无芽胞、鞭毛、和荚膜，抗酸染色阳性L型Much颗粒培养特点专性需氧生长缓慢营养要求高，常用罗氏培养基生长现象液体：表面生长（菌膜）固体：颗粒

4、、结节、花菜状菌落，乳白或米黄，不透明生化反应不发酵糖类触酶试验阳性，而热触酶试验阴性抵抗力四不怕干燥酸（3% HCl或6% H2SO4) 或碱（4% NaOH) 有抵抗力碱性染料青霉素等抗生素四怕乙醇湿热紫外线抗痨药物（链霉素、异烟肼、利福平等）变异性形态结构变异：结核杆菌的L型：颗粒状、丝状、Much颗粒毒力变异：卡介苗BCG：Calmette和Gurin将牛分枝杆菌经13年230次传代而获得的减毒活疫苗株耐药性变异：耐异烟肼及其他抗结核药物的结核菌株日益增多致病物质二、致病性脂质索状因子（破坏细胞，引起肉芽肿）磷脂（形成结核结节）硫酸脑苷脂（抑制吞噬体与溶酶体结合）蜡质D（引起迟发性过敏

5、反应）蛋白质引起迟发性过敏反应多糖所致疾病感染方式呼吸道、消化道或皮肤损伤侵入机体所致疾病结核病，以肺结核常见肺部感染原发感染：外源性感染多发生于儿童（无免疫力）原发综合征 (原发病灶、淋巴管炎、肺门淋巴肿大等)形成结核结节（即结核肉芽肿），少数病灶扩散，引起全身TB转归原发后感染：外或内源性感染多见成人病灶局限 引起局部TB、开放性TB（反应剧烈，干酪性坏死、空洞）吞噬细胞内繁殖（渗出性炎症）原发性感染原发性感染见于学龄儿童及未受过感染的成人。结核分枝杆菌 肺泡全身性粟粒性结核结核结节 淋巴结病灶逐渐纤维化和钙化原发性综合症吞噬细胞肺外感染进入血液循环引起肺内、外播散，如脑、肾、肠、腹腔大多

6、与结核分枝杆菌L型有关三、免疫性机体抗结核免疫特点：传染、免疫、超敏反应共存免疫机制主要是以T细胞为主的细胞免疫属于感染免疫(infection immunity)，又称有菌免疫免疫与超敏反应细胞免疫为主,迟发型超敏反应同时存在郭霍现象注射结核杆菌于豚鼠皮下初次注射 局部反应小 全身扩散 无免疫无超敏反应再次注射 局部反应大 不扩散 有免疫有超敏反应以前感染过或免疫豚鼠正常豚鼠24-48小时10-14天局部红肿、浅溃疡局部红肿、溃疡 不扩散，脱落后自行愈合坏死，经久不愈有毒TB菌全身扩散皮下郭霍现象结核菌素试验（OT试验）是应用结核菌素进行皮肤试验来测定机体对结核分枝杆菌是否能引起迟发型超敏反

7、应（型变态反应）的一种试验方法前臂皮内注射PPD5单位意义4872h红肿硬结超过5mm,阳性，有免疫力阴性，无免疫力（四种情况除外：1，2，3，4）应用选择卡介苗接种对象和测定卡介苗接种后的免疫效果。结核菌素试验阴性者应接种或补种卡介苗在未接种卡介苗的人群中作结核杆菌感染的流行病学调查,了解人群自然感染率作为婴幼儿(尚未接种过卡介苗者)结核病的辅助诊断测定肿瘤患者的细胞免疫功能四、微生物学检查法 标本处理：浓缩集菌(氢氧化钠处理） 直接镜检：抗酸染色 分离培养：培养基、时间（24周后见结果） 动物试验：豚鼠等 快速诊断：PCR等痰液等四、防治原则预防一般性预防：卫生宣传、提高机体抵抗力特异性预

8、防：发现和治疗痰菌阳性者新生儿接种卡介苗治疗一般治疗：合理营养，注意休息抗结核药物链霉素、异烟肼、利福平等治疗原则：早期、联合、适量、规律、分阶段治疗和坚持全程第二节 非结核分枝杆菌(nontuberculosis mycobacteria)概念结核分枝杆菌、牛分枝杆菌与麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌对酸、碱比较敏感对常用的抗结核菌药物较耐受生长温度不如结核分枝杆菌严格多存在于环境中、为条件致病菌可引起结核样病变而受到关注抗原与结核分枝杆菌有交叉特性分类第组：光产色菌堪萨斯分枝杆菌，引起人类肺结核样病变第组：暗产色菌瘰疠分枝杆菌，引起儿童淋巴结炎第组：不产色菌鸟-胞内分枝杆菌，可引起结核样病变第组

9、：迅速生长菌耻垢分枝杆菌鉴别有否致病性可用抗煮沸试验加以区别L型第三节 麻风分枝杆菌 (Mycobacterium.leprae) 俗称麻风杆菌，引起麻风，是一种慢性传染病流行广泛，主要分布在亚、非和拉丁美洲生物学性状形态、染色与结核分枝杆菌相似麻风分枝杆菌是一种典型胞内菌麻风细胞体外人工培养至今仍未成功犰狳致病性与免疫性传播方式呼吸道也可通过接触传染发病慢, 病程长麻风的免疫主要是靠细胞免疫细菌主要侵犯神经、皮肤微生物学检查法显微镜检查可从患者鼻粘膜或皮损处取材，用抗酸性染色后检查一般瘤型和界线类患者标本中可找到细菌在细胞内存在，有诊断意义防治原则无特异性预防方法，隔离早发现，早治疗目前多采

10、用二三种药联合治疗第一节 白喉棒状杆菌(Corynebacterium diphtheriae)概述革兰阳性一端或两端膨大呈棒状，无荚膜、无鞭毛，不产生芽胞多为条件致病菌致病菌：白喉棒状杆菌形态与染色菌体细长微弯，一端或两端膨大呈棒状,常排列呈V、L形Albert染色，可出现异染颗粒metachromatic granule，在鉴定时有重要意义一、 生物学性状培养特性营养要求较高吕氏血清斜面（含有凝固血清）上生长迅速，异染颗粒明显选择鉴别培养基亚碲酸钾血平板(黑色菌落)抵抗力对湿热抵抗力弱抗寒冷和干燥对青霉素、氯霉素、红霉素敏感二、致病性致病物质白喉外毒素：棒状杆菌噬菌体带有编码外毒素的tox

11、基因,在溶原阶段基因整合到染色体上即可产生A亚单位和B亚单位B亚单位有结合和转位功能A亚单位上有1个催化区作用靶：心肌和神经细胞作用机制A亚单位可使细胞延伸因子-2（EF-2）灭活，影响蛋白质的合成。作用特点毒性作用大，1分子能杀一个细胞多种细胞，特别心肌、神经细胞均有毒素受体肿瘤细胞对此毒素特别敏感所致疾病 白喉-急性呼吸道传染病传染源：患者及带菌者传播途径：飞沫或污染临床表现细菌-上呼吸道粘膜， 生长繁殖，产生毒素, 细菌与毒素共同作用引起局部症状：炎症，坏死，纤维蛋白渗出 假膜窒息毒素入血引起全身中毒症状外周N-N炎：膈肌麻痹-呼吸困难 声带麻痹-声音嘶哑 软颌麻痹-吞咽困难心肌-心肌炎

12、 所致疾病-白喉白喉棒状杆菌（鼻咽腔）飞沫 污染物品鼻 咽喉气管局部细菌和毒素的作用灰白色假膜（渗出的纤维素和白细胞及坏死组织凝固在一起）粘膜水肿及假膜脱落，引起呼吸道阻塞，甚至窒息死亡。外毒素入血毒血症心肌肝肾上腺外周神经内脏出血心肌炎软腭麻痹 声嘶 肾上腺功能障碍（27d潜伏期）白喉假膜抗毒素免疫感染后机体可获得牢固的免疫力机体还可通过其它方式获得免疫力：六月以下婴儿-母亲成人-隐性感染、疫苗易感者15岁儿童成人-也有可能三、免疫性锡克试验(Schick test)原理：毒素抗毒素中和反应方法：注射毒素（毒性、蛋白质） 试验 加热破坏的毒素（无毒、蛋白质） 对照 结果：48小时观察结果， 有红肿 阳性反应 无免疫力 无红肿 阴性反应 有免疫力应用：检查机体对白喉的免疫力 预防接种前的筛选与接种后效果观察 流行病学调查Schick test结果分析 试验侧 对照侧 本质阴性反应 有免疫力阳性反应 2448h 无免疫力 47d达峰假阳性反应 618h红肿 同前 有免疫力，超敏反应 12d消退混合反应 618h红肿 618h红肿 无免疫力，超敏反应 47d达峰 34d反应消退微生物学检查法标本直接涂片镜检形态，异染颗粒，分离培养-